六堡茶鮮葉中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的檢測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的檢測方法，具體地說，是一種六堡茶鮮葉中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的檢測方法，屬于化學(xué)檢測技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]六堡茶屬于黑茶類，主產(chǎn)于廣西梧州六堡鎮(zhèn)，該品種茶葉具有紅、濃、陳、醇的特點，具有消暑祛濕、明目清心、幫助消化的功效，因為六堡茶所含脂肪分解酵素高于其他茶類，因此具有健胃養(yǎng)神、減肥健身的功效，是一種廣受歡迎的茶類。影響六堡茶質(zhì)量的主要是農(nóng)藥殘留，國際上一些茶葉進口國制定了嚴格的農(nóng)藥殘留限量標準，對于農(nóng)藥超標的茶葉進行就地封存、銷毀或退回原產(chǎn)地過的政策，對于茶葉貿(mào)易具有很大的影響。擬除蟲菊酯農(nóng)藥用量少，殺蟲效果好，是當前廣泛應(yīng)用的茶葉農(nóng)藥(茶葉除蟲劑)，為了從源頭上控制(茶葉產(chǎn)品)農(nóng)藥殘留，需要直接對鮮葉進行檢測，以實現(xiàn)農(nóng)藥源頭控制，對于茶園用藥進行有效管理，以此減少農(nóng)藥違規(guī)造成的環(huán)境污染，提升飲茶安全性。因為鮮葉中含有較多的干擾物，因此采用有機溶劑提取，層析凈化后進行氣相色譜檢驗，能夠依此建立有效的六堡茶鮮葉的農(nóng)藥檢測方法，為提升飲茶安全性提供保障。
[0003]擬除蟲菊酯的殺蟲機理
[0004]擬除蟲菊酯是一種仿生藥物，該藥物具有悠久的使用歷史。擬除蟲菊酯通過接觸昆蟲后迅速滲入蟲體，與昆蟲神經(jīng)系統(tǒng)作用從而改變神經(jīng)突觸膜對離子的通透性，引發(fā)昆蟲持續(xù)興奮，最后麻痹而死。相比于常用的殺蟲劑，擬除蟲菊酯的殺蟲力能夠高出1-2個數(shù)量級，擊倒力強，對于農(nóng)林、園藝、畜牧等地方的開沖均由良好的防治效果，而且該藥物的毒性遠低于有機磷的危害，在自然界易分解，在動物體內(nèi)轉(zhuǎn)化迅速，對于環(huán)境影響較小。因為該藥物殺蟲作用快、廣譜性、易降解，因此廣泛的應(yīng)用于茶園、果園、農(nóng)田等害蟲的防治，是廣泛應(yīng)用的農(nóng)藥，但是因為其抗性和環(huán)境安全性，因此被列為多種農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留的重點檢測對象。
[0005]擬除蟲菊酯的危害與殘留
[0006]擬除蟲菊酯是一種神經(jīng)毒劑，對于神經(jīng)系統(tǒng)的毒害作用是多環(huán)節(jié)的，可能會引發(fā)神經(jīng)損傷，導(dǎo)致淋巴和脾臟受損，甚至誘發(fā)癌變。當前該藥物已經(jīng)占全世界化學(xué)農(nóng)藥總產(chǎn)量的25%左右。因為貿(mào)易壁皇的原因，各國對于擬除蟲菊酯的殘留量規(guī)定不一致，因此對茶葉貿(mào)易造成影響。
[0007]擬除蟲菊酯檢測技術(shù)
[0008]因為擬除蟲菊酯殘留量微少，需要高靈敏性的檢測技術(shù)進行殘留量的檢測，當前常用的方法包括氣相色譜法、氣相色譜質(zhì)譜法、高效液相色譜法、免疫分析法等多種方法。為了確保檢測的準確性，所選擇的方法具有較強的重復(fù)性與準確度，確保檢測方式滿足大批量樣品多組分快速測定要求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]針對上述問題，本發(fā)明提供的目的是提供一種檢測靈敏度高、對于茶葉質(zhì)量具有重要的意義的六堡茶鮮葉中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的檢測方法。
