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技術(shù)編號(hào)：472983

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專利摘要本發(fā)明涉及脊髓性肌萎縮癥SMN基因的敲除方法及細(xì)胞模型。該模型通過如下步驟構(gòu)建（1）構(gòu)建和設(shè)計(jì)敲除SMN基因的鋅指核酶質(zhì)粒;(2)將構(gòu)建好的SMN基因ZFN敲除質(zhì)粒用脂質(zhì)體方法轉(zhuǎn)染進(jìn)哺乳動(dòng)物細(xì)胞；（3）利用ZFN特異敲除位點(diǎn)的基因組PCR產(chǎn)物和DNA序列測(cè)定以檢測(cè)ZFN基因敲除的有效性；（4）針對(duì)ZFN基因敲除有效的細(xì)胞，進(jìn)行單克隆分離并逐一鑒定細(xì)胞敲除類型；（5）對(duì)基因敲除細(xì)胞株進(jìn)行mRNA水平鑒定；（6）對(duì)基因敲除細(xì)胞株進(jìn)行蛋白表達(dá)水平鑒定。本發(fā)明的脊髓性肌萎縮癥病理細(xì)胞模型可用于研究SMA致病機(jī)理，也...
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