1.一種月季快速繁殖方法,其特征在于:包括外植體的制備、外植體的消毒、誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)和移栽步驟。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種月季快速繁殖方法,其特征在于:該方法包括如下步驟:
(1)外植體的制備
春季4-5月或秋季10-11月取材,選取當(dāng)年生無病蟲害的健康枝條,且選擇枝條中上段飽滿而未萌發(fā)側(cè)芽,去葉去刺剪成帶單腋芽的莖段;
(2)外植體的消毒
將經(jīng)過步驟(1)處理的外植體先用洗衣粉水刷洗枝條表面,再用流水沖洗1h,在無菌環(huán)境下,先用75%酒精消毒30s,分兩次進行,每次處理后用無菌水沖洗3-5次,再用5%次氯酸鈉消毒15-18分鐘,分兩次進行,每次處理后用無菌水沖洗4-5次,消毒后置于已滅菌濾紙上晾干等待接種。
(3)誘導(dǎo)培養(yǎng)
在無菌條件下,將消毒好的外植體切去上下表面與消毒劑接觸的部分,切成2-3cm帶一個腋芽的莖段置于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中,于23℃/白天,21℃/黑夜,12h/白天,12h/黑夜,濕度50%,光照強度3000-4000Lux條件下培養(yǎng);誘導(dǎo)培養(yǎng)基包括MS+30g/L蔗糖+7-7.5g/L瓊脂+0.5mg/L6-芐氨基嘌呤+0.0075-0.01mg/L萘乙酸,pH5.8±0.1;
(4)增殖培養(yǎng)
待經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)的不定芽長至4-5cm且葉片完全展開時,進行增殖培養(yǎng);在無菌條件下,將誘導(dǎo)的不定芽完整的切割并去除原莖段,接種于增殖培養(yǎng)基上,于23℃/白天,21℃/黑夜,12h/白天,12h/黑夜,濕度50%,光照強度3000-4000Lux條件下培養(yǎng),平均每3-4周繼代一次,繼代三次,增殖培養(yǎng)基包括MS+30g/L蔗糖+7-7.5g/瓊脂+0.5-1.5mg/L 6-芐氨基嘌呤+0.01-0.1mg/L萘乙酸,pH5.8±0.1;
(5)生根培養(yǎng)
在無菌條件下,將經(jīng)過增殖培養(yǎng)的月季組培苗切成單株接種到生根培養(yǎng)基上,于23℃/白天,21℃/黑夜,12h/白天,12h/黑夜,濕度50%,光照強度3000-4000Lux條件下培養(yǎng);生根培養(yǎng)基包括MS+20-30g/L蔗糖+7-7.5g/L瓊脂+0.1-0.3mg/L萘乙酸,pH5.8±0.1;
(6)移栽
待月季組培苗長出白根4-5cm后,先將生根苗移至室溫條件下進行煉苗5d以上,將月季組培苗移出,移栽的基質(zhì)為蛭石、草炭、園土中的一種或兩種組合。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種月季快速繁殖方法,其特征在于:所述增殖培養(yǎng)中,第一次的增殖培養(yǎng)基為MS+30g/L蔗糖+7g/瓊脂+1mg/L 6-芐氨基嘌呤+0.02mg/L萘乙酸,pH5.8;第二次的增殖培養(yǎng)基為MS+30g/L蔗糖+7g/瓊脂+1.5mg/L6-芐氨基嘌呤+0.05mg/L萘乙酸,pH5.8;第三次的增殖培養(yǎng)基為MS+30g/L蔗糖+7g/瓊脂+1.5mg/L 6-芐氨基嘌呤+0.08mg/L萘乙酸,pH5.8。