蟲食物飼喂幼蟲，每天飼喂2次，每次100 μ I蜜蜂幼蟲食物；當(dāng)培養(yǎng)板中出現(xiàn)尿酸結(jié)晶時(shí)，將幼蟲轉(zhuǎn)移至新培養(yǎng)板，此后幼蟲不再進(jìn)行飼喂，直至羽化，得到羽化的蜜蜂個(gè)體，即為蜂王。
[0035]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，其有益效果為:
[0036]目前，在實(shí)驗(yàn)室用培養(yǎng)箱培育的蜜蜂個(gè)體發(fā)育命運(yùn)(蜜蜂級(jí)型)不能確定，且所得蜂王的比例極低。采用本發(fā)明的方法，羽化后的蜜蜂全部發(fā)育為蜂王，且羽化率高達(dá)75%以上。因此，本發(fā)明可以克服現(xiàn)有蜜蜂幼蟲人工飼養(yǎng)方法的不足，可高效培育西方蜜蜂蜂王，可控性極強(qiáng)，對(duì)研宄雌性蜜蜂級(jí)型分化分子機(jī)理和蜜蜂遺傳育種工作具有重要意義。
【附圖說明】
[0037]圖1為實(shí)施例4蜜蜂后足解剖鏡下觀察結(jié)果圖；
[0038]圖2為對(duì)比例I絕大部分個(gè)體蜜蜂后足解剖鏡下觀察結(jié)果圖；
[0039]圖3為對(duì)比例I少數(shù)個(gè)體(中間類型)蜜蜂后足解剖鏡下觀察結(jié)果圖；
[0040]圖4為實(shí)施例4蜜蜂卵巢發(fā)育解剖鏡下觀察結(jié)果圖；
[0041]圖5為對(duì)比例I絕大部分個(gè)體卵巢發(fā)育解剖鏡下觀察結(jié)果圖；
[0042]圖6為對(duì)比例I少數(shù)個(gè)體卵巢發(fā)育解剖鏡下觀察結(jié)果圖。
【具體實(shí)施方式】
[0043]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。
[0044]本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)理解，下列實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中未注明具體技術(shù)或條件者，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻(xiàn)所描述的技術(shù)或條件或者按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
[0045]實(shí)施例1
[0046]一種用培養(yǎng)箱高效培育西方蜜蜂蜂王的方法，包括如下步驟:
[0047]步驟(I)，蜜蜂幼蟲食物的制備:
[0048]用Mill1-Q超純水配制含葡萄糖、果糖和酵母提取物的混合溶液，混合溶液中葡萄糖的質(zhì)量濃度為10%，果糖的質(zhì)量濃度為10%，酵母提取物的質(zhì)量濃度為1%，然后將混合溶液與蜂王漿以1:1的質(zhì)量比混合均勻后，加入80mg/L JH I，混勻，制得蜜蜂幼蟲食物；
[0049]步驟⑵，蜜蜂幼蟲的飼養(yǎng):
[0050]通過隔王處理得到日齡一致的西方蜜蜂幼蟲，提出巢脾，用移蟲針將I?2日齡蜜蜂幼蟲轉(zhuǎn)移到細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)，每孔一只，將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)箱中溫度34 °C，相對(duì)濕度70%;采用步驟(I)制得的蜜蜂幼蟲食物飼喂幼蟲，每天飼喂I次，每次250 μ I蜜蜂幼蟲食物，并觀察、記錄幼蟲生長(zhǎng)情況；當(dāng)培養(yǎng)板中出現(xiàn)尿酸結(jié)晶時(shí)，將幼蟲(預(yù)蛹的健康蟲體)轉(zhuǎn)移至新培養(yǎng)板，此后幼蟲不再進(jìn)行飼喂，注意觀測(cè)并記錄蟲體變化，直至羽化，得到羽化的蜜蜂個(gè)體，即為蜂王。
[0051]實(shí)施例2
[0052]一種用培養(yǎng)箱高效培育西方蜜蜂蜂王的方法，包括如下步驟:
[0053]步驟(I)，蜜蜂幼蟲食物的制備:
[0054]用Mill1-Q超純水配制含葡萄糖、果糖和酵母提取物的混合溶液，混合溶液中葡萄糖的質(zhì)量濃度為24%，果糖的質(zhì)量濃度為24%，酵母提取物的質(zhì)量濃度為5%，然后將混合溶液與蜂王漿以1:1的質(zhì)量比混合均勻后，加入65mg/L JH I，混勻，制得蜜蜂幼蟲食物；
[0055]步驟⑵，蜜蜂幼蟲的飼養(yǎng):
[0056]通過隔王處理得到日齡一致的西方蜜蜂幼蟲，提出巢脾，用移蟲針將I?2日齡蜜蜂幼蟲轉(zhuǎn)移到細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)，每孔一只，將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)箱中溫度36 °C，相對(duì)濕度90%;采用步驟(I)制得的蜜蜂幼蟲食物飼喂幼蟲，每天飼喂2次，每次100μ I蜜蜂幼蟲食物，并觀察、記錄幼蟲生長(zhǎng)情況；當(dāng)培養(yǎng)板中出現(xiàn)尿酸結(jié)晶時(shí)，將幼蟲(預(yù)蛹的健康蟲體)轉(zhuǎn)移至新培養(yǎng)板，此后幼蟲不再進(jìn)行飼喂，注意觀測(cè)并記錄蟲體變化，直至羽化，得到羽化的蜜蜂個(gè)體，即為蜂王。
