一種免疫染色機(jī)的制作方法
【專利摘要】本實(shí)用新型涉及一種免疫染色機(jī)，其包括：框架及支撐裝置、免疫染色裝置、圖像采集裝置、加熱裝置和控制系統(tǒng)。本實(shí)用新型與現(xiàn)有技術(shù)相比的有益效果在于能對(duì)同一組織切片進(jìn)行多次免疫染色，能對(duì)同一組織切片進(jìn)行交替的免疫染色和圖像采集，有助于研究同一細(xì)胞的多種抗原表達(dá)狀況。
【專利說明】
一種免疫染色機(jī)
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本實(shí)用新型屬于檢測(cè)設(shè)備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及的是應(yīng)用于醫(yī)院病理組織切片中的一種免疫染色機(jī)。
【背景技術(shù)】
[0002]免疫染色是利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，檢測(cè)特定蛋白(抗原)的表達(dá)情況，是發(fā)現(xiàn)機(jī)體在生理或病理狀態(tài)下功能變化最常用的方法之一，最常用的是免疫組織化學(xué)染色和免疫熒光染色。在實(shí)驗(yàn)過程中，經(jīng)常需要研究至少兩種抗原/蛋白在同一細(xì)胞或組織標(biāo)本中的表達(dá)，以便明確它們各自的定位或共表達(dá)情況。目前最常采用的方法是流式細(xì)胞術(shù)，但這種技術(shù)需要的細(xì)胞量較大，且經(jīng)過固定和石蠟包埋的組織用于流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)效果不佳，不能準(zhǔn)確顯示各種抗原在組織和細(xì)胞在體內(nèi)的自然分布狀況。如果組織標(biāo)本量極少(如細(xì)針穿刺標(biāo)本)或組織內(nèi)待檢測(cè)細(xì)胞量極少，則很難進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)。通過在組織切片上對(duì)同一標(biāo)本進(jìn)行多次免疫染色來研究多種抗原的表達(dá)，則能解決這個(gè)問題。例如，對(duì)組織切片進(jìn)行抗原A的免疫熒光染色后，由于抗原與抗體的結(jié)合為并不牢固的非共價(jià)結(jié)合，可以把組織放入緩沖液中，適當(dāng)加熱，就可使已經(jīng)與抗原A結(jié)合的抗體及相應(yīng)的顯色劑脫離下來，又可以進(jìn)行抗原B的免疫熒光染色，采用同樣的方法還能進(jìn)行抗原C、抗原D的染色。目前已經(jīng)出現(xiàn)針對(duì)組織切片的多重免疫染色技術(shù)，即對(duì)同一組織切片進(jìn)行一次染色，研究多種抗原表達(dá)，如一種基于同種屬來源第一抗體的免疫焚光雙重標(biāo)記方法(CN201410099873.2)，這種方法的缺點(diǎn)是，在具體實(shí)施過程中，需要進(jìn)行標(biāo)記的抗原常不僅僅是兩種，多數(shù)情況下是5-10種，甚至達(dá)20余種，這種多重染色方法不能滿足需要，需要進(jìn)行多次染色。當(dāng)然，可將多重染色與多次染色方法結(jié)合起來，能提高工作效率。另外，在多次染色過程中，需要對(duì)組織切片進(jìn)行每次染色后拍照，將多次的染色照片進(jìn)行比對(duì)，才能弄清楚同一個(gè)細(xì)胞究竟表達(dá)哪些抗原，因而，所提供的裝置還要便于在顯微鏡下拍照。本申請(qǐng)者已經(jīng)公開一種用于對(duì)組織切片進(jìn)行多次免疫染色的載片夾(201520587855.9)，提供一種便于手工或機(jī)器全自動(dòng)化操作的用于對(duì)組織切片進(jìn)行多次免疫染色的載片夾，為了克服手工操作帶來的勞動(dòng)量增加及不易標(biāo)準(zhǔn)化等不足，有必要提供一種具備多次免疫染色和圖像采集功能的全自動(dòng)免疫染色儀。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本實(shí)用新型的目的在于提供一種免疫染色機(jī)，其所要解決的技術(shù)問題在于:采用現(xiàn)有免疫染色儀無法對(duì)同一組織切片進(jìn)行多次免疫染色，無法對(duì)同一組織切片進(jìn)行交替的免疫染色和圖像采集。
