一種羊肚菌的液體菌種繁育方法和工廠化栽培方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及羊肚菌的人工培育技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種羊肚菌的液體菌種繁育方法和工廠化栽培方法。
【背景技術(shù)】
[0002]羊肚菌(Morchella)又稱羊肚菜、羊蘑、羊肚蘑和草笠竹。羊肚菌的結(jié)構(gòu)與盤菌相似，上部呈褶皺網(wǎng)狀，既像個蜂巢，也像個羊肚，因而得名。羊肚菌也常被用于食積氣滯、脘腹脹滿、痰壅氣逆喘咳。所以羊肚菌是一種珍貴的食用菌和藥用菌。但目前僅限于野生菌，產(chǎn)量非常有限，難以滿足人們對羊肚菌的需求，所以大家一直在尋求一種人工繁殖羊肚菌的方法。
[0003]公開號為CN104885786A的中國專利文獻(xiàn)公開了一種尖頂羊肚菌的人工栽培方法，包括以下步驟:(I)、采集尖頂羊肚菌，制備原種；(2)、將培養(yǎng)基A裝入菌種袋內(nèi)培養(yǎng)后滅菌處理；(3)、將原種接種到菌種袋內(nèi)的培養(yǎng)基A上培養(yǎng)20天?30天，得到種料；(4)、在種料中加入拌種劑，然后播種;所述拌種劑加入量為種料重量的5%?10% ；拌種劑的配比為:尿素1g?20g，KH2P04lg?2g，MgS(klg?2g，水800g?1200g;所述步驟(4)中，播種后將拌好的菌種顆粒均勻的撒在廂面，用細(xì)土均勻覆蓋，覆土厚度為3cm;覆土后將廂面用滾筒壓實(shí)并澆透水一次；(5)、田間管理:所述種料播種12?15天后浸水，浸水深度不超過溝深的90%，保持2?3小時后排干水分，讓土壤保持潤濕;然后每隔12天?15天重復(fù)一次浸水；(6)、擺袋:播種的土壤上出現(xiàn)孢子后在土壤上鋪設(shè)裝有培養(yǎng)基C的折角袋，折角袋上有孔;培養(yǎng)基C的重量配比為高粱60%?75%，谷殼15%?20%，油餅3%?5%，過磷酸鈣3%?5%，石灰I %?3 所述原種的制備過程為:A、選擇種菇:采集人工種植或者野生的尖頂羊肚菌，晾曬至含水量為60%?75%，得到種菇;B、菌種分離:用刀片將種菇的菌蓋縱向切開，用接種鉤鉤取小塊菌肉，接入分離培養(yǎng)基斜面上，并在15°C?20°C條件下培養(yǎng)9天?12天;得到菌種;C、將菌種分離出來置于培養(yǎng)基B內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)，于15°C?20°C條件下培養(yǎng)9天?12天;得到母種;D、將母種置于含有培養(yǎng)基C的原種培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為18?20 °C，濕度55 %?65%，二氧化碳濃度低于2000ppm，每天光照2小時?3小時。
[0004]現(xiàn)有的人工繁殖羊肚菌的方法不僅操作復(fù)雜、生產(chǎn)周期長，而且感染率高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種羊肚菌的液體菌種繁育方法，所述的羊肚菌的液體菌種繁育方法具有生產(chǎn)周期短、方法簡單、感染率低等優(yōu)點(diǎn)。
[0006]本發(fā)明的另一個目的在于提供一種羊肚菌的工廠化栽培方法，該方法具有成本低、操作簡單、便于推廣等優(yōu)點(diǎn)。
[0007]為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術(shù)方案:
[0008]—種羊肚菌的液體菌種繁育方法，包括以下步驟:
[0009]母種制作步驟:在無菌的環(huán)境下，取羊肚菌的菌柄和菌帽的銜接處的組織放入第一培養(yǎng)基中培養(yǎng)，在15-20°C的環(huán)境下培養(yǎng)并得到母種；
[0010]其中，按重量份計(jì)，第一培養(yǎng)基由以下組分制成:180-220份土豆、45-55份木肩、1600-2400份水、18-22份葡萄糖、0.8-1.2份硫酸鎂、90-110份土和18-22份瓊脂；
[0011]液體菌種制作步驟:無菌環(huán)境下在第二培養(yǎng)液中接入母種，進(jìn)行搖床培養(yǎng)，搖床培養(yǎng)的溫度為20-23 °C，搖床的旋轉(zhuǎn)頻率為350-500rpm，搖床培養(yǎng)3-6天后得到第一液體菌種；
[0012]其中，按重量份計(jì)，第二培養(yǎng)基由以下組分制成:180-220份土豆、180-220份麥麩、1600-2400份水、18-22份葡萄糖、0.8-1.2份硫酸鎂和0.25_1份維生素BI。
[0013]本發(fā)明還提供了一種羊肚菌的工廠化栽培方法，包括以下步驟:
[0014]菌包制作步驟:將小麥、木肩、土、麥麩、石灰、石膏、糖、硫酸鎂和谷殼混合得到混合物;混合物中，各個組分的重量百分?jǐn)?shù)分別為:小麥36-40%，木肩32-38%，土8-12%，麥麩8-12%，石灰 1-3%，石膏0.8-1.2%，糖0.8-1.2%，硫酸鎂0.8-1.2%，谷殼 1-3% ;然后將混合物裝袋并進(jìn)行加熱滅菌處理，再將第一液體菌種在無菌環(huán)境下接種到混合物，然后在15-22 0C條件下培養(yǎng)15-20天得到菌包；
