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技術(shù)編號(hào)：477524

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專(zhuān)利摘要本發(fā)明涉及。以黃瓜(Cucumis?sativum)無(wú)菌子葉分離的葉綠體為材料，建立了在適宜體積和葉綠體濃度與表達(dá)載體比例下的黃瓜離體葉綠體電轉(zhuǎn)化體系。轉(zhuǎn)化后葉綠體經(jīng)短時(shí)孵育、離心、DNase?I消化后進(jìn)行裂解，以提取的轉(zhuǎn)化葉綠體DNA和RNA為模板進(jìn)行PCR和RT-PCT鑒定，結(jié)果證明，葉綠體表達(dá)載體不僅能高效轉(zhuǎn)入離體葉綠體中，而且在轉(zhuǎn)錄水平能檢測(cè)到外源基因的表達(dá)。本發(fā)明克服了高等植物細(xì)胞內(nèi)葉綠體轉(zhuǎn)化周期長(zhǎng)、技術(shù)難和成本高等難題，為高等植物葉綠體轉(zhuǎn)化載體構(gòu)建和關(guān)鍵元件的功能鑒定以及葉綠體基因表達(dá)調(diào)控和細(xì)胞...
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