[0004]為解決上述技術(shù)問題，本實(shí)用新型提供一種免疫染色機(jī)，其包括:框架及支撐裝置、免疫染色裝置、圖像采集裝置、加熱裝置和控制系統(tǒng)。
[0005]所述框架及支撐裝置，由四根大框架安裝螺栓和相應(yīng)的大框架安裝螺母將上蓋板、下蓋板、左蓋板、右蓋板、前蓋板、后蓋板和載片夾安放板安裝在一起，形成以載片夾安放板分隔為上下兩部分的長(zhǎng)方體盒狀結(jié)構(gòu)。所述載片夾安放板呈“H”形，包括一條橫梁和兩條臂。
[0006]所述免疫染色裝置，包括微量移液器、移液器移動(dòng)載架、上液壓缸、縱向液壓缸、移液器液壓缸、中液壓缸、下液壓缸、吸液管載片、載片夾和真空栗、框架上部上導(dǎo)軌和框架上部下導(dǎo)軌及筒形載體。筒形載體安裝在載片夾安放板橫梁上面靠右側(cè)的部位，用于儲(chǔ)存載液。在上蓋板上以從左向右的方向開一個(gè)條形的窗，用于安裝移液器移動(dòng)載架在框架上部上導(dǎo)軌和框架上部下導(dǎo)軌上。所述上液壓缸從左向右安裝在上蓋板上，用于推動(dòng)移液器移動(dòng)載架左右位移;縱向液壓缸從上向下安裝在上蓋板上，用于推動(dòng)移液器移動(dòng)載體上下位移;移液器液壓缸安裝在移動(dòng)載體上，可推動(dòng)微量移液器取液推桿，實(shí)現(xiàn)微量移液器取液及吹液功能；中液壓缸從左向右安裝在載片夾安放板的橫梁下面靠近左側(cè)的部位，用于推動(dòng)吸液管載片至載片夾安放板所安放載片夾的正下方以及相應(yīng)的復(fù)位。所述載片夾安裝在載片夾安放板上筒形載體的左側(cè)。1-20張載片夾大小一致，與載片夾安放板的預(yù)留安裝部位吻合，所有載片夾以同方向呈線狀整齊橫向并列排列。所述各個(gè)液壓缸均安裝獨(dú)立的位移傳感器。
[0007]所述載片夾如專利(一種用于對(duì)組織切片進(jìn)行多次免疫染色的載片夾:201520587855.9)所述，由無色透明塑料制成，上片為篩狀，與一種用于對(duì)組織切片進(jìn)行多次免疫染色的載片夾的差別在于下片的邊緣有至少一個(gè)出液孔，該出液孔與上片與下片之間的縫隙相通，使上片和下片之間的液體可以通過這個(gè)孔被吸掉，上片與下片之間承載組織切片。
[0008]所述圖像采集裝置，包括下液壓缸、框架下部下導(dǎo)軌、框架下部上導(dǎo)軌、數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)移動(dòng)載體和數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)。所述框架下部下導(dǎo)軌、框架下部上導(dǎo)軌以從左向右的方向安裝在下蓋板上，所述數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)移動(dòng)載體安裝在框架下部下導(dǎo)軌和框架下部上導(dǎo)軌上，所述數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)安裝在數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)移動(dòng)載體上，所述下液壓缸安裝在數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)移動(dòng)載體的左側(cè)，用于推動(dòng)數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)到達(dá)載片夾所在位置及相應(yīng)的復(fù)位。所述數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)與傳統(tǒng)數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)的差別在于:所采用的顯微鏡為倒置顯微鏡，可提供至少白色、紅色、綠色和藍(lán)色四種光源。
[0009]所述主控制器獲取各液壓缸的位移傳感器數(shù)據(jù)，并通過調(diào)節(jié)對(duì)應(yīng)液壓缸電磁閥實(shí)現(xiàn)各液壓缸的精確控制；
