本發(fā)明屬于醫(yī)藥領域，特別涉及抑制VEGF的式Ⅰ化合物及鹽的氣霧劑藥物組合物，在藥物上的用途和藥用制劑，特別是針對腫瘤、血管新生的治療。本發(fā)明也涉及該化合物的合成方法。
背景技術：
：：血管新生包括兩個概念：胚胎期的血管發(fā)生(vasculogenesis，VG)和出生后的血管生成(ang1ogenesis，AG)。VG指的是在沒有血管系統(tǒng)的情況下，由血管內皮祖細胞(Endothelialprogenitorcell，EPCs)或成血管細胞(angloblasts)分化成內皮細胞，并形成血管網。AG指的是在成體血管，由已經存在的成熟內皮細胞沖破管壁基質遷移，增殖和重構，以發(fā)芽方式使血管樹枝持續(xù)延長。本發(fā)明中的血管新生是指出生后的血管生成(anglogenesis，AG)。血管新生(anglogenesis)不但是正常生理變化中(如生長、傷口愈合)所必需有的過程，近年來科學家們也發(fā)現(xiàn)它和腫瘤、老年性黃斑變性、惡性血液病等許多疾病的發(fā)展有密切的關系。抑制病理性的血管新生，可以治療或減緩腫瘤、老年性黃斑變性、惡性血液病等許多疾病。目前臨床治療腫瘤的方法大多是針對不同腫瘤采用不同的方法，并且絕大部分是針對腫瘤細胞進行治療。而腫瘤生長是一個復雜的過程，它受到多種因素的影響，其中包括腫瘤血管網的建立。許多研究已經證明腫瘤生長必須依賴血管生成，通過抑制血管生成的某些環(huán)節(jié)或整個過程，進而控制腫瘤的生長，對腫瘤治療和防止腫瘤遠處轉移有重要意義。70年代初隨著腫瘤生長依賴于血管形成概念的提出，也相應提出了抗血管形成治療的概念，即通過阻止新生血管的發(fā)生和/或新生血管網的擴展和/或破壞新生血管來阻止小的實體瘤的產生或建立，以阻止腫瘤生長、發(fā)展和轉移。國外報道較多的肝素加氫化可的松.被公認為能有效地抑制血管生成。實驗證實，其二者聯(lián)合應用能抑制雞胚絨毛尿囊膜上血管的生成，井能使腫瘤消退和阻止轉移，還可抑制腫瘤引起的兔角膜血管新生。而血管內皮生長因子(VEGF)是一類多功能的生長因子，具有促進內皮細胞增殖、誘導血管形成的作用，一般認為抑制血管內皮生長因子(VEGF)可以治療或減緩病理性血管新生。血管內皮生長因子(VEGF)與新生血管有關的疾病如腫瘤、眼部新生血管疾病、惡性血液病、支氣管哮喘等疾病有密切關系，通過抑制血管內皮生長因子(VEGF)，可以治療或減緩這些疾病，大量文獻均有這方面的報道如《綜述VEGF的結構特征及生物學功能》(中華臨床醫(yī)學研究雜志,2007年13卷3期,388)、《血管內皮生長因子及其受體在婦科疾病中的研究進展》(河北醫(yī)藥2006年28卷12期，1192-1194)、《血管內皮生長因子與腫瘤關系研究進展》(廣西醫(yī)科大學學報，2006年23卷2期，333-335)、《VEGF相關抗腫瘤治療的研究現(xiàn)狀》(吉林醫(yī)學，2006年27卷5期，454-457)、《靶向VEGF治療惡性腫瘤的研究進展》(現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學，2006年14卷3期，370-372)、《VEGF和PEDF對眼底新生血管的共同調節(jié)作用》(國外醫(yī)學：臨床生物化學與檢驗學分冊,2005年26卷11期,819-821)、《眼底新生血管防治的研究進展》(眼科新進展,2000年20卷6期,449-451)、《血管內皮生長因子及其受體與眼內新生血管性疾病》(眼科研究,2003年21卷1期,103-106)、《VEGF與惡性血液病的關系》(國外醫(yī)學：生理病理科學與臨床分冊，2004年24卷2期，183-185)、《腦白質疏松患者血清VEGF水平的研究》(疑難病雜志,2007年6卷1期,10-11)、《血管內皮生長因子與支氣管哮喘》(實用醫(yī)學雜志，2007年第23卷第3期，433)。技術實現(xiàn)要素：：我們驚奇的發(fā)現(xiàn)，含有化合物Ⅰ或其生理學上可接受的鹽與一種或幾種藥物輔料的藥物組合物具有作為血管內皮生長因子受體抑制劑的藥物中的應用和治療病理性血管新生疾病的藥物中的應用。本領域的技術人員可以認為，本文所涉及的“治療”可以延伸為疾病的預防和以確定疾病的治療。