[0057]實(shí)施例3
[0058]一種用培養(yǎng)箱高效培育西方蜜蜂蜂王的方法，包括如下步驟:
[0059]步驟(I)，蜜蜂幼蟲食物的制備:
[0060]用Mill1-Q超純水配制含葡萄糖、果糖和酵母提取物的混合溶液，混合溶液中葡萄糖的質(zhì)量濃度為15%，果糖的質(zhì)量濃度為18%，酵母提取物的質(zhì)量濃度為2.5%，然后將混合溶液與蜂王漿以1:1的質(zhì)量比混合均勻后，加入100mg/L JH III，混勻，制得蜜蜂幼蟲食物；
[0061]步驟⑵，蜜蜂幼蟲的飼養(yǎng):
[0062]通過隔王處理得到日齡一致的西方蜜蜂幼蟲，提出巢脾，用移蟲針將1.5?2日齡蜜蜂幼蟲轉(zhuǎn)移到細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)，每孔一只，將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)箱中溫度35°C，相對(duì)濕度80% ;采用步驟(I)制得的蜜蜂幼蟲食物飼喂幼蟲，每天飼喂I次，每次200 μ I蜜蜂幼蟲食物，并觀察、記錄幼蟲生長(zhǎng)情況；當(dāng)培養(yǎng)板中出現(xiàn)尿酸結(jié)晶時(shí)，將幼蟲(預(yù)蛹的健康蟲體)轉(zhuǎn)移至新培養(yǎng)板，此后幼蟲不再進(jìn)行飼喂，注意觀測(cè)并記錄蟲體變化，直至羽化，得到羽化的蜜蜂個(gè)體，即為蜂王。
[0063]實(shí)施例4
[0064]一種用培養(yǎng)箱高效培育西方蜜蜂蜂王的方法，包括如下步驟:
[0065]步驟(I)，蜜蜂幼蟲食物的制備:
[0066]用超純水配制含葡萄糖、果糖和酵母提取物的混合溶液，混合溶液中葡萄糖的質(zhì)量濃度為24%，果糖的質(zhì)量濃度為24%，酵母提取物的質(zhì)量濃度為3%，然后將混合溶液與蜂王漿以1:1的質(zhì)量比混合均勻后，加入50mg/L JH III，混勻，制得蜜蜂幼蟲食物；
[0067]步驟⑵，蜜蜂幼蟲的飼養(yǎng):
[0068]通過隔王處理得到日齡一致的西方蜜蜂幼蟲，提出巢脾，用移蟲針將I?1.5日齡蜜蜂幼蟲轉(zhuǎn)移到細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)，每孔一只，將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)箱中溫度35°C，相對(duì)濕度90% ;采用步驟(I)制得的蜜蜂幼蟲食物飼喂幼蟲，每天飼喂2次，每次100 μ I蜜蜂幼蟲食物；當(dāng)培養(yǎng)板中出現(xiàn)尿酸結(jié)晶時(shí)，將幼蟲轉(zhuǎn)移至新培養(yǎng)板，此后幼蟲不再進(jìn)行飼喂，直至羽化，得到羽化的蜜蜂個(gè)體，即為蜂王。
[0069]對(duì)比例I
[0070]對(duì)比例I與實(shí)施例4的區(qū)別在于不加入保幼激素。
[0071]具體如下:
[0072]一種用培養(yǎng)箱高效培育西方蜜蜂蜂王的方法，包括如下步驟:
[0073]步驟(I)，蜜蜂幼蟲食物的制備:
[0074]用超純水配制含葡萄糖、果糖和酵母提取物的混合溶液，混合溶液中葡萄糖的質(zhì)量濃度為24%，果糖的質(zhì)量濃度為24%，酵母提取物的質(zhì)量濃度為3%，然后將混合溶液與蜂王漿以1:1的質(zhì)量比混合均勻，制得蜜蜂幼蟲食物；
[0075]步驟⑵，蜜蜂幼蟲的飼養(yǎng):
[0076]通過隔王處理得到日齡一致的西方蜜蜂幼蟲，提出巢脾，用移蟲針將I?1.5日齡蜜蜂幼蟲轉(zhuǎn)移到細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)，每孔一只，將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)箱中溫度35°C，相對(duì)濕度90% ;采用步驟(I)制得的蜜蜂幼蟲食物飼喂幼蟲，每天飼喂2次，每次100 μ I蜜蜂幼蟲食物；當(dāng)培養(yǎng)板中出現(xiàn)尿酸結(jié)晶時(shí)，將幼蟲轉(zhuǎn)移至新培養(yǎng)板，此后幼蟲不再進(jìn)行飼喂，直至羽化，得到羽化的蜜蜂個(gè)體，即為工蜂或中間類型蜜蜂。
[0077]對(duì)比檢測(cè)及結(jié)果
[0078]—、檢測(cè)方法:
[0079]羽化的蜜蜂的形態(tài)測(cè)定與解剖:
[0080]取出步驟(2)得到的羽化的蜜蜂，將其處死進(jìn)行形態(tài)測(cè)定與解剖；
[0081]所述的形態(tài)測(cè)定為:用鑷子取下蜜蜂后足，置于解剖鏡下觀測(cè)花粉筐的有無以及基跗節(jié)絨毛著生排列情況；
[0082]所述的解