[0010]所述主控制器將數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)移動(dòng)至載片夾位置后發(fā)送指令給掃描儀開始掃描，掃描的數(shù)據(jù)傳輸至PC機(jī)處理，一個(gè)樣本掃描完成后主控制器將掃描儀移動(dòng)至下一個(gè)樣本位置，并再次發(fā)送指令個(gè)掃描儀，使其重新開始掃描。
[0011]所述主控制器獲取溫度傳感器數(shù)據(jù)并通過調(diào)節(jié)加熱裝置實(shí)現(xiàn)對(duì)樣本周圍溫度的控制。所述加熱裝置安裝在下板上，溫度傳感器安裝在框架內(nèi)，使框架內(nèi)的溫度控制在37°c(工作環(huán)境溫度必須低于37°C)。
[0012]工作原理及過程:
[0013]在工作時(shí)，將承載了組織切片(石蠟切片需經(jīng)脫水)的載片夾放置于載片夾安放板的預(yù)設(shè)位置，將載液加注到筒形載體中；根據(jù)擬吸取的載液所在位置，上液壓缸驅(qū)動(dòng)移液器移動(dòng)載架使微量移液器沿左右方向位移，在到達(dá)筒形載體上方后，縱向液壓缸推動(dòng)移液器移動(dòng)載體使微量移液器向下位移，使移液器的吸頭下降到達(dá)載液，移液器液壓缸向上拉起微量移液器取液推桿，實(shí)現(xiàn)微量移液器取液功能;然后由縱向液壓缸驅(qū)動(dòng)移液器移動(dòng)載體使微量移液器向上位移，使移液器的吸頭上升而離開載液，由上液壓缸推動(dòng)移液器移動(dòng)載架使微量移液器向右位移，當(dāng)移動(dòng)至擬加注載液的載片夾所在位置，縱向液壓缸推動(dòng)移液器移動(dòng)載架使微量移液器向下位移至接近載片夾，由移液器液壓缸向下推微量移液器取液推桿，將液體準(zhǔn)確的加注到組織切片上。經(jīng)過設(shè)定的一定時(shí)間后，中液壓缸推動(dòng)吸液管載片至載片夾的正下方，真空栗開啟，吸去載片夾內(nèi)的載液，然后可以類似的步驟進(jìn)行下一種載液的加注。若擬進(jìn)行圖像采集，下液壓缸驅(qū)動(dòng)數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)至載片夾所在位置，并在掃描完成后下液壓缸驅(qū)動(dòng)數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)復(fù)位。在完成圖像采集后，再進(jìn)行下一步操作。在整個(gè)過程中，主控制器通過獲取各液壓缸的位移傳感器數(shù)據(jù)而精確控制對(duì)應(yīng)液壓缸電磁閥；精確控制數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)移動(dòng)至載片夾位置及相應(yīng)的掃描過程，掃描的數(shù)據(jù)傳輸至PC機(jī)處理;獲取溫度傳感器數(shù)據(jù)并通過調(diào)節(jié)加熱裝置實(shí)現(xiàn)對(duì)樣本周圍溫度的控制。
[0014]本實(shí)用新型與現(xiàn)有技術(shù)相比的有益效果是:能對(duì)同一組織切片進(jìn)行多次免疫染色;能對(duì)同一組織切片進(jìn)行交替的免疫染色和圖像采集。
[0015]【附圖說明】:
[0016]圖1為本實(shí)用新型的正剖視結(jié)構(gòu)圖；
[0017]圖2為本實(shí)用新型的左側(cè)視圖；
[0018]圖3為本實(shí)用新型的右側(cè)視圖；
[0019]圖4為本實(shí)用新型的載片夾安放板結(jié)構(gòu)形狀圖；
[0020]圖5為本實(shí)用新型的載片夾結(jié)構(gòu)圖；
[0021 ]圖6為本實(shí)用新型的各液壓缸安裝方式圖；
[0022]圖7為本實(shí)用新型的控制結(jié)構(gòu)模塊示意圖。