一種氣霧劑藥物組合物，含有化合物Ⅰ或其生理學上可接受的鹽、一種或幾種適用于的吸入氣霧劑給藥的藥用輔料，所述的藥用輔料為適用于氣霧劑的可藥用的拋射劑和其它可選附加劑，R＝含有3-10個碳原子的一個雜原子的環(huán)烷基，其中雜原子為N、O、S。上述的吸入氣霧劑藥物組合物，其特征是所述的拋射劑為氟烴類化合物中的一種或幾種。上述的吸入氣霧劑藥物組合物，其特征是所述拋射劑為1,1,1,2－四氟乙烷(HFA134a)和1,1,1.2,3,3,3－七氟丙烷(HFA227)中的一種或其組合。述的吸入氣霧劑藥物組合物，其特征是所述拋射劑為1,1,1,2－四氟乙烷。上述的吸入氣霧劑藥物組合物，其特征是所述拋射劑為1,1,1.2,3,3,3－七氟丙烷(HFA227)。上述的吸入氣霧劑藥物組合物，其特征是所述拋射劑為1,1,1,2－四氟乙烷(HFA134a)和1,1,1.2,3,3,3－七氟丙烷(HFA227)中的組合。上述的吸入氣霧劑藥物組合物，其特征是附加劑中含有溶劑，溶劑選自甘油，丙二醇、聚乙二醇、乙醇或油酸中的一種或幾種。上述的吸入氣霧劑藥物組合物，其特征是所述溶劑為乙醇。1,1,1,2－四氟乙烷的縮寫為HFA134a。1,1,1.2,3,3,3－七氟丙烷的縮寫為HFA227。上述藥物組合物，其特征在于式Ⅰ化合物的取代基R為含有3-8個碳原子的雜原子環(huán)烷基。上述藥物組合物，其特征在于式Ⅰ化合物的取代基R中的雜原子為N。上述藥物組合物，其特征在于式Ⅰ化合物的取代基R中的雜原子為O或S。上述藥物組合物，其特征在于式Ⅰ化合物為：5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)丙烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)丁烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)戊烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)戊烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)己烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)己烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)己烷-4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)庚烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)庚烷--3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)庚烷--4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)辛烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)辛烷-5-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺,5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氧雜環(huán)丙烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氧雜環(huán)戊烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氧雜環(huán)己烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氧雜環(huán)庚烷-4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氧雜環(huán)辛烷-4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(硫雜環(huán)丁烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(硫雜環(huán)戊烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(硫雜環(huán)己烷-4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(硫雜環(huán)庚烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(硫雜環(huán)辛烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺。上述藥物組合物，其特征在于式Ⅰ化合物的為：5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)丙烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)丁烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)戊烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)戊烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)己烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)己烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)己烷-4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)庚烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)庚烷--3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)庚烷--4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)辛烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)辛烷-5-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺。上述藥物組合物，其特征在于式Ⅰ化合物的為：5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)丙烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)戊烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)己烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)己烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)庚烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺。上述藥物組合物，其特征在于式Ⅰ化合物的為：5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)丁烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)戊烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)己烷-4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)庚烷--3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)庚烷-4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)辛烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氮雜環(huán)辛烷-5-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺。上述藥物組合物，其特征在于式Ⅰ化合物的為：5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氧雜環(huán)丙烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氧雜環(huán)戊烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氧雜環(huán)己烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氧雜環(huán)庚烷-4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(氧雜環(huán)辛烷-4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺。上藥物組合物，其特征在于式Ⅰ化合物的為：5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(硫雜環(huán)丁烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(硫雜環(huán)戊烷-3-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(硫雜環(huán)己烷-4-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(硫雜環(huán)庚烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺，5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(硫雜環(huán)辛烷-2-羥基)-異噻唑-4-]-噻唑甲酰胺。上藥物組合物，其特征在于式Ⅰ化合物的生理學上可接受的鹽為從以下酸形成的鹽：鹽酸、氫溴酸、硫酸、枸櫞酸、酒石酸、磷酸、甲磺酸、苯乙酸、富馬酸、馬來酸、苯磺酸、蘋果酸、谷氨酸、羥乙磺酸中的一種。上述藥物組合物作為治療疾病的藥物中的應用。上述藥物組合物作為血管內皮生長因子受體抑制劑的藥物中的應用。上藥物組合物在制備治療病理性血管新生疾病的藥物中的應用。上述藥物組合物在制備治療腫瘤類疾病藥物的應用。上述藥物組合物在制備治療呼吸道炎癥的藥物中的應用。上述藥物組合物在制備治療惡性血液病的藥物中的應用。上述的藥物組合物在制備治療哮喘的藥物中的應用。上述的化合物Ⅰ或其生理學上可接受的鹽作為治療疾病的藥物中的應用。上述的化合物Ⅰ或其生理學上可接受的鹽作為血管內皮生長因子受體抑制劑的藥物中的應用。上述的化合物Ⅰ或其生理學上可接受的鹽在于制備治療病理性血管新生疾病的藥物中的應用。血管新生性疾病，主要涉及腫瘤、眼部新生血管、惡性血液病、支氣管哮喘、腦白質疏松疾病。腫瘤主要是各種實體腫瘤如胃部腫瘤、肺部腫瘤、肝部腫瘤、各種腺體腫瘤、鼻部腫瘤、眼部腫瘤、咽部腫瘤、喉部腫瘤等；惡性血液病是指血液系統(tǒng)的惡性腫瘤，主要包括白血病、淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤及惡性組織細胞病等。上述的化合物Ⅰ或其生理學上可接受的鹽在制備治療腫瘤類疾病藥物的應用。上述的化合物Ⅰ或其生理學上可接受的鹽在制備治療呼吸道炎癥的藥物中的應用。上述的化合物Ⅰ或其生理學上可接受的鹽在制備治療惡性血液病的藥物中的應用。上述的化合物Ⅰ或其生理學上可接受的鹽在制備治療哮喘的藥物中的應用。一種制備上述雜原子為N的式Ⅰ化合物的方法：步驟一：氮氣保護下將化合物1加入8個碳以內的常溫下為液體的醚中，然后降溫至0℃以下，向其中滴加正丁基鋰，反應結束后，向反應液中滴加溴，滴加完成后升至室溫，攪拌半小時后向其中加入鹽酸溶液，分層，水相用常溫下為液體的有機醚類溶劑萃取后棄去，合并有機相，過濾后濃縮至干，得黃色油狀物化合物2；步驟二：將化合物2加入裝置中，冷至0℃以下，將提前配好的混酸(濃硫酸：發(fā)煙硝酸的體積比為55：36)滴加入反應瓶中，TLC顯示原料消失后冷至室溫，反應液傾入碎冰中，有黃色固體析出，過濾，濾餅用水洗滌至中性，干燥，得化合物3粗品，所得粗品柱層析純化后得白色固體化合物3；步驟三：氮氣保護下將化合物4加入8個碳以內的常溫下為液體的醚中，然后加入