技術(shù)特征:
1.一種山羊痘、羊口瘡病毒二聯(lián)細(xì)胞弱毒疫苗,其特征在于有效成分包括山羊痘病毒細(xì)胞傳代致弱毒以及羊傳染性膿皰病毒細(xì)胞傳代致弱毒,其中,所述的山羊痘病毒細(xì)胞傳代致弱毒為山羊痘病毒細(xì)胞傳代致弱毒GoatpoxVirusHN-XY2010F43株,保藏在中國典型培養(yǎng)物保藏中心,保藏時(shí)間為2015年1月14日,保藏編號為CCTCCNO:V201503,所述的羊傳染性膿皰病毒細(xì)胞傳代致弱毒為羊傳染性膿皰病毒細(xì)胞傳代致弱毒OrfVirusHB-TS09F65株,保藏在中國典型培養(yǎng)物保藏中心,保藏時(shí)間為2014年3月19日,保藏編號為CCTCCNO:V201406。2.權(quán)利要求1所述的山羊痘、羊口瘡病毒二聯(lián)細(xì)胞弱毒疫苗在制備防治羊痘以及羊口瘡藥物中的應(yīng)用。3.一種制備權(quán)利要求1所述的山羊痘、羊口瘡病毒二聯(lián)細(xì)胞弱毒疫苗的方法,其特征在于包括以下步驟:(1)病毒抗原的制備選生長良好布滿單層的新生牛睪丸原代細(xì)胞和新生羊睪丸原代細(xì)胞,傾去營養(yǎng)液,按原營養(yǎng)液體積的1-10%分別接種權(quán)利要求1所述的羊傳染性膿皰病毒細(xì)胞傳代致弱毒以及山羊痘病毒細(xì)胞傳代致弱毒的病毒液,吸附5-15分鐘后加DMEM維持液,調(diào)PH至7.0~7.2,加青霉素、鏈霉素各100單位/ml,于37℃、5%CO2濃度培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng);培養(yǎng)40~72h,細(xì)胞病變達(dá)到75%以上時(shí)收獲病毒,置-20℃冰箱反復(fù)凍融兩次,然后進(jìn)行無菌檢驗(yàn)、安全檢驗(yàn)、支原...