1.一種烏龍頭快速繁殖方法,包括外植體誘導(dǎo)出愈傷、愈傷組織誘導(dǎo)分化成胚狀體、胚狀體誘導(dǎo)分化為健壯小苗、小苗誘導(dǎo)生根,其特征在于,是以烏龍頭的嫩莖與幼葉為外植體,具體步驟為:
(1)外植體誘導(dǎo)出愈傷:將表面消毒的烏龍頭嫩莖與幼葉接種至外植體脫分化培養(yǎng)基上,培養(yǎng)條件25℃,光照2000Lx,12小時(shí)/天,愈傷誘導(dǎo)率為100%;所述脫分化的培養(yǎng)基為MS+2,4-D 1.5 mg/L+瓊脂7 g/L+蔗糖30 g/L;pH5.8;
(2)愈傷組織誘導(dǎo)分化成胚狀體:將步驟(1)獲得的愈傷組織轉(zhuǎn)至誘導(dǎo)愈傷組織分化為胚狀體培養(yǎng)基上,培養(yǎng)條件25℃,光照2000Lx,12小時(shí)/天,繼代三次,每次45天,第三次胚狀體增殖系數(shù)11.337;所述誘導(dǎo)愈傷組織分化為胚狀體培養(yǎng)基為MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.4 mg/L+瓊脂7 g/L+蔗糖30 g/L+活性炭2 g/L;pH5.8;
(3)胚狀體誘導(dǎo)分化為幼苗:將步驟(2)獲得的胚狀體轉(zhuǎn)至胚狀體分化成苗培養(yǎng)基上,培養(yǎng)條件25℃,光照2000Lx,12小時(shí)/天,培養(yǎng)60天,苗分化倍數(shù)3.889;所述胚狀體分化成苗培養(yǎng)基為MS+ZT 1 mg/L+NAA 0.05 mg/L+瓊脂7 g/L+蔗糖30g/L+活性炭2 g/L;pH5.8;
(4)誘導(dǎo)生根壯苗:將步驟(3)獲得的小苗轉(zhuǎn)至生根壯苗培養(yǎng)基上,培養(yǎng)條件25℃,光照2000Lx,12小時(shí)/天,培養(yǎng)45天,生根率98.6%,平均根長11.5cm,平均主根數(shù)3.2條;所述生根壯苗培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 0.1 mg/L+瓊脂7 g/L+蔗糖30 g/L+活性炭2 g/L;pH5.8。