NaH室溫攪拌1小時，然后加入化合物3，反應2小時，TLC顯示原料消失后，向反應液中加入乙酸乙酯和飽和食鹽水，分層后有機相用無水硫酸鈉干燥，過濾后減壓濃縮至干，剩余物柱層析純化得黃色固體化合物6；步驟四：將化合物6和5％Pd/C加入1-3個碳的醇中，通氫氣進行硝基還原反應，反應畢過濾，濾液減壓濃縮得化合物7；步驟五：氮氣保護下將化合物7和化合物8加入1-3個碳的醇中，加熱反應，反應畢，減壓濃縮至干，剩余物柱層析純化得化合物9；步驟六：制備化合物Ⅰ將化合物9加入1-3個碳的常溫液態(tài)鹵代烷中攪拌，然后加入HCl/二氧六環(huán)，攪拌反應半小時，用有機堿調節(jié)PH>7后過濾，得化合物Ⅰ。一種制備上述雜原子為O或S的式Ⅰ化合物的方法：步驟一：氮氣保護下將化合物1加入8個碳以內的常溫下為液體的醚中，然后降溫至0℃以下，向其中滴加正丁基鋰，反應結束后，向反應液中滴加溴，滴加完成后升至室溫，攪拌半小時后向其中加入鹽酸溶液，分層，水相用常溫下為液體的有機醚類溶劑萃取后棄去，合并有機相，過濾后濃縮至干，得黃色油狀物化合物2；步驟二：將化合物2加入裝置中，冷至0℃以下，將提前配好的混酸(濃硫酸：發(fā)煙硝酸的體積比為55：36)滴加入反應瓶中，TLC顯示原料消失后冷至室溫，反應液傾入碎冰中，有黃色固體析出，過濾，濾餅用水洗滌至中性，干燥，得化合物3粗品，所得粗品柱層析純化后得白色固體化合物3；步驟三：氮氣保護下將化合物4加入8個碳以內的常溫下為液體的醚中，然后加入NaH室溫攪拌1小時，然后加入化合物3，反應2小時，TLC顯示原料消失后，向反應液中加入乙酸乙酯和飽和食鹽水，分層后有機相用無水硫酸鈉干燥，過濾后減壓濃縮至干，剩余物柱層析純化得黃色固體化合物6；步驟四：將化合物6和5％Pd/C加入1-3個碳的醇中，通氫氣進行硝基還原反應，反應畢過濾，濾液減壓濃縮得化合物7；步驟五：氮氣保護下將化合物7和化合物8加入1-3個碳的醇中，加熱反應，反應畢，減壓濃縮至干，剩余物柱層析純化得化合物Ⅰ。一種制備上述式Ⅰ化合物的鹽方法為將化合物Ⅰ溶于1-3個碳的常溫為液態(tài)的鹵代烷中，相應的酸溶于8個碳以內的常溫下為液體的醚或醇中，混合后調節(jié)PH值為酸性，室溫攪拌半小時后過濾，即可得到化合物Ⅰ的鹽。一種制備上述雜原子為N的式Ⅰ化合物酸鹽的方法：步驟一：氮氣保護下將化合物1加入8個碳以內的常溫下為液體的醚中，然后降溫至0℃以下，向其中滴加正丁基鋰，反應結束后，向反應液中滴加溴，滴加完成后升至室溫，攪拌半小時后向其中加入鹽酸溶液，分層，水相用常溫下為液體的有機醚類溶劑萃取后棄去，合并有機相，過濾后濃縮至干，得黃色油狀物化合物2；步驟二：將化合物2加入裝置中，冷至0℃以下，將提前配好的混酸(濃硫酸：發(fā)煙硝酸的體積比為55：36)滴加入反應瓶中，TLC顯示原料消失后冷至室溫，反應液傾入碎冰中，有黃色固體析出，過濾，濾餅用水洗滌至中性，干燥，得化合物3粗品，所得粗品柱層析純化后得白色固體化合物3；步驟三：氮氣保護下將化合物4加入8個碳以內的常溫下為液體的醚中，然后加入NaH室溫攪拌1小時，然后加入化合物3，反應2小時，TLC顯示原料消失后，向反應液中加入乙酸乙酯和飽和食鹽水，分層后有機相用無水硫酸鈉干燥，過濾后減壓濃縮至干，剩余物柱層析純化得黃色固體化合物6；步驟四：將化合物6和5％Pd/C加入1-3個碳的醇中，通氫氣進行硝基還原反應，反應畢過濾，濾液減壓濃縮得化合物7；步驟五：氮氣保護下將化合物7和化合物8加入1-3個碳的醇中，加熱反應，反應畢，減壓濃縮至干，剩余物柱層析純化得化合物9；步驟六：制備化合物Ⅰ的鹽化合物9→化合物Ⅰ的鹽將化合物9加入1-3個碳的常溫液態(tài)鹵代烷中攪拌，然后加入相應酸/5個碳以內的醚，調節(jié)PH值為酸性，攪拌反應半小時，過濾，得化合物Ⅰ的鹽。D90粒徑是指一個樣品的累計粒度分布百分數(shù)達到90％時所對應的粒徑。具體實施方式：本發(fā)明中柱層析方法：層析柱的長度最少70cm，內部裝填254-硅膠，并將需要分離的有機物全溶于最少量的氯仿：甲醇＝1：1中，用最少量254-硅膠將該溶液吸收后置于層析柱內硅膠的上部，使用流動相洗脫，層析柱下用若干個10ml試管接經過柱層析得到的溶液，控制流速為10ml/3min，將每個試管的溶液用HPLC進行分析，將保留時間相同的試管溶液合并，取主點的化合物進行重結晶，得到相應的產物。