1.胚胎玻璃化解凍皿,包括相互配套的皿底和皿蓋(3),其特征在于:還包括胚胎轉(zhuǎn)移器(4)及由彈性材料制成的胚胎限定環(huán)(5);所述皿底由等高的皿底Ⅰ(1)和皿底Ⅱ(2)組合形成;
所述皿底Ⅰ(1)內(nèi)設(shè)置有中空的解凍腔(11);所述解凍腔(11)頂部開口,在解凍腔(11)的頂部開口處設(shè)置有胚胎限定環(huán)固定圈(12);在胚胎限定環(huán)固定圈(12)內(nèi)設(shè)置有胚胎限定環(huán)(5);所述皿底Ⅱ(2)內(nèi)設(shè)置有至少兩個空腔;
所述胚胎轉(zhuǎn)移器(4)包括胚胎轉(zhuǎn)移器柄(41)、胚胎轉(zhuǎn)移器桿(42)和胚胎網(wǎng)兜(43);所述胚胎轉(zhuǎn)移器桿(42)為L形,胚胎轉(zhuǎn)移器桿(42)一端與胚胎網(wǎng)兜(43)連接、另一端與胚胎轉(zhuǎn)移器柄(41)連接;
在皿底和皿蓋(3)之間設(shè)置胚胎轉(zhuǎn)移器通道(6),所述胚胎轉(zhuǎn)移器桿(42)穿越胚胎轉(zhuǎn)移器通道(6),胚胎轉(zhuǎn)移器柄(41)位于皿底和皿蓋(3)組合成的容器之外,胚胎轉(zhuǎn)移器桿(42)位于皿底和皿蓋(3)組合成的容器之內(nèi)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的胚胎玻璃化解凍皿,其特征在于:
所述皿底Ⅰ(1)的側(cè)壁上設(shè)置有連通皿底Ⅰ(1)頂部開口端并與解凍腔(11)的位置相對應(yīng)的皿底Ⅰ通道(13);在皿蓋(3)的側(cè)壁上沿著皿蓋(3)底部開口向上挖設(shè)皿蓋通道Ⅰ(34),皿蓋通道Ⅰ(34)與皿底Ⅰ通道(13)相對應(yīng);皿底和皿蓋(3)裝配后,皿蓋通道Ⅰ(34)的橫向頂部位于皿底Ⅰ(11)的頂部上方且兩者間形成間隙Ⅰ;
在皿底Ⅱ(2)的側(cè)壁上沿著皿底Ⅱ(2)頂部開口端向下挖設(shè)凹槽,所述凹槽的位置與皿底Ⅱ(2)內(nèi)的空腔相對應(yīng);
皿蓋(3)的側(cè)壁上設(shè)置與所述凹槽相配合的凸部,凸部置入凹槽內(nèi)后兩者間形成間隙Ⅲ;在皿蓋(3)的側(cè)壁上沿著皿蓋(3)底部開口向上挖設(shè)皿蓋通道Ⅱ,皿蓋通道Ⅱ與皿蓋通道Ⅰ(34)相連通;所述間隙Ⅲ與皿蓋通道Ⅱ相連通;皿底和皿蓋(3)裝配后,皿蓋通道Ⅱ的橫向頂部位于皿底Ⅱ(2)的頂部上方且兩者間形成間隙Ⅱ;
皿底Ⅰ通道(13)、皿蓋通道Ⅰ(34)與皿底Ⅰ(11)的頂部所形成的間隙Ⅰ、凸部與凹槽所形成的間隙Ⅲ、皿蓋通道Ⅱ與皿底Ⅱ(2)的頂部所形成的間隙Ⅱ相連通后形成胚胎轉(zhuǎn)移器通道(6)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的胚胎玻璃化解凍皿,其特征在于:
位于皿底Ⅱ(2)內(nèi)的空腔包括稀釋腔(21)、洗腔A(22)和洗腔B(23),所述解凍腔(11)、稀釋腔(21)、洗腔A(22)和洗腔B(23)依次排列;
位于皿底Ⅱ(2)側(cè)壁上的凹槽包括凹槽A(24)、凹槽B(25)和凹槽C(26),所述凹槽A(24)、凹槽B(25)和凹槽C(26)均分別與皿底Ⅱ(2)的頂部開口端相連通;所述凹槽A(24)、凹槽B(25)和凹槽C(26)分別與稀釋腔(21)、洗腔A(22)和洗腔B(23)的位置相一一對應(yīng);
位于皿蓋(3)側(cè)壁上的凸部包括與凹槽A(24)、凹槽B(25)和凹槽C(26)相一一對應(yīng)的凸起A(31)、凸起B(yǎng)(32)和凸起C(33);凸起A(31)置入凹槽A(24)內(nèi)后兩者間形成間隙A,凸起B(yǎng)(32)置入凹槽B(25)內(nèi)后兩者間形成間隙B,凸起C(33)置入凹槽C(26)內(nèi)后兩者間形成間隙C;所述間隙A和間隙B呈U型,間隙C呈L型;間隙A、間隙B、間隙C組成了間隙Ⅲ;
