用于從羅漢果提取物去除農(nóng)藥殘留物的方法
【專利說明】用于從羅漢果提取物去除農(nóng)藥殘留物的方法
[0001] 本申請是2012年1月24日提交的發(fā)明名稱為"新蛇菊苷-羅漢果苷V混合物"的 中國專利申請第201280010780. 7號的分案申請。
【背景技術(shù)】
[0002] 天然熱量甜味劑如蔗糖、葡萄糖和果糖具有理想的口味特征，但是它們增加產(chǎn)品 的熱量。因此，消費者對視為更健康的替代品的低熱量或無熱量的甜味劑有很大興趣。已 知無熱量的天然或合成的高效甜味劑，但是它們大部分通常具有不像糖那樣令消費者滿意 的風(fēng)味特征譜。因此，期望開發(fā)可以取代糖并具有更理想的味道特征譜的無熱量甜味劑。
[0003] 物種甜葉菊（Stevia rebaudiana)( "甜葉菊（Stevia) "）是某些天然存在的甜味 甜菊糖苷的來源。已進(jìn)行相當(dāng)多的研究和開發(fā)以評價甜葉菊的甜味甜菊糖苷作為無熱量甜 味劑的用途?？梢詮奶鹑~菊提取的甜味甜菊糖苷包括6種新蛇菊苷（即，新蛇菊苷A-F)、甜 菊苷（來自野生型甜葉菊的提取物中的主要糖苷）、甜菊雙糖苷（steviolbioside)、甜葉懸 鉤子苷（rubusoside)和甜苷（dulcoside)。
[0004] 基于新蛇菊苷A和其他甜味甜菊糖苷的商業(yè)低熱量或無熱量甜味劑往往具有苦 味和甘草回味。這些特征在約300ppm以上的濃度時特別值得注意。在食品應(yīng)用中，優(yōu)選使 用水平（8-10%糖當(dāng)量值）通常為約500ppm-約lOOOppm，這高于在首先注意到后味的范 圍。因此持續(xù)需要包括甜味甜菊糖苷在內(nèi)的減少熱量、低熱量和/或無熱量的甜味劑，其具 有減少的或者沒有苦味、不期望的口味（例如，甘草）的味道特征譜，或者更像天然熱量甜 味劑的甜味特征譜，或者這類特性的組合。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 在一方面，本發(fā)明提供一種組合物，其包含重量比多1:1且<6:1的羅漢果苷 (mogroside) V和新蛇菊苷組分，其中所述新蛇菊苷組分由選自新蛇菊苷A、新蛇菊苷B和新 蛇菊苷D的一種或多種化合物組成。
[0006] 在另一方面，本發(fā)明提供一種純化羅漢果（Luo Han Guo)提取物的方法，所述方法 包括使羅漢果提取物與活性炭以及大孔聚合吸附樹脂、離子交換樹脂或這兩者接觸。
[0007] 在另一方面，本發(fā)明提供一種包含羅漢果提取物的組合物，其中羅漢果苷V占 所述羅漢果提取物的50wt% -75wt%，并且所述組合物包含相對于所述羅漢果苷V總計 0-13wt%的芳香糖苷，以及相對于所述羅漢果苷V0-15ppm的半揮發(fā)性有機化合物。
【附圖說明】
[0008] 圖1分別在上方和下方的色譜圖中示出示例性干羅漢果提取物的HPLC分析以及 已根據(jù)本發(fā)明進(jìn)行碳處理的相同物質(zhì)的分析。
[0009] 圖2示出圖1所示的色譜圖的放大視圖。
[0010] 圖3示出羅漢果樣品中存在的半揮發(fā)性化合物的氣相色譜圖，一個在用活性炭處 理之前進(jìn)行，并且一個在根據(jù)本發(fā)明用活性炭處理之后進(jìn)行。
[0011] 圖4示出包含產(chǎn)生霉味的組分的羅漢果部分的HPLC色譜圖。
[0012] 圖5示出羅漢果部分的ATR-FTIR譜，顯示出與芳香糖苷的存在一致的特征帶。
[0013] 圖6示出圖4中的主要組分的飛行時間（ToF)準(zhǔn)確質(zhì)譜。
【具體實施方式】
[0014]