確定主點的方法：將需要分離的有機物用HPLC進行分析，除原料點外峰面積最大的點確定為主點，其保留時間為主點的保留時間。本發(fā)明中手性柱分離相應的手性化合物柱的方法：采用CHIRALPAKAS-H粒徑5u4.6mm(id)X250mm分析柱，流動相：正己烷：異丙醇：乙二胺＝90:9:0.1，檢測波長：紫外300納米，柱溫：25℃流速：1.0ml/min將實施例中的RS化合物分離出R或S的手性化合物。13C，400MHz，DMSO-d6，1位至13位碳的δ數(shù)值:C的位置123413C-NMR161.3-163.6143.6-144.5118.7-119.4169.5-171.0C的位置567813C-NMR110.2-112.0160.1-160.8110.3-110.8128.9-129.7C的位置910111213C-NMR110.3-110.8160.1-160.8123.8-124.9149.6-150.9C的位置1313C-NMR146.8-148.2實施例1-1至1-22中的R見上表。實施例1-1化合物Ⅰ的步驟一：氮氣保護下將化合物1(20g，0.235mol)加入干燥的100ml乙醚中攪拌溶解，然后降溫至0℃以下，向其中滴加正丁基鋰(0.24mol)，滴加過程中保持在0℃以下，滴加完成后保溫反應直至無化合物1。向反應液中滴加溴素(0.5mol)，滴加過程中保持在0℃以下，滴加完成后緩慢升至室溫，攪拌半小時后向其中加入鹽酸溶液(2N，500ml)淬滅反應。分層，水相用乙醚(200ml*3)萃取后棄去，合并有機相，連二亞硫酸鈉溶液洗滌(100ml*2)、無水硫酸鈉干燥、過濾后濃縮至干，得黃色油狀物化合物2。本步驟中乙醚還可以用甲乙醚、二甲醚、四氫呋喃、1，4-二氧六環(huán)等溶劑代替。步驟二：將1mol化合物2加入裝置中，冷至0℃以下。將提前配好的混酸(濃硫酸：發(fā)煙硝酸的體積比為55：36)緩慢滴加入反應瓶中，TLC顯示原料消失后冷至室溫，反應液傾入碎冰中，有黃色固體析出。過濾，濾餅用水洗滌至中性，干燥，得化合物3粗品。所得粗品柱層析(乙酸乙酯/正己烷＝1/20-1/10)純化后得白色固體化合物3。步驟三：氮氣保護下將1mol化合物4加入乙醚中，然后加入1.1molNaH室溫攪拌1小時。然后加入化合物3(0.8mmol)，反應至TLC顯示原料消失后，向反應液中加入乙酸乙酯和飽和食鹽水，分層后有機相用無水硫酸鈉干燥，過濾后減壓濃縮至干，剩余物柱層析(乙酸乙酯/正己烷＝1/10-1/5)純化得黃色固體化合物6。本步驟中乙醚還可以用甲乙醚、二甲醚、四氫呋喃、1，4-二氧六環(huán)等溶劑代替。步驟四：將1mol化合物6和60g5％Pd/C加入甲醇中，通氫氣進行硝基還原反應，反應至無原料點，反應畢過濾，濾液減壓濃縮得化合物7。本步驟中甲醇還可以用乙醇、丙醇等溶劑代替。步驟五：氮氣保護下將1.3mol化合物7和1mol化合物8加入500ml甲醇中，加熱反應，反應畢，減壓濃縮至干。剩余物柱層析(乙酸乙酯/正己烷＝1/5-1/2)純化得化合物9。本步驟中甲醇還可以用乙醇、丙醇等溶劑代替。步驟六：將1mol化合物9加入氯仿中攪拌，然后加入2NHCl/二氧六環(huán)，攪拌反應半小時，三乙胺調節(jié)pH>7后過濾，用氯仿洗滌后烘干，得化合物Ⅰ。本步驟中氯仿還可以用二氯甲烷、1，2-二氯乙烷等溶劑代替。實施例1-1鹽酸鹽的制備方法-10.1mol化合物Ⅰ溶于氯仿中，然后加入2NHCl/1,4-二氧六環(huán)中，并將PH調節(jié)為低于5-6后，減壓濃縮，過濾，得到化合物Ⅰ的鹽酸鹽。本步驟中1,4-二氧六環(huán)還可以用甲乙醚、二甲醚、四氫呋喃、乙醚等溶劑代替。實施例1-1鹽酸鹽的制備方法-2將1mol化合物9加入二氯甲烷中溶解，然后加入2NHCl/1,4-二氧六環(huán)中，混合后調節(jié)PH值為5-6，攪拌反應0.5小時后過濾，濾餅用甲醇洗滌后烘干，得化合物I的鹽酸鹽。本步驟中1,4-二氧六環(huán)還可以用甲乙醚、二甲醚、四氫呋喃、乙醚等溶劑代替。本步驟中氯仿還可以用二氯甲烷、1，2-二氯乙烷等溶劑代替。實施例1-2至1-12化合物1-2至1-12的制備方法同實施例1-1的制備方法。