滅草煙的組合的形式使用， 比例分別為26. 25和8. 75g每公頃或42和14g每公頃。
[0051] 本發(fā)明還涉及一種種植大麥作物的方法，包括播種本發(fā)明的種子，并在合適的條 件下培育所述種子和得到的植物來生產(chǎn)作物。
[0052] 優(yōu)選用作所述作物的抗除草劑大麥通過誘變產(chǎn)生，更優(yōu)選通過化學(xué)誘變產(chǎn)生。
[0053] 所述抗除草劑作物還更優(yōu)選為 NCHMB 41547、NCHMB 41548、NCHMB 41549、NCHMB 41550、ΜΠΜΒ 41551或其具有抗除草劑特征的植物，或從上述株系衍生而來的植物。
[0054] 下面的非限制性實施例說明本發(fā)明。
[0055] 實施例1 :突變體的產(chǎn)生
[0056] 將33. 3kg大麥變種Buloke (大約812195粒種子）浸泡在0· 25%甲基磺酸乙酯 (EMS)中并用鼓風(fēng)機干燥。親代Buloke是高產(chǎn)變種，能生產(chǎn)麥芽制造品質(zhì)的谷物。意外的 是，Buloke適于種植于雀麥草為患的區(qū)域。選擇此品系，本發(fā)明人希望開發(fā)可種植于雀麥 草和其他雜草可被咪唑啉酮除草劑防治的條件下可生長的抗咪唑啉酮大麥變種。
[0057] 實施例2 :M1代
[0058] 2006年在澳大利亞維多利亞霍舍姆（Horsham，Victoria，Australia)將來自實施 例1中的誘變大麥種子播種于0. 5公頃的樣地中。管理與推薦的用于本地區(qū)大麥管理方式 一致。大麥成熟時用試驗田收割機收割所述樣地。從每個裝滿種子的容器中拿出300g樣 本，并堆積在一起形成代表性的較小混合群（150kg)而剩余的種子堆在一起作為混合樣品 (600kg) 〇
[0059] 實施例3 :M2代
[0060] 2007年在澳大利亞維多利亞霍舍姆將來自實施例2的200kg突變大麥種子（大約 488萬粒種子）播種于2公頃土地中。用ON DUTY ?以8〇g/ha(活性成分，甲咪唑煙酸 42g+滅草煙14g)的比例噴灑出苗的植株，手工分別收獲20株存活植株并保存。
[0061] 實施例4 :初步評估M2選擇植株對咪唑啉酮除草劑的抗性
[0062] 鑒定出實施例3中具有最大干物質(zhì)和種子產(chǎn)量的十株植株并命名 為 BUL0KE-EMS05*06HI001、 BUL0KE-EMS05*06HI002、 BUL0KE-EMS05*06HI003、 BUL0KE-EMS05*06HI004、 BUL0KE-EMS05*06HI005、 BUL0KE-EMS05*06H1006、 BUL0KBE-EMS05*06HI007、 BUL0KE-EMS05*06HI008、 BUL0KE-EMS05*06HI009 和 BUL0KE-EMS05*06HI010〇
[0063] 將每種選擇植株的30粒種子播種于溫室中的10個盆中（每盆3粒種子）。用 ON DUTY?以5〇g/ha (活性成分，甲咪唑煙酸26. 25g+滅草煙8. 75g)的比例噴灑每種選 擇的半數(shù)盆，并根據(jù)后代的反應(yīng)以對ON DUTY?的抗性對每種選擇植株分類。若植株表 現(xiàn)出未受ON DUTY ?的影響（沒有可見癥狀）則認(rèn)定其有抗性，若被ON DUTY ?殺死 則認(rèn)定其易感。
[0064] ?鑒定出以下純合易感選擇植株（在大田篩選中未選出）并停止對其進(jìn)一步的評 估出1]1!)1^4]^05*06!11001、81]11)1^4]^05*06!11004 和81]11)1^4]^05*06!11008。
[0065] ?鑒定出以下純合抗性選擇植株并將抗性植株聚積在一起進(jìn)行評 估：BUL0KE-EMS05*06HI002、BUL0KE-EMS05*06HI005、BUL0KE-EMS05*06HI006、 BUL0KE-EMS05*06HI009 和 BUL0KE-EMS05*06HI010。
[0066] ?盡管是對ON DUTY有抗性的純合植株，但還是就影響植株類型的基因?qū)?BUL0KE-EMS05*06HI009分離，并收獲單植株，分別用于進(jìn)一步評估。
[0067] ?鑒定出雜合易感/抗性選擇植株，并收獲各個抗性植株，用于進(jìn)一步評估： BUL0KE-EMS05*06HI003 和 BUL0KE-EMS05*06HI007。
[0068] 選擇代表每個原始M2抗性選擇植株的純合抗除草劑株系用于提交至NCHMB和進(jìn) 一步評估。給這些株系新的較短的名稱一一表2所示一一以利于交流：
[0069] 表2 :純合抗除草劑株系的初始的和新的名稱
[0071 ] 實施例5:田間評估對interrtx ?啲耐受性
[0072] a)篩詵對咪曄啉酮除草劑有抗件的純合株系
[0073] 2007年在澳大利亞維多利亞霍舍姆將在溫室（實施例4)中選擇的單植株的種子 以5m雙行播種并在出苗后以0. 75L/ha噴灑丨ntervix ? (活性成分，咪草啶酸33g/kg+滅 草煙15g/kg)，將可見的未受除草劑影響的行收獲并且進(jìn)一步評估（未出示數(shù)據(jù)）。鑒定得 到純合抗咪唑啉酮株系VBHT0803和VBHT0806并提交至NCHMB。
[0074] b)評估對咪曄啉酮除草劑的抗件
[0075] 在2007年和2008年在澳大利亞維多利亞霍舍姆和2008年在澳大利亞新南威爾 士馬里納（Marinna, NSW, Australia)的實驗中將突變株系 VBHT0805、VBHT0806 和 VBHT0810 與野生型Buloke和Hindmarsh的咪唑啉酮抗性相比較。在霍舍姆，以裂區(qū)設(shè)計（split plot design)在2007年用2個重復(fù)，2008年用3個重復(fù)播種實驗樣品；并在Marinna，以因子設(shè) 計使用3個重復(fù)播種實驗樣品。在霍舍姆，將基因型（選擇植株）分配作為副區(qū)（subplot)， 而除草劑處理分配作為主區(qū)。除草劑處理為：
[0076] ?霍舍姆2007-未施用Intervix?和出苗后以〇· 75L/ha (活性成分，24. 75g咪草 啶酸+11. 25g滅草煙）施用Intervix?
