本發(fā)明涉及一種益生菌發(fā)酵的即沖枇杷葉袋泡茶的制備方法，屬于枇杷葉袋泡茶的制備方法技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
枇杷葉系薔薇科植物枇杷Eriobotryajaponiea(Tllunb.)Lindl的葉子，枇杷葉收載于歷版中國藥典中，具有良好的抗炎和止咳作用，臨床常用于治療急、慢性呼吸道疾病。枇杷葉不僅富含黃酮類、三萜酸類、多糖類及揮發(fā)油等功能化合物，而且含有無機(jī)鹽、蛋白質(zhì)、維生素及氨基酸等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。枇杷葉常年四季生長(zhǎng)，目前，一部分葉子用于分離提取有效功能成分，多數(shù)枇杷落葉作為垃圾焚燒，造成資源浪費(fèi)。2014年12月，國家衛(wèi)生計(jì)生委發(fā)布，關(guān)于批準(zhǔn)枇杷葉可以作為新資源食品原料的公告，至此，枇杷葉不僅僅是藥物原料，又可以是食品生產(chǎn)原料。
民間早有飲枇杷葉茶的習(xí)慣，但其方法是將枇杷葉洗凈、晾干后，沸水熬煮30分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間，這樣，不僅繁瑣，還會(huì)破壞枇杷葉中的維生素等高溫易分解的營(yíng)養(yǎng)成分。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是為了解決上述現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，進(jìn)而提供一種益生菌發(fā)酵的即沖枇杷葉袋泡茶的制備方法。
本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：
一種益生菌發(fā)酵的即沖枇杷葉袋泡茶的制備方法，步驟如下：
步驟一、原料預(yù)處理：選取同一生長(zhǎng)時(shí)期的鮮枇杷葉，放入7.5％的碳酸氫鈉水溶液中，浸泡1h，清洗去絨毛，中性清水沖洗，去梗，用組織搗碎機(jī)攪碎，得80％葉片為5mm以下碎片停止搗碎。
步驟二、菌種活化：采用三種乳桿菌凍干菌粉，鼠李糖乳桿菌(L.rhamnosus)、干酪乳桿菌(Lactobacillus casei)和兩歧雙歧桿菌(Bifidobacterium bifidum)；配制MRS培養(yǎng)基，MRS培養(yǎng)基分裝在10mL的三支試管中，121℃高壓滅菌20min。冷卻至37℃，在無菌操作臺(tái)上，三支試管，每支試管中接入一種菌粉，菌粉重量均為0.5g，搖勻，放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中活化20～28h，使活菌數(shù)達(dá)到1x105cfu/mL。
步驟三、接種發(fā)酵：取步驟一攪碎的枇杷葉，經(jīng)75％酒精消毒的托盤中，三種乳桿菌菌液按1:1:1體積比混合，每100g枇杷葉，共計(jì)接菌液10mL，攪拌均勻，攤成厚度為4～5cm的餅狀，蓋上保鮮膜，置于37℃、相對(duì)濕度95％的恒溫恒濕培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5～8h后，用75％酒精棉擦拭過的雙手，將全部發(fā)酵枇杷葉碎片，反復(fù)翻伴、反復(fù)揉搓，綠葉逐漸變褐色。
步驟四、烘干粉碎過篩：待發(fā)酵枇杷葉碎片全部由綠色變?yōu)楹稚?，放置鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)，60℃條件下干燥3～4h，干燥后經(jīng)搖擺式中藥粉碎機(jī)粉碎后，過40目的篩子，分裝每袋1.0g的即沖茶袋中。
所述MRS培養(yǎng)基由蛋白陳0.30g；牛肉粉0.15g；酵母粉0.12g；葡萄糖0.60g；吐溫80 0.03mL；磷酸氫二鉀0.06g；乙酸鈉0.15g；檸檬酸三銨0.06g；硫酸鎂0.006g；硫酸錳0.0015g和蒸餾水30mL組成。
步驟二中，恒溫培養(yǎng)箱中活化24h。
步驟三中，恒溫恒濕培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6h。
步驟三中，接種發(fā)酵時(shí)間共計(jì)48h，其中每間隔4h揉搓1次，且取樣測(cè)定pH值，控制為4.5～5之間。
步驟四中，60℃條件下干燥3.5h。
本發(fā)明的有益效果：