實施例1-13的制備方法實施例1-13化合物Ⅰ的步驟一：氮氣保護下將化合物1(20g，0.235mol)加入干燥的100ml乙醚中攪拌溶解，然后降溫至0℃以下，向其中滴加正丁基鋰(0.24mol)，滴加過程中保持在0℃以下，滴加完成后保溫反應直至無化合物1。向反應液中滴加溴素(0.5mol)，滴加過程中保持在0℃以下，滴加完成后緩慢升至室溫，攪拌半小時后向其中加入鹽酸溶液(2N，500ml)淬滅反應。分層，水相用乙醚(200ml*3)萃取后棄去，合并有機相，連二亞硫酸鈉溶液洗滌(100ml*2)、無水硫酸鈉干燥、過濾后濃縮至干，得黃色油狀物化合物2。本步驟中乙醚還可以用甲乙醚、二甲醚、四氫呋喃、1，4-二氧六環(huán)等溶劑代替。步驟二：將1mol化合物2加入裝置中，冷至0℃以下。將提前配好的混酸(濃硫酸：發(fā)煙硝酸的體積比為55：36)緩慢滴加入反應瓶中，TLC顯示原料消失后冷至室溫，反應液傾入碎冰中，有黃色固體析出。過濾，濾餅用水洗滌至中性，干燥，得化合物3粗品。所得粗品柱層析(乙酸乙酯/正己烷＝1/20-1/10)純化后得白色固體化合物3。步驟三：氮氣保護下將1mol化合物4加入乙醚中，然后加入1.1molNaH室溫攪拌1小時。然后加入化合物3(0.8mmol)，反應至TLC顯示原料消失后，向反應液中加入乙酸乙酯和飽和食鹽水，分層后有機相用無水硫酸鈉干燥，過濾后減壓濃縮至干，剩余物柱層析(乙酸乙酯/正己烷＝1/10-1/5)純化得黃色固體化合物6。本步驟中乙醚還可以用甲乙醚、二甲醚、四氫呋喃、1，4-二氧六環(huán)等溶劑代替。步驟四：將1mol化合物6和60g5％Pd/C加入甲醇中，通氫氣進行硝基還原反應，反應至無原料點，反應畢過濾，濾液減壓濃縮得化合物7。本步驟中甲醇還可以用乙醇、丙醇等溶劑代替。步驟五：氮氣保護下將1.3mol化合物7和1mol化合物8加入500ml甲醇中，加熱反應，反應畢，減壓濃縮至干。剩余物柱層析(乙酸乙酯/正己烷＝1/7-1/3)純化得化合物Ⅰ。本步驟中甲醇還可以用乙醇、丙醇等溶劑代替。實施例1-14至1-22化合物1-14至1-22的制備方法同實施例1-13的制備方法實施例1-2至1-22的鹽的制備方法化合物1-2至1-22的鹽的制備方法同實施例1-1的鹽酸鹽制備方法-1或2的方法。上述鹽均通過元素分析進行驗證實施例1-1至1-22中的R見上表。微粒實施例1將化合物溶于乙醇，過濾后，濾液噴霧干燥，微粉化使之D90粒徑達到2μm。工藝條件為：進口溫度為105℃，出口溫度為68℃，氣流量90％，噴嘴出口內徑為0.1cm，噴嘴空氣流速800ml/min，進樣速度50mL/h?；衔餅閷嵤├?-1至1-22中化合物、實施例1-1至1-22的鹽中的一種。微粒實施例2將化合物溶于乙醇，過濾后，濾液噴霧干燥，微粉化使之D90粒徑達到4μm。工藝條件為：進口溫度為105℃，出口溫度為68℃，氣流量90％，噴嘴出口內徑為0.1cm，噴嘴空氣流速800ml/min，進樣速度50mL/h。化合物為實施例1-1至1-22中化合物、實施例1-1至1-22的鹽中的一種。微粒實施例3將化合物溶于乙醇，過濾后，濾液噴霧干燥，使之D90粒徑達到7μm。工藝條件為：進口溫度為105℃，出口溫度為68℃，氣流量90％，噴嘴出口內徑為0.1cm，噴嘴空氣流速800ml/min，進樣速度50mL/h?；衔餅閷嵤├?-1至1-22中化合物、實施例1-1至1-22的鹽中的一種。微粒實施例4取化合物用流能磨微粉化至D90粒徑10μm?；衔餅閷嵤├?-1至1-22中化合物、實施例1-1至1-22的鹽中的一種。氣霧劑的配制，所用乙醇為無水乙醇，所用活性成分為微粉化至D90粒徑為0.5-20μm。采用不同規(guī)格的劑量閥門系統(tǒng)使得制得的氣霧劑能夠達到所需的每撳劑量。1,1,1,2－四氟乙烷的縮寫為HFA134a。1,1,1.2,3,3,3－七氟丙烷的縮寫為HFA227。制劑實施例1-1至1-44處方：活性成分活性成分：1g輔料：代碼F1f2F3F4F5附加劑甘油丙二醇聚乙二醇乙醇油酸代碼P1P2拋射劑HFA227HFA134a制備方法：制備工藝：將處方量的活性成分加入乙醇，攪拌均勻，分劑量灌裝，封接劑量閥門系統(tǒng)，分別再加壓注入拋射劑，即得。劑量每撳活性成分100μg。藥理實施例1：體外實驗采用生長因子誘導的雞胚絨毛尿囊膜(CAM)血管增生模型觀察式I化合物對血管增生的影響，了解式I化合物對血管生成的作用。