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技術(shù)編號(hào)：264681

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專(zhuān)利摘要本發(fā)明提出了一種蘇云金芽孢桿菌幾丁質(zhì)酶Chi9602的突變酶制備及其應(yīng)用，步驟為對(duì)幾丁質(zhì)酶Chi9602基因進(jìn)行同源建模和分子對(duì)接，選取突變位點(diǎn)；采用重疊延伸PCR進(jìn)行定點(diǎn)突變，獲得突變酶基因chiw50a；突變酶基因回收后，經(jīng)Bgl II和Pst I雙酶切，連接到表達(dá)載體pTrcHis B上，構(gòu)建質(zhì)粒pMB581；將質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌宿主細(xì)胞中，經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)、親和層析純化制備突變酶ChiW50A。該突變酶較原始酶的酶比活提高了62.3％達(dá)到了83.46U/mg，最適pH為7.0，且在pH 9.0仍然...
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