[0010]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案是這樣的:
[0011 ] —種六堡茶鮮葉中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的檢測方法，其特征在于，包括下
[0012]述步驟:
[0013]I)標準樣品的制備
[0014]準確稱取聯(lián)苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、S-氰戊菊酯，采用氯仿溶解配制成為500yg/mL的儲備液待用；
[00?5] 3)樣品制備與提取
[0016]從茶園取未使用任何農(nóng)藥的鮮葉樣品10g，置于組織搗碎機中搗碎，稱取搗碎的樣品1.0 m g，加入5 O m L體積比1:1的乙醚和乙酸乙酯于搗碎機中勾楽提取，真空抽濾并用1mL混合液洗滌濾渣，采用過飽和硫酸鈉加入分液漏斗中萃取，分出有機相后濃縮至2mL上氣相色譜凈化柱，在1.5cmX 20cm的玻璃層析柱中加入無水硫酸鈉與中性氧化招，上層再加入Icm無水硫酸鈉，加無水預(yù)洗后將提取液移取ImL入柱，并且采用體積比98: 2乙醚和乙酸乙酯的混合液進行淋洗，濃縮至500mL待測；
[0017]進一步的，上述的六堡茶鮮葉中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的檢測方法，所述的氣相色譜采用481161^氣相色譜儀采用的載氣為氮氣，，柱前壓為15?81，尾吹氣50111171^11，柱溫在 80°C保持 2min，再以 20°C/min 升至 280°C，保持 20min。
[0018]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的技術(shù)方案，檢測結(jié)果線性良好、操作簡便、抗基質(zhì)干擾、結(jié)果可靠，為食品的質(zhì)量監(jiān)管提供了有力的技術(shù)支撐。
【附圖說明】
[0019]圖1是本發(fā)明提供的氣相色譜曲線圖；
[0020]其中:I為聯(lián)苯菊酯，2為甲氰菊酯，3為三氟氯氰菊酯，4、5、6為氯氰菊酯，7為氰戊菊酯，8為S-氰戊菊酯
【具體實施方式】
[0021]下面結(jié)合【具體實施方式】，對本發(fā)明的權(quán)利要求做進一步的詳細說明，但不構(gòu)成對本發(fā)明的任何限制，任何在本發(fā)明權(quán)利要求保護范圍內(nèi)所做的有限次的修改，仍在本發(fā)明的權(quán)利要求保護范圍之內(nèi)。
[0022]實施例1
[0023]本文所采用的六堡茶鮮葉為蒼梧縣六堡鎮(zhèn)某茶業(yè)有限公司茶園現(xiàn)摘鮮葉作為試驗，采用氣相色譜法對六堡茶鮮葉的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留進行檢測，該方法具有靈敏度高、假陽性少的特點，是國際上公認的定量確認的方法。
[0024]儀器與試劑
[°°25] 采用Agi lent氣相色譜儀，79型多用高速組織搗碎機，美國Sigma公司娃土，無水硫酸鈉、活性炭均經(jīng)過脫水處理，試劑均為分析純試劑，所有試劑經(jīng)過重蒸餾后使用，采用雙蒸餾水作為試驗用水。
[0026]方法
[0027]3.2.1標準樣品的制備
[0028]聯(lián)苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、S-氰戊菊酯均為德國Augsburg產(chǎn)品，準確稱取上述標準品，采用氯仿溶解配制成為500yg/mL的儲備液待用。
[0029]3.2.2樣品制備與提取
