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一種改進的莖環(huán)引物qRT-PCR檢測miRNA的方法技術資料下載

技術編號:470504

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專利摘要本發(fā)明涉及,包括(1)miRNA檢測引物的設計莖環(huán)引物包括兩部分,通用的莖環(huán)序列和與靶標miRNA3’端互補配對的特異引物序列,其中與靶標miRNA互補配對的堿基數(shù)為11bp;qPCR的下游引物針對通用的莖環(huán)序列,上游引物針對靶標miRNA的5’端;在所述上游引物的5’末端增加GC尾巴,以使上下游引物的退火溫度相近;(2)將靶標miRNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA;(3)定量PCR擴增并采用SYBR?Green?qPCR檢測法進行檢測。本發(fā)明的方法特異性好、靈敏性高,且只需合成一種下游引物,采用SYBR?Green?...
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