[0015] 如本文所用，短語"甜味甜菊糖苷"表示具有甜菊醇（steviol)二萜環(huán)系統(tǒng)的一般 結(jié)構(gòu)的任何天然存在的化合物，其含有一個或多個化學(xué)連接至該環(huán)的糖殘基。
[0016] 如本文所用，短語"新蛇菊苷組分"表示存在的新蛇菊苷A、B和D的總和，應(yīng)理解 可能事實上僅存在這些中的一種或兩種。
[0017] 包含新蛇菊苷-羅漢果苷V混合物的甜味組合物
[0018] 現(xiàn)在公開羅漢果苷V與由新蛇菊苷A、B和D中的一種或多種組成的新蛇菊苷組分 的混合物提供優(yōu)異的口味特征，在許多情況下，當(dāng)在相同水平的甜度比較時，優(yōu)于單獨的新 蛇菊苷組分或羅漢果苷V。在一些系統(tǒng)中，改良的味道在約pH 2-約pH 8的pH值下最明 顯。
[0019] 羅漢果苷V可以獲得自羅漢果提取物，其可商購自許多來源。制備這類提取物的 示例性方法描述于美國專利第5, 411，755號和美國公開號2006/0003053,兩者援引加入本 文用于所有目的。羅漢果提取自原產(chǎn)于中國南部和泰國北部的草本多年生藤本植物羅漢果 (Siraitia grosvenorii)的果實。它是羅漢果（Siraitia)屬中的4個物種之一。植物學(xué) 同義詞包括羅漢果（Momordica grosvenorii)和羅漢果（Thladiantha grosvenorii)。所 述提取物比蔗糖甜約200-300倍。
[0020] 通常，羅漢果苷V是羅漢果提取物的最豐富的單一羅漢果苷組分，伴隨有其他羅 漢果苷如羅漢果苷I、II、III、IV和VI以及其他提取的物質(zhì)，例如多酚、類黃酮、類黑精、 萜、蛋白質(zhì)、糖類、芳香糖苷和半揮發(fā)性有機化合物。在本發(fā)明的一些實施方案中，以羅漢 果提取物的形式提供羅漢果苷V (未加工的或者純化和/或濃縮以增加羅漢果苷V含量）。 在一些實施方案中，羅漢果苷V占所述提取物的至少40wt %，或者至少45wt %，或者至少 50wt %。通常，其占所述提取物的最多95wt %，所述提取物的最多85wt %，所述提取物的最 多75wt%，所述提取物的最多70wt%，或者最多65wt%，或者最多60wt%。
[0021] 在一些本發(fā)明的甜味組合物中，羅漢果苷V比新蛇菊苷組分的重量比為至少1:1， 或者至少1.3:1，或者至少1.5:1。所述重量比通常為最多5:1，或者最多4:1，或者最多 3. 5:1，或者最多3:1，或者最多2. 5:1，或者最多2:1，或者最多1.9:1，或者最多1.8:1，或者 最多1. 7:1。
[0022] 新蛇菊苷組分由新蛇菊苷A、B和/或D中的一種或多種組成。新蛇菊苷組分 通常占存在的總甜味甜菊糖苷的至少65wt%，或者至少70wt%，或者至少75wt%，或者 至少80wt%，或者至少90wt%，或者至少97wt%。如果存在，甜味甜菊糖苷的剩余部分 (balance)可以包含一種或多種新蛇菊苷C、E和/或F、甜菊苷以及不是新蛇菊苷組分部分 的任何其他甜味甜菊糖苷。通常，新蛇菊苷A占存在的甜味甜菊糖苷的至少50wt%，或者 至少60wt %，或者至少70wt %，或者至少80wt %，或者至少90wt %，或者至少95wt %。新 蛇菊苷A、B和D可以獲得自甜葉菊的提取物，其可商購自許多來源。已知并且已在文獻(xiàn)中 描述制備這類提取物以及從所述提取物獲得相對純的新蛇菊苷A、B或D的許多不同方法。 在一典型方法中，將甜葉菊植株干燥并進(jìn)行水提取方法。這種粗提取物包含約50%新蛇菊 苷A。通常使用乙醇或甲醇作為溶劑，通過結(jié)晶技術(shù)分離提取物中的各種糖苷分子，允許分 離純新蛇菊苷A、B和D。然后可以將各純化的糖苷組合使用以提供可用于本發(fā)明的新蛇菊 苷組分。