[0030]從茶園取未使用任何農(nóng)藥的鮮葉樣品200g，置于組織搗碎機中搗碎。稱取搗碎的樣品1.0mg，加入I OOmL V (乙醚):V (乙酸乙酯)=1:1于搗碎機中勾楽提取，真空抽濾并用1mL混合液洗滌濾渣，采用過飽和硫酸鈉加入分液漏斗中萃取，分出有機相后濃縮至2mL上凈化柱。在1.5cm X 20cm的玻璃層析柱中加入無水硫酸鈉與中性氧化招，上層再加入I cm無水硫酸鈉，加無水預(yù)洗后將提取液移取ImL入柱，并且采用V(乙醚):V(乙酸乙酯)=98: 2的混合液進行淋洗，濃縮至10mL待測。
[0031 ] 色譜條件
[0032]氣相色譜所采用的載氣為氮氣，柱前壓為15psi，尾吹氣60mL/min，柱溫在60°C保持 2min，再以 30°C/min 升至 280°C，保持 20min。
[0033]平均回收率在94.5%以上，50mL洗脫劑用量6種農(nóng)藥均取得90%以上的回收率。
[0034]添加回收實驗
[0035]采用空白茶葉鮮葉樣品進行回收率試驗，研究表明六種農(nóng)藥的平均添加回收率為96.6%-102.5%，表明鮮葉中的擬除蟲菊酯類檢測滿足要求，氣相色譜曲線如圖1所示，其中:I為聯(lián)苯菊酯，2為甲氰菊酯，3為三氟氯氰菊酯，4、5、6為氯氰菊酯，7為氰戊菊酯，8SS-氰戊菊酯。
【主權(quán)項】
1.一種六堡茶鮮葉中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的檢測方法，其特征在于，包括下述步驟: I)標準樣品的制備 準確稱取聯(lián)苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、S-氰戊菊酯，采用氯仿溶解配制成為500yg/mL的儲備液待用； 3)樣品制備與提取 從茶園取未使用任何農(nóng)藥的鮮葉樣品100g，置于組織搗碎機中搗碎，稱取搗碎的樣品1.0mg，加入50mL體積比1:1的乙醚和乙酸乙酯于搗碎機中勾楽提取，真空抽濾并用I OmL混合液洗滌濾渣，采用過飽和硫酸鈉加入分液漏斗中萃取，分出有機相后濃縮至2mL上氣相色譜凈化柱，在1.5cmX 20cm的玻璃層析柱中加入無水硫酸鈉與中性氧化招，上層再加入Icm無水硫酸鈉，加無水預(yù)洗后將提取液移取ImL入柱，并且采用體積比98:2乙醚和乙酸乙酯的混合液進行淋洗，濃縮至500mL待測。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的六堡茶鮮葉中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的檢測方法，其特征在于，所述的氣相色譜采用Agilent氣相色譜儀采用的載氣為氮氣，，柱前壓為15psi，尾吹氣50mL/min，柱溫在 80°C保持 2min，再以 20°C/min 升至 280°C，保持 20min。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種六堡茶鮮葉中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的檢測方法，旨在提供一種檢測靈敏度高、對于茶葉質(zhì)量具有重要的意義；其技術(shù)方法：1)標準樣品的制備；2)樣品制備與提取，稱取搗碎的樣品10.0mg，加入50mL體積比1:1的乙醚和乙酸乙酯于搗碎機中勻漿提取，真空抽濾并用10mL混合液洗滌濾渣，采用過飽和硫酸鈉加入分液漏斗中萃取，分出有機相后濃縮至2mL上氣相色譜凈化柱，在1.5cm×20cm的玻璃層析柱中加入無水硫酸鈉與中性氧化鋁，上層再加入1cm無水硫酸鈉，加無水預(yù)洗后將提取液移取1mL入柱，并且采用體積比98:2乙醚和乙酸乙酯的混合液進行淋洗，濃縮至500mL待測；屬于化學(xué)檢測技術(shù)領(lǐng)域。
【IPC分類】G01N30/02
【公開號】CN105651902
【申請?zhí)枴?br>【發(fā)明人】李德光, 呂立盈, 李春燕, 聶少姬, 唐嘉慧, 陳東紅, 麥豐, 黃敏
【申請人】梧州市產(chǎn)品質(zhì)量檢驗所
【公開日】2016年6月8日
【申請日】2016年4月14日