液,減壓回收乙醇至無醇味,即得。
[0027] 作為一個進(jìn)一步優(yōu)選的【具體實(shí)施方式】,本發(fā)明提供一種三顆針提取物的制備方 法,包括如下步驟:
[0028] I.將三顆針40?50°C烘干,粉碎后過40目篩,取篩下粉末;
[0029]II.步驟I得到的粉末中加入所述三顆針重量30?40倍的重量百分比濃度 為50 %?70 %的乙醇進(jìn)行超聲波輔助提取,提取溫度為40°C?60°C,提取時間為60? 90min,超聲頻率為30?40KHz;過濾,得到醇提取液;
[0030] III.步驟II得到的醇提取液,減壓回收乙醇至無醇味,得到三顆針乙醇提取物;
[0031] IV.步驟III得到的三顆針乙醇提取物溶解于10倍量的蒸餾水中,用等體積正丁 醇萃取三次,棄去并正丁醇萃取液,減壓濃縮正丁醇萃取后的水溶液,即得。
[0032] 作為最優(yōu)選的【具體實(shí)施方式】,本發(fā)明提供一種三顆針提取物的制備方法,包括如 下步驟:
[0033] I.將三顆針40?50°C烘干,粉碎后過40目篩,取篩下粉末;
[0034]II.步驟I得到的粉末中加入所述三顆針重量40倍的重量百分比濃度為60%的 乙醇進(jìn)行超聲波輔助提取,提取溫度為60°C,提取時間為60min,超聲頻率為30?40KHz; 過濾,得到醇提取液;
[0035] III.步驟II得到的醇提取液,減壓回收乙醇至無醇味,得到三顆針乙醇提取物;
[0036] IV.步驟III得到的三顆針乙醇提取物溶解于10倍量的蒸餾水中,用等體積正丁 醇萃取三次,棄去并正丁醇萃取液,減壓濃縮正丁醇萃取后的水溶液,即得。
[0037] 本發(fā)明的另一個目的,在于提供上述制備方法制備得到的三顆針提取物。
[0038] 本發(fā)明還有一個目的,在于提供三顆針或三顆針提取物在制備用于防治柑橘采后 病原菌的藥物組合物和/或柑橘采后保鮮劑中的用途;優(yōu)選的,所述三顆針提取物通過本 發(fā)明所述制備方法制備得到。
[0039]所述柑橘采后病原菌選自意大利青霉(Penicilliumitalicum),指狀青霉 (Penicilliumdigitatum),柑橘酸腐病菌(Geotrichumcandidum)和柑橘黑腐病菌 (Alternariacitri)中的一種或幾種。
[0040] 由此,本發(fā)明提供一種防治柑橘采后病原菌的藥物組合物,包括本發(fā)明所述制備 方法制備得到的三顆針提取物。
[0041] 另外,本發(fā)明還提供一種柑橘采后保鮮劑,包括本發(fā)明所述制備方法制備得到的 所述三顆針提取物。
[0042] 本發(fā)明所述的藥物組合物或柑橘采后保鮮劑,除所述三顆針提取物外,還可以包 括可以接受的輔料,例如選自羧甲基纖維素、殼聚糖等成膜劑,選自甘油、蔗糖酯、吐溫等的 助溶劑,選自檸檬酸、丙酸鈣、山梨酸鉀或苯甲酸鈉等的防腐劑,以及適當(dāng)?shù)娜軇缢?br>[0043] 超聲波具有"空化效應(yīng)","機(jī)械振動"以及"熱效應(yīng)"等特性,"空化效應(yīng)"可瞬間產(chǎn) 生幾千個大氣壓力,使提取介質(zhì)的微小氣泡壓縮、爆裂、破碎提取原料的細(xì)胞壁,加速天然 藥用成份的溶出,"機(jī)械振動"和"熱效應(yīng)"進(jìn)一步強(qiáng)化了溶出成份的擴(kuò)散,使藥用成份在提 取介質(zhì)中快速達(dá)到濃度平衡,可大大縮短提取成本。而且提取溫度較低,避免了長時間高溫 水煎煮對三顆針化學(xué)成分的破壞,提高產(chǎn)品質(zhì)量。
[0044] 本發(fā)明以天然的中草藥植物三顆針為原料,無論是乙醇提取物,還是正丁醇萃取 物,都具有很強(qiáng)的抑制意大利青霉,指狀青霉,柑橘黑腐病菌和酸腐病菌的作用。本發(fā)明所 述含有三顆針提取物的藥物組合物和柑橘保鮮劑,無化學(xué)殘留,對人體無健康危害,對環(huán)境 無污染,具有很好的應(yīng)用前景。
【附圖說明】