發(fā)酵枇杷葉茶是將枇杷葉攪碎后，枇杷葉的液胞膜受損傷之后，液泡內(nèi)的多酚類、氨基酸等物質(zhì)釋放，以枇杷葉內(nèi)含成分為基礎(chǔ)，在微生物分泌胞外酶和枇杷葉中所含酶的協(xié)同作用下，發(fā)生以茶多酚轉(zhuǎn)化為主體的化學(xué)變化，生成氧化產(chǎn)物茶黃素、茶紅素和茶褐素，茶黃素對(duì)茶湯的明亮度和鮮爽度有著影響，茶紅素則決定著茶湯的濃度和色澤。
益生菌是一種可以抵御病菌侵害人體腸道的有益菌群，乳桿菌可以代謝乳糖生成大量乳酸，促進(jìn)腸道蠕動(dòng)，盡快排除宿便，防止腸道吸收有害物質(zhì)。接入乳桿菌發(fā)酵枇杷葉可以迅速增加枇杷葉表面的乳酸菌數(shù)目，使乳酸發(fā)酵占主導(dǎo)地位，從而可以降低pH值，抑制有害微生物的生長(zhǎng)，提高枇杷葉發(fā)酵茶的品質(zhì)。
本發(fā)明在枇杷葉加工中，選取腸道益生菌群中的鼠李糖乳桿菌(L.rhamnosus)、干酪乳桿菌(Lactobacillus casei)和兩歧雙歧桿菌(Bifidobacterium bifidum)三種乳桿菌的混合菌粉，接種于攪碎的枇杷葉中，采用恒溫恒濕發(fā)酵培養(yǎng)，可以抑制有害微生物生長(zhǎng)，最大限度地把枇杷葉的功效成分浸出，發(fā)酵過程可控，開發(fā)出貯存、攜帶、食用均方便的功能飲品----即沖袋泡枇杷葉茶，將是天然植物加工研究領(lǐng)域的一項(xiàng)重大突破。
具體實(shí)施方式
下面將對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說明：本實(shí)施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進(jìn)行實(shí)施，給出了詳細(xì)的實(shí)施方式，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于下述實(shí)施例。
本實(shí)施例所涉及的一種益生菌發(fā)酵的即沖枇杷葉袋泡茶的制備方法，步驟如下：
1、選取同一生長(zhǎng)時(shí)期的鮮枇杷葉，稱取100g，放入7.5％的碳酸氫鈉水溶液中，浸泡1h，清洗去絨毛，中性清水沖洗，去梗，用組織搗碎機(jī)攪碎，得80％葉片為5mm以下碎片停止搗碎。
2、選取三種乳桿菌凍干菌粉，鼠李糖乳桿菌(L.rhamnosus)、干酪乳桿菌(Lactobacillus casei)和兩歧雙歧桿菌(Bifidobacterium bifidum)。
3、配制MRS培養(yǎng)基：(蛋白陳0.30g；牛肉粉0.15g；酵母粉0.12g；葡萄糖0.60g；吐溫80 0.03mL；磷酸氫二鉀0.06g；乙酸鈉0.15g；檸檬酸三銨0.06g；硫酸鎂0.006g；硫酸錳0.0015g；蒸餾水30mL，)分裝10mL的三支試管中，121℃高壓滅菌20min。冷卻至37℃，在無菌操作臺(tái)上，分別向每支試管中接入0.5g菌粉，搖勻，放置37℃恒溫培養(yǎng)箱中活化24h，使活菌數(shù)達(dá)到1x105cfu/mL。
4、取攪碎枇杷葉，經(jīng)75％酒精消毒的托盤中，三種乳桿菌菌液按1:1:1體積比混合，每100g枇杷葉，每支試管中取3.3mL，共計(jì)接菌液10mL，攪拌均勻，攤成4～5cm厚層，蓋上保鮮膜，置于37℃、相對(duì)濕度95％的恒溫恒濕培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6h后，用75％酒精棉擦拭過的雙手，將全部發(fā)酵枇杷葉碎片，反復(fù)翻伴、反復(fù)揉搓，綠葉逐漸變褐色。共計(jì)發(fā)酵48h，其中每間隔4h，揉搓1次，且取樣測(cè)定pH值，控制pH值在4.5～5之間。
5、待發(fā)酵枇杷葉碎片全部由綠色變?yōu)楹稚?，放置鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)，60℃3.5h，干燥后經(jīng)搖擺式中藥粉碎機(jī)粉碎后，過40目的篩子，分裝每袋1.0g的即沖茶袋中。
以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實(shí)施方式，這些具體實(shí)施方式都是基于本發(fā)明整體構(gòu)思下的不同實(shí)現(xiàn)方式，而且本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，可輕易想到的變化或替換，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。因此，本發(fā)明的保護(hù)范圍應(yīng)該以權(quán)利要求書的保護(hù)范圍為準(zhǔn)。