[0023]圖中:1、大框架安裝螺栓;2、大框架安裝螺母;3、上液壓缸;4?7、上液壓缸安裝螺釘；8、框架上部上導(dǎo)軌；9、框架上部上導(dǎo)軌安裝螺釘；10?13、縱向液壓缸安裝螺釘；14?17、縱向液壓缸安裝螺釘;18、縱向液壓缸;19、移動(dòng)載架;20、移液器移動(dòng)載體;21、框架上部下導(dǎo)軌;22、大框架安裝螺母;23、大框架安裝螺栓;24、移液器液壓缸;25、移液器液壓缸安裝螺釘;26、微量移液器;27、移液器安裝條;28、移液器安裝螺釘;29、載液及筒形載體;30、右蓋板;31、下蓋板;32、加熱裝置;33、框架下部下導(dǎo)軌;34、框架下部上導(dǎo)軌;35、框架下部導(dǎo)軌安裝螺釘;36、數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)移動(dòng)載體;37?38、數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)安裝螺釘;39、數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng);40、真空栗安裝支架;41、真空栗;42、中液壓缸支架;43、下液壓缸;44、中液壓缸橫支架;45、中液壓缸;46、載片夾安放板;47、吸液總管;48、中液壓缸安裝螺釘;49、吸液管載片；50、吸液橡膠管；51、左蓋板；52、上蓋板；53、載片夾；54、上片；55、下片;56、出液孔;57、組織切片。
【具體實(shí)施方式】
[0024]下面結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)用新型的實(shí)施方式做進(jìn)一步描述:
[0025]本實(shí)用新型所述框架及支撐裝置，由四根大框架安裝螺栓I和相應(yīng)的大框架安裝螺母2將上蓋板52、下蓋板31、左蓋板51、右蓋板30、前蓋板、后蓋板和載片夾安放板46安裝在一起，形成以載片夾安放板46分隔為上下兩部分的長(zhǎng)方體盒狀結(jié)構(gòu)。所述載片夾安放板46呈“H”形，包括一條橫梁和兩條臂。
[0026]所述免疫染色裝置，包括微量移液器26、移液器移動(dòng)載架19、上液壓缸3、縱向液壓缸18、移液器液壓缸24、中液壓缸45、下液壓缸43、吸液管載片49、載片夾53和真空栗41、框架上部上導(dǎo)軌8和框架上部下導(dǎo)軌21及筒形載體29。筒形載體29安裝在載片夾安放板46橫梁上面靠右側(cè)的部位。在上蓋板52上以從左向右的方向開一個(gè)條形的窗，用于安裝移液器移動(dòng)載架19在框架上部上導(dǎo)軌8和框架上部下導(dǎo)軌21上。所述上液壓缸3從左向右安裝在上蓋板52上；縱向液壓缸18從上向下安裝在上蓋板52上;移液器液壓缸24安裝在移液器移動(dòng)載體20上；中液壓缸45從左向右安裝在載片夾安放板46的橫梁下面靠近左側(cè)的部位;所述載片夾53安裝在載片夾安放板46的橫梁上筒形載體29的左側(cè)；20張載片夾53大小一致，與載片夾安放板46的預(yù)留安裝部位吻合，所有載片夾53以同方向呈線狀整齊橫向并列排列；所述各個(gè)液壓缸均安裝獨(dú)立的位移傳感器。
[0027]所述載片夾53，由無色透明塑料制成，上片54為篩狀，下片55僅在邊緣有一個(gè)出液孔56，該出液孔與上片54與下片55之間的縫隙相通，上片54與下片55之間承載組織切片57。
[0028]所述圖像采集裝置，包括下液壓缸43、框架下部下導(dǎo)軌33、框架下部上導(dǎo)軌34、數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)移動(dòng)載體36和數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)39。所述框架下部下導(dǎo)軌33、框架下部上導(dǎo)軌34以從左向右的方向安裝在下蓋板上31，所述數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)移動(dòng)載體36安裝在框架下部下導(dǎo)軌33、框架下部上導(dǎo)軌34上，所述數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)39安裝在數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)移動(dòng)載體36上，下液壓缸43安裝在數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)移動(dòng)載體36的左側(cè)。所述數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)39采用的顯微鏡為倒置顯微鏡，可提供白色、紅色、綠色和藍(lán)色四種光源。