[0077] ?霍舍姆2008 -未施用Intermix?和出苗后以〇· 375L/ha (活性成分，12. 375g 咪草啶酸+5. 625g滅草煙）、0. 75L/ha (活性成分，24. 75g咪草啶酸+11. 25g滅草煙）、1. 5L/ ha (活性成分，49. 5g咪草啶酸+22. 5g滅草煙）施用Intervix?e
[0078] ?馬里納2008年-未施用丨ntervix?和出苗后以〇. 375L/ha(活性成分，12. 375g 咪草啶酸+5. 625g滅草煙）、0. 75L/ha (活性成分，2475g咪草啶酸+11. 25g滅草煙）、1. 25L/ ha (活性成分，41. 25g咪草啶酸+18. 75g滅草煙）施用I ntervix'
[0079] 所有實驗的管理除lntervix#條草劑的施用外都與商業(yè)慣例一致。用小的樣地 收割機收割樣地，對種子稱重，轉(zhuǎn)換為以t/ha為單位的產(chǎn)量并用REML分析。用已有方法對 來自重復(fù)1的未施用丨nter\rix~的500克樣品評估其麥芽制造品質(zhì)（參見實施例10)。
[0080] 與對照處理（未施用Intervix)相比，所有三個實驗（表3、4和5)中以所有比例 施用的Intervix?都顯著地減少了變種Buloke和Hindmarsh的谷物產(chǎn)量。兩種情況下所 有Interval處理的樣地中的植物都變黃，生長停止并死亡。相反，與對照處理（未施用 Intervix)相比，當(dāng)用In奴rvix?以任意比例處理時VBHT0805、VBHT0806或VBHT0810在谷 物產(chǎn)量方面未見明顯不同。此外，用丨處理的VBHT0805、VBHT0806或VBHT0810 的樣地未見可見的傷害癥狀。VBHT0805、VBHT0806或VBHT0810都是衍生于用EMS處理的 Buloke，并且與野生型親代Buloke和栽培種Hindmarsh相比，均對以0. 375L/ha(活性成 分，12. 375g咪草啶酸+5. 625g滅草煙）至1. 5L/ha (活性成分，49. 5g咪草啶酸+22. 5g滅 草煙）的比例施用的Intervix?明顯地表現(xiàn)出增強的抗性。
[0081] 實施例6 :田間評估比較咪唑啉酮抗性突變大麥株系與Buloke的產(chǎn)量。
[0082] 在澳大利亞9個地區(qū)比較了咪唑啉酮抗性突變株系VBHT0805、VBHT0806或 VBHT0810與Buloke的產(chǎn)量（t/ha)。位于南澳大利亞州的帕斯基維爾（Paskeville)和卡 林頓（Callington)，位于新南威爾士的福布斯（Forbes)、特莫拉（Temora)和朱尼里夫斯 (Junee Reefs)，位于維多利亞的丁布拉（Dimboola)、埃爾莫爾（Elmore)和芒特默瑟（Mt Mercer)，和西澳大利亞的 Northam early 和 late。
[0083] VBHT0805和VBHT0802在所有地區(qū)都具有最高產(chǎn)量，比Buloke平均高出4%，表明 誘變過程沒有產(chǎn)生顯著影響澳大利亞的谷物產(chǎn)量的不利突變。另外，VBHT0806比Buloke產(chǎn) 量低4%。這些結(jié)果在表6中顯示。
[0084] 實施例7 :咪唑啉酮抗性突變大麥株系和Buloke的形態(tài)學(xué)和DNA比較
[0085] 將咪唑啉酮抗性突變大麥株系 VBHT0802、VBHT0803、VBHT0805、VBHT0806、 VBHT0807、VBHT0809和VBHT0810與野生型Buloke的的形態(tài)學(xué)特征和DNA比較。表7描述了 鑒定到的明顯不同的形態(tài)學(xué)和DNA特征，VBHT0803與Buloke不同在于其具有紫芒（purple awn)并且比Buloke矮小但不是矮化植株。VBHT0809有紫芒并且是矮化植株并有匍匐生長 的習(xí)性。
[0086] VBHT0805、VBHT0807和VBHT0810具有同樣的單體型，顯示它們是單一突變事件 的衍生株系。VBHT0802、VBHT0803、VBHT0806和VBHT0809都具有可能是用于誘變的初始 Buloke樣本內(nèi)異質(zhì)性所致的獨特單體型，并顯示每種都代表一種獨特的抗咪唑啉酮除草劑 變異事件。VBHT0805、VBHT0807和VBHT0810的單體型與Buloke參照樣本（VB0105*12)在 1424個單核苷酸多態(tài)性（SNP)位點有41個位點不同。
[0087] 實施例8 :咪唑啉酮抗性突變大麥株系的AHAS基因的DNA測序。
[