[0015]脫袋栽培步驟:先在栽培區(qū)挖掘出土坑，然后將菌包脫袋后擺放在土坑內(nèi)，再向土坑內(nèi)填土并且覆蓋菌包，然后向栽培區(qū)澆水。
[0016]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為:
[0017](I)這種羊肚菌的液體菌種繁育方法，生產(chǎn)周期短，固體菌種從母種到栽培種三級制種的時間為3個月，而制備液體菌種不到20天，培養(yǎng)固體原種或栽培種的時間需90天，而培養(yǎng)一批液體菌種只需3-7天。制作液體菌種大大縮短了制種時間，能夠及時地供應(yīng)生產(chǎn)需要。
[0018](2)液體菌種制作簡單，固體菌種的制作要經(jīng)過從母種到原種再到栽培種三級制種過程，而且要更換培養(yǎng)基，手續(xù)繁雜。液體菌種的制作，只要同一種培養(yǎng)基，培養(yǎng)出來的菌種，既可作為母種使用，也可作為原種、栽培種的使用，減少了培養(yǎng)基的更換和培養(yǎng)環(huán)境的改變。
[0019](3)接種簡便，液體菌種可以用注射、拌料等多種形式接種，簡便、快速、均勻、適于機(jī)械化、自動化大規(guī)模生產(chǎn)使用。
[0020](4)發(fā)育快，每一個液體菌種的菌絲球都是一個生長中心，由于菌絲球數(shù)量多、分布均勻，接種后菌絲可迅速發(fā)育，短時間內(nèi)完成營養(yǎng)生長期，避免污染的發(fā)生和危險(xiǎn)。可提前發(fā)現(xiàn)菌球的生長情況至栽培種的菌絲纏繞強(qiáng)弱。
[0021](5)這種羊肚菌的液體菌種繁育方法比固體菌種感染率低50%左右。
[0022](6)工廠化栽培方法降低了投資成本，操作容易便捷，更適用于推廣，帶動老百姓發(fā)家致富。
【具體實(shí)施方式】
[0023]下面將結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)行詳細(xì)描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解，下列實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
[0024]—種羊肚菌的液體菌種繁育方法，包括以下步驟:
[0025]母種制作步驟:將180-220份土豆和45-55份木肩分別用800-1200份水煮20-40min，然后過濾并將兩種濾液混合得到第一混合水。為了方便過濾，可以先將180-220份土豆用800-1200份水煮20-40min后過濾去除土豆得到土豆水，然后將45-55份木肩布袋裝好，再將用布袋裝好的木肩放入800-1200份水中煮20-40min后取出并得到木肩水，將土豆水和木肩水混合后得到第一混合水。
[0026]然后將18-22份葡萄糖、0.8-1.2份硫酸鎂、90-110份土和18-22份瓊脂加入第一混合水中并煮15_25min得到第一培養(yǎng)液。其中維生素BI和片酵母片均呈片狀，0.5片指的是半片，1.5片指的是I片加半片，依次類推。此外，為了使第一培養(yǎng)液內(nèi)的各個營養(yǎng)成分混合更均勻，最好將第一培養(yǎng)液攪拌均勻后使用。
[0027]再將第一培養(yǎng)液分裝在滅菌容器內(nèi)進(jìn)行加熱滅菌處理，然后將滅菌容器靜置并使第一培養(yǎng)液冷卻凝固3-5天得到第一培養(yǎng)基;在無菌的環(huán)境下，取羊肚菌的菌柄和菌帽的銜接處的組織放入第一培養(yǎng)基中培養(yǎng)，在15-20Γ的環(huán)境下培養(yǎng)并得到母種。羊肚菌的菌柄和菌帽的銜接處的組織是指同時具有菌柄和菌帽的組織。
[0028]作為優(yōu)選，母種制作步驟中，羊肚菌由新鮮羊肚菌處理后得到，處理過程為:采摘生長完好、強(qiáng)壯的新鮮羊肚菌，然后將新鮮羊肚菌放入密閉容器內(nèi)或者用膠布包裹后在18-22 °C條件下放置3-5天。
[0029]作為優(yōu)選，母種制作步驟中的加熱滅菌處理的條件為:在壓力為0.1-0.2Pa且溫度為100_130°C的條件下滅菌40_50min。
[0030]作為優(yōu)選，滅菌容器為試管，加熱滅菌處理后將試管傾斜并與水平面保持15°的夾角進(jìn)行冷卻。試管容量小，每只試管裝的第一培養(yǎng)液量少，便于將第一培養(yǎng)液內(nèi)的病菌徹底殺滅。使試管保持傾斜狀態(tài)是本領(lǐng)域的常用手段，可以增大第一培養(yǎng)液的液面面積，有利于在單個試管內(nèi)獲得更多的母種。進(jìn)一步，還可以觀察母種的生長情況，挑選其中長勢好的母種進(jìn)行提純復(fù)壯。
[0031]液體菌種制作步驟:將180-220份土豆和180-220份麥麩分別用800-1200份水煮20-40min，