[0045] 圖1的照片顯示的是試驗(yàn)例1中,實(shí)施例1制備的三顆針提取物對意大利青霉、指 狀青霉、柑橘酸腐病菌和柑橘黑腐病菌的抑菌效果,箭頭指示的是抑菌環(huán)的邊緣;其中IA 顯示的是所述三顆針提取物對意大利青霉的抑菌效果,IB顯示的是所述三顆針提取物對指 狀青霉的抑菌效果,IC顯示的是所述三顆針提取物對柑橘酸腐病菌的抑菌效果,ID顯示的 是所述三顆針提取物對柑橘黑腐病菌的抑菌效果。
[0046] 圖2的照片顯示的是試驗(yàn)例1中,實(shí)施例1制備的不同濃度三顆針提取物對贛南 臍橙接種意大利青霉菌后的生防效果。
【具體實(shí)施方式】
[0047] 通過下面給出的具體的實(shí)例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明,但它不能理解為對本發(fā)明的 限定。
[0048] 下述實(shí)施例所用的藥材、試劑、生物材料,如無特殊說明,均來源于商業(yè)途徑。
[0049] 實(shí)施例1 一種三顆針提取物
[0050] 所述三顆針提取物通過如下步驟制備:
[0051] I.將三顆針40°C烘干,粉碎后過40目篩,取篩下粉末;
[0052] II.步驟I得到的粉末中加入所述三顆針重量20倍的重量百分比濃度為60%的 乙醇進(jìn)行超聲波輔助提取,提取溫度為40°C,提取時間為2小時,超聲頻率為30KHz;過濾, 得到醇提取液;
[0053] III.步驟II得到的醇提取液,減壓回收乙醇至無醇味,即得所述目標(biāo)產(chǎn)品。
[0054] 實(shí)施例2 -種三顆針提取物
[0055] 所述三顆針提取物通過如下步驟制備:
[0056] I.將三顆針50°C烘干,粉碎后過40目篩,取篩下粉末;
[0057] II.步驟I得到的粉末中加入所述三顆針重量40倍的重量百分比濃度為60%的 乙醇進(jìn)行超聲波輔助提取,提取溫度為50°C,提取時間為1小時,超聲頻率為30KHz;過濾, 得到醇提取液;
[0058] III.步驟II得到的醇提取液,減壓回收乙醇至無醇味,即得所述目標(biāo)產(chǎn)品。
[0059] 實(shí)施例3 -種三顆針提取物
[0060] 所述三顆針提取物通過如下步驟制備:
[0061] I.將三顆針50°C烘干,粉碎后過40目篩,取篩下粉末;
[0062] II.步驟I得到的粉末中加入所述三顆針重量40倍的重量百分比濃度為60%的 乙醇進(jìn)行超聲波輔助提取,提取溫度為50°C,提取時間為1小時,超聲頻率為40KHz;過濾, 得到乙醇提取液,減壓回收乙醇至無醇味,得到乙醇提取物;
[0063] III.步驟II得到的乙醇提取物溶解于10倍體積的蒸餾水中,用等體積的正丁醇 萃取三次,正丁醇萃取液另器收集,剩余水相減壓濃縮至干,得到所述目標(biāo)產(chǎn)品。
[0064] 實(shí)施例4-6 -種柑橘采后保鮮劑
[0065] 處方:實(shí)施例1-3制備的三顆針提取物IOOmg(用蒸餾水都配制成濃度為Ig藥材 /mL),羧甲基纖維素10g,檸檬酸鉀0. 6g,蔗糖酯5g,甘油5g,丙酸鈣10g,余量為蒸餾水,共 制成IOOOmL。
[0066] 制備方法:稱取處方量的羧甲基纖維素,加入適量蒸餾水溶脹8h,再加入蒸餾水 攪拌配制羧甲基纖維素溶液。然后依次加入檸檬酸、蔗糖酯、甘油、丙酸鈣及三顆針提取物, 用蒸餾水稀釋至lOOOmL,攪拌均勻,即得。其中,實(shí)施例1的三顆針提取物制備得到實(shí)施例 4的柑橘采后保鮮劑,實(shí)施例2的三顆針提取物制備得到實(shí)施例5的柑橘采后保鮮劑,實(shí)施 例3的三顆針提取物制備得到實(shí)施例6的柑橘采后保鮮劑。
[0067] 試驗(yàn)例1三顆針提取物對柑橘采后病原真菌的抑菌作用
[0068] 實(shí)驗(yàn)材料:
[0069] ①供試藥物:
[0070] A.實(shí)施例1制備的三顆針提取物,分別加蒸餾水配制成濃度為Ig藥材/mL的溶 液。
[0071] B.實(shí)施例3制備的三顆針提取物,分別加蒸餾水配制成濃度為Ig藥材/mL的溶 液。
[0072] C.三顆針正丁醇部分:實(shí)施例3步驟III中得到的正丁醇萃取液,減壓回收正丁 醇,配制成濃度為Ig藥材/mL的溶液。
[0073] ②供試菌株:意大利青霉(Penicilliumit