[0029]所述主控制器獲取各液壓缸的位移傳感器數(shù)據(jù)并對(duì)各個(gè)液壓缸進(jìn)行精確控制，將數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)39獲取的數(shù)據(jù)傳輸至PC機(jī)處理;所述主控制器獲取溫度傳感器數(shù)據(jù)并通過調(diào)節(jié)加熱裝置32實(shí)現(xiàn)對(duì)樣本周圍溫度的控制。所述加熱裝置32安裝在下蓋板31上，溫度傳感器安裝在框架內(nèi)，使框架內(nèi)的溫度控制在37°C ;所述一種免疫染色機(jī)的工作環(huán)境溫度為室溫。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種免疫染色機(jī)，其特征在于:主要由框架及支撐裝置、免疫染色裝置、圖像采集裝置、加熱裝置和主控制器幾個(gè)部分組成； 所述框架及支撐裝置，由四根大框架安裝螺栓和相應(yīng)的大框架安裝螺母將上蓋板、下蓋板、左蓋板、右蓋板、前蓋板、后蓋板和載片夾安放板安裝在一起，形成以載片夾安放板分隔為上下兩部分的長(zhǎng)方體盒狀結(jié)構(gòu)； 所述免疫染色裝置，包括微量移液器、移液器移動(dòng)載架、上液壓缸、縱向液壓缸、移液器液壓缸、中液壓缸、下液壓缸、吸液管載片、載片夾和真空栗、框架上部上導(dǎo)軌和框架上部下導(dǎo)軌及筒形載體，筒形載體安裝在載片夾安放板橫梁上面靠右側(cè)的部位，所述移液器移動(dòng)載架安裝在框架上部上導(dǎo)軌和框架上部下導(dǎo)軌上，所述上液壓缸從左向右安裝在上蓋板上，縱向液壓缸從上向下安裝在上蓋板上，移液器液壓缸安裝在移動(dòng)載體上，中液壓缸從左向右安裝在載片夾安放板的橫梁下面靠近左側(cè)的部位，所述載片夾安裝在載片夾安放板上筒形載體的左側(cè)，所有載片夾以同方向呈線狀整齊橫向并列排列，所述各個(gè)液壓缸均安裝獨(dú)立的位移傳感器； 所述圖像采集裝置，包括下液壓缸、框架下部下導(dǎo)軌、框架下部上導(dǎo)軌、數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)移動(dòng)載體和數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)，所述框架下部下導(dǎo)軌、框架下部上導(dǎo)軌以從左向右的方向安裝在下蓋板上，所述數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)移動(dòng)載體安裝在框架下部下導(dǎo)軌和框架下部上導(dǎo)軌上，所述數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)安裝在數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)移動(dòng)載體上，所述下液壓缸安裝在數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)移動(dòng)載體的左側(cè)； 所述主控制器獲取各液壓缸的位移傳感器數(shù)據(jù)并精確調(diào)控各液壓缸，獲取數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)采集的數(shù)據(jù)并傳輸至PC機(jī)，獲取溫度傳感器數(shù)據(jù)并對(duì)加熱裝置進(jìn)行調(diào)控。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種免疫染色機(jī)，其特征在于:所述載片夾由無色透明塑料制成，上片為篩狀，下片的邊緣有至少一個(gè)出液孔，該出液孔與上片與下片之間的縫隙相通。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種免疫染色機(jī)，其特征在于:所述數(shù)字病理切片掃描系統(tǒng)所采用的顯微鏡為倒置顯微鏡，可提供至少白色、紅色、綠色和藍(lán)色四種光源。
【文檔編號(hào)】G01N1/31GK205483748SQ201620126863
【公開日】2016年8月17日
【申請(qǐng)日】2016年2月18日
【發(fā)明人】曾斌, 其他發(fā)明人請(qǐng)求不公開姓名
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