皿蓋通道Ⅱ包括皿蓋通道A(35)、皿蓋通道B(36)、皿蓋通道C(37);
皿蓋通道A(35)與皿蓋通道Ⅰ(34)相連通,所述皿蓋通道A(35)的橫向頂部位于皿底Ⅱ(2)的頂部上方且兩者間形成間隙a;間隙a分別與間隙A、間隙Ⅰ相連通;
皿蓋通道B(36)位于凸起A(31)與凸起B(yǎng)(32)之間;皿蓋通道B(36)的橫向頂部位于皿底Ⅱ(2)的頂部上方且兩者間形成間隙b;間隙b分別與間隙A、間隙B相連通;
皿蓋通道C(37)位于凸起B(yǎng)(32)和凸起C(33)之間;皿蓋通道C(37)的橫向頂部位于皿底Ⅱ(2)的頂部上方且兩者間形成間隙c;間隙c分別與間隙B、間隙C相連通;
皿底Ⅰ通道(13)、間隙Ⅰ、間隙a、間隙A、間隙b、間隙B、間隙c、間隙C相連通后形成胚胎轉(zhuǎn)移器通道(6);
當(dāng)胚胎轉(zhuǎn)移器桿(42)位于皿底Ⅰ通道(13)底部時,胚胎網(wǎng)兜(43)位于解凍腔(11)的底部;當(dāng)胚胎轉(zhuǎn)移器桿(42)位于皿底Ⅰ通道(13)頂部時,胚胎網(wǎng)兜(43)位于解凍腔(11)的正上方,且不與解凍腔(11)相接觸。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的胚胎玻璃化解凍皿,其特征在于:所述胚胎轉(zhuǎn)移器通道(6)的口徑相等。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的胚胎玻璃化解凍皿,其特征在于:所述解凍腔(11)、稀釋腔(21)、洗腔A(22)和洗腔B(23)的中心連線位于同一直線上;所述稀釋腔(21)、洗腔A(22)和洗腔B(23)的高度相一致,
凹槽A(24)、凹槽B(25)和凹槽C(26)的底部高度相一致,均對應(yīng)的位于稀釋腔(21)、洗腔A(22)和洗腔B(23)的正上方;
間隙Ⅰ、間隙a、間隙b、間隙c的高度一致。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的胚胎玻璃化解凍皿,其特征在于:
所述胚胎限定環(huán)(5)上口的內(nèi)徑小于胚胎網(wǎng)兜(43)的外徑;所述胚胎限定環(huán)(5)下口的內(nèi)徑等于胚胎網(wǎng)兜(43)的外徑;
胚胎限定環(huán)(5)下口的外徑等于胚胎限定環(huán)固定圈(12)的內(nèi)徑。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的胚胎玻璃化解凍皿,其特征在于:所述胚胎網(wǎng)兜(43)呈空心的下半球狀,在胚胎網(wǎng)兜(43)的上半部設(shè)置孔洞,孔洞的直徑小于胚胎的直徑。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的胚胎玻璃化解凍皿,其特征在于:
所述皿底Ⅱ(2)的橫截面大于皿底Ⅰ(1)的橫截面,胚胎轉(zhuǎn)移器通道(6)的口徑大于胚胎轉(zhuǎn)移器桿(42)的直徑。
9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的胚胎玻璃化解凍皿,其特征在于:
所述解凍腔(11)為上小下大的圓臺形,稀釋腔(21)、洗腔A(22)和洗腔B(23)均為圓柱形;
所述胚胎限定環(huán)(5)為彈性塑料限定環(huán)。