[0023] 雖然本發(fā)明的甜味組合物可以包含不同量的各種類型甜味劑的混合物，但是在一 些實施方案中，所述組合物基本上由任選地純化和/或濃縮的羅漢果提取物以及任選地純 化和/或濃縮的甜葉菊提取物組成。
[0024] 去除羅漢果的異味組分
[0025] 在廣泛研究之后，現(xiàn)在還發(fā)現(xiàn)羅漢果提取物中某些雜質(zhì)的存在導(dǎo)致一些味道測試 者描述為"霉味"的異味。具體地，已鑒定芳香糖苷和半揮發(fā)性有機化合物產(chǎn)生這種不期望 的口味，雖然還可能存在額外的霉味或其他異味組分。一種特別的芳香糖苷的分子量為502 道爾頓，并且看來特別地產(chǎn)生霉味。這種化合物的分子式為C26H3(A。，并且根據(jù)本發(fā)明，所有 具有這種分子式的化合物在一些實施方案中是受限的。實現(xiàn)足夠低水平的這種化合物的任 何方法適合本發(fā)明的目的。一種合適的方式是使羅漢果苷V的水溶液（例如任選地純化和 /或濃縮的羅漢果提取物的形式）通過顆?；钚蕴康闹?。還可以使用活性炭的其他形式， 例如粉末。碳處理通常還去除額外的霉味或其他異味組分以及農(nóng)藥殘留物和一般在用于人 食用的成分中不期望的其他這類物質(zhì)。通常，水是碳處理期間存在的唯一載體，并且不加入 有機溶劑。在一些實施方案中，將羅漢果提取物用大孔聚合吸附樹脂、離子交換樹脂和活性 炭處理。通常處理會按照這個順序，但不是必須如此。一種示例性大孔聚合樹脂可商購自 Rohm and Haas, Philadelphia，PA，商品名為 AmbERLITE k XADl 180N。一種示例性合適 的離子交換樹脂為陰離子樹脂，商品名為AMBERLITE?FPA90 CL，也可獲得自Rohm and Haas 〇
[0026] 處理必須使用足量的活性炭，并且必須進(jìn)行足夠長的接觸時間以將一種或多種芳 香糖苷以及半揮發(fā)性有機化合物雜質(zhì)的水平減少至可接受的水平。在本發(fā)明的一些實施 方案中，甜味組合物包含總計〇_13wt %的芳香糖苷，或者0-1 Iwt %，或者O-IOwt %，或者 0-9wt%，所有均相對于羅漢果苷V。芳香糖苷可以為苯基糖苷，或更具體地為酚糖苷，或者 它們可以為香豆素糖苷，或更具體地為呋喃香豆素糖苷。在一些實施方案中，這些相同的限 制也適合分子量502的化合物，并且更具體地適合式C26H3(A。的化合物，在每種情況下指分 子量502或式C26H31A。的所有化合物的總量。
[0027] 在本發(fā)明的一些實施方案中，甜味組合物包含總計0_15ppm wt的半揮發(fā)性有機化 合物，或者〇-11??111￥1:，或者〇-7??111￥1:，或者〇-3??111￥1:，所有均相對于羅漢果苷￥。如本 文所用，術(shù)語"半揮發(fā)性"表示這樣的化合物，其具有超過120道爾頓的分子量以及在Iatm 壓力下大于150°C且最高350°C的沸點。這類半揮發(fā)性有機化合物可以包含但不限于表7 所列的化合物。所述半揮發(fā)性有機化合物可以例如包括脂肪族呋喃、不飽和脂肪族化合物 (aliphatics)、酯、多環(huán)經(jīng)和/或砲類化合物。
[0028] 可以將通常包含至少40 %羅漢果苷V (d. s. b)的可商購羅漢果粉狀果實提取物用 活性炭如下處理。將干提取物以至少約lwt%且通常最多約70wt%的濃度溶于去離子水。 將水加熱至足以促進(jìn)粉狀物質(zhì)溶解的溫度，通常在環(huán)境溫度和160° F(71. ItC )之間的范 圍內(nèi)，并且任選地使用微濾膜或者使用具有不反應(yīng)性助濾劑的濾紙過濾。微濾的目的是去 除可以使產(chǎn)品變壞的不溶性蛋白和/或微生物。用活性炭（active carbon)(也稱作