10.利用如權(quán)利要求1~9任一所述的胚胎玻璃化解凍皿進(jìn)行的胚胎玻璃化解凍方法,其特征在于包括以下步驟:
1)、首先打開皿蓋(3),拆分皿底Ⅰ(1)和皿底Ⅱ(2),胚胎轉(zhuǎn)移器(4)的胚胎轉(zhuǎn)移器桿(42)穿越皿底Ⅰ通道(13),胚胎網(wǎng)兜(43)從上至下穿過胚胎限定環(huán)(5)后置入解凍腔(11)底部;在解凍腔(11)和稀釋腔(21)、洗腔A(22)和洗腔B(23)中分別加入裝有解凍液、稀釋液、洗液Ⅰ和洗液Ⅱ,
解凍腔(11)中的解凍液的液面位于胚胎限定環(huán)(5)的上表面和下表面之間;
將裝有胚胎轉(zhuǎn)移器(4)的皿底Ⅰ(1)置于37±1℃預(yù)熱,皿底Ⅱ(2)置于室溫平衡;
2)、當(dāng)需要解凍胚胎時,把皿底Ⅰ(1)從預(yù)熱裝置中取出,將皿底Ⅰ(1)和皿底Ⅱ(2)連接組成皿底,將胚胎從液氮中取出,置于解凍腔(11)內(nèi),胚胎浮在位于胚胎限定環(huán)(5)的上表面和下表面之間的解凍液的液面上,再將皿蓋(3)蓋在皿底上,從而使皿蓋通道Ⅰ(35)與皿底Ⅰ通道(13)相對應(yīng),且使得凸起A(31)置入凹槽A(24)內(nèi),凸起B(yǎng)(32)置入凹槽B(25)內(nèi),凸起C(33)置入凹槽C(26)內(nèi);
當(dāng)設(shè)定的解凍時間到后,通過胚胎轉(zhuǎn)移器柄(41)間接帶動胚胎網(wǎng)兜(43)向上移動,當(dāng)胚胎網(wǎng)兜(43)通過胚胎限定環(huán)(5)時,胚胎進(jìn)入胚胎網(wǎng)兜(43)內(nèi);
3)、手握胚胎轉(zhuǎn)移器柄(41)順著皿底Ⅰ通道(13)往上提,帶動胚胎網(wǎng)兜(43)從解凍腔(11)的解凍液中移出,胚胎網(wǎng)兜(43)中的部分解凍液從胚胎網(wǎng)兜(43)的孔洞中流出;
4)、手握胚胎轉(zhuǎn)移器柄(41),使胚胎轉(zhuǎn)移器桿(42)沿著胚胎轉(zhuǎn)移器通道(6)從左至右進(jìn)行如下移動:
使胚胎轉(zhuǎn)移器桿(42)在皿底Ⅰ通道(13)中上移至頂部后,然后轉(zhuǎn)入間隙Ⅰ內(nèi)進(jìn)行平移,再轉(zhuǎn)入間隙a內(nèi)繼續(xù)平移;接著沿著U型的間隙A下滑,此時,胚胎網(wǎng)兜(43)落入稀釋腔(21)內(nèi),當(dāng)下滑至間隙A的最底端時,胚胎網(wǎng)兜(43)位于稀釋腔(21)的底部,當(dāng)設(shè)定的稀釋時間到后;使胚胎轉(zhuǎn)移器桿(42)沿著U型的間隙A上移,從而使胚胎網(wǎng)兜(43)脫離稀釋腔(21);
然后轉(zhuǎn)入間隙b內(nèi)進(jìn)行平移,接著沿著U型的間隙B下滑,此時,胚胎網(wǎng)兜(43)落入洗腔A(22)內(nèi),當(dāng)下滑至間隙B的最底端時,胚胎網(wǎng)兜(43)位于洗腔A(22)的底部,當(dāng)設(shè)定的首次洗滌時間到后;使胚胎轉(zhuǎn)移器桿(42)沿著U型的間隙B上移,從而使胚胎網(wǎng)兜(43)脫離洗腔A(22);
然后轉(zhuǎn)入間隙c內(nèi)進(jìn)行平移,接著沿著L型的間隙C下滑,此時,胚胎網(wǎng)兜(43)落入洗腔B(23)內(nèi),當(dāng)下滑至間隙C的最底端時,胚胎網(wǎng)兜(43)位于洗腔B(23)的底部,當(dāng)設(shè)定的二次洗滌時間到后;打開皿蓋(3),使胚胎轉(zhuǎn)移器桿(42)沿著L型的間隙C上移,從而使胚胎網(wǎng)兜(43)脫離洗腔B(23);胚胎解凍完成;
再把解凍后的胚胎轉(zhuǎn)移至移植盤。