實驗材料：受精3日齡雞胚玻璃纖維濾紙血管內皮細胞生長因子(VEGF)Chem1con公司產品將實施例1-13所制成的化合物先用DMSO溶解，再用PBS稀釋至所需要的濃度(DMSO濃度<0.1％)實驗方法1.CAM模型的建立：75％乙醇清洗雞胚卵殼于超凈臺中吹干，水平放置5min后，在100mm培養(yǎng)皿邊緣小心將卵殼敲碎，卵內容物置于培養(yǎng)皿中(培養(yǎng)皿中預先加有10mlDMEM培養(yǎng)基)。將此培養(yǎng)皿放入150mm大培養(yǎng)皿中(大培養(yǎng)皿中加少許水)，蓋上皿蓋，置于37℃、5％CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。2.對CAM血管增生的影響用打孔機將玻璃纖維濾紙制成直徑3mm的小圓片，濕熱滅菌,將試劑各10μl滴于玻璃纖維濾紙上，制成藥膜，吹干備用。雞胚培養(yǎng)3d后，隨機分組，每組10個，將給藥組(1g/L)同時給予生長因子(2μg/L)，以及生長因子(VEGF，2μg/L)單獨刺激組(陽性對照組)和PBS(磷酸鹽緩沖液，pH7.4)刺激組(陰性對照組)。將藥膜貼于CAM和卵黃囊膜(yolksacmembrane，YSM)外2/3處血管較少的部位。加藥48h后，顯微鏡下觀察，計數(shù)藥膜周圍5mm內大、中、小血管數(shù)。表1對CAM血管增生的影響表(n＝10)注：統(tǒng)計學方法數(shù)據以表示.組間比較應用t檢驗3.結果1式I化合物對VEGF誘導的CAM血管增生的影響結果見表1，PBS組血管生長良好.VEGF組小血管增生明顯，式I化合物的各組血管增生明顯受到抑制.小血管顯著減少，基本回到正常水平。CAM是經典的血管生成評價模型，具有方法簡便、易觀察、價廉等優(yōu)點.是目前最常用的在體模型。VEGF是重要的促血管生成因子，能刺激內皮細胞的增生和遷移，促進血管生成，且在多種腫瘤組織中發(fā)現(xiàn)過度表達。本研究表明：式I化合物抑制VEGF誘導的CAM血管增生，表明式I化合物具有抑制VEGF的促血管生成作用。式I化合物對血管生成有抑制作用，進一步證實了具有抑制腫瘤血管生成的潛力。尤其是通過實驗數(shù)據證明，化合物中含有氮雜環(huán)的化合物與含氧或硫雜環(huán)的化合物相比，抑制VEGF的促血管生成作用相對較低。藥理實施例2：體內抗肺癌實驗1.實驗動物及瘤株實驗選用中國大耳白兔，體重2.5±0.1Kg，分組，每組2只。2.肺癌模型制備方法根據文獻《兔VX2肺癌模型的建立及MR觀察》(包頭醫(yī)學院學報，2013年第29卷第2期，7-9頁)中的方法制備兔VX2肺癌模型。3.治療及分組：按下列表格給與藥物活性成分按照實施例1的處方和制備方法制備吸入制劑，試驗分組情況表注：實施例試驗組中給藥量按活性成分計。3.3統(tǒng)計方法：運用SPSS統(tǒng)計軟件，采用q檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。4.給藥方式每天在5升左右的玻璃罩中進行給藥，實驗組是將的藥物裝入吸入裝置中按照吸入途徑同時給予藥物，對照組不給藥。5.模型動物生存情況平均生存情況比較結果表2吸入制劑對肺癌的抑制作用組別平均生存天數(shù)組別平均生存天數(shù)對照組27.72250.6DDP組562342.5133.92441.3235.82538.5338.02637.8437.22743.7540.42837.2642.22938.3742.03039.08443141.1943.03243.71041.13340.31130.83437.71231.23537.11342.63635.61444.23751.51545.13848.01646.73948.11743.64048.61840.14147.71948.24251.12042.74346.82149.64445.55結論通過體內實驗結果表明，式I化合物及其生理上的鹽能夠顯著提高試驗肺癌動物的生存時間，但提高時間的存在明顯的差別，尤其是通過實驗數(shù)據證明，化合物中含有氮雜環(huán)的化合物與含氧或硫雜環(huán)的化合物相比，抑制腫瘤生長作用相對較低。藥理實施例3哮喘藥理實驗1、動物模型選取健康雄性Wistar大鼠(對檢查出存在細菌、細菌感染的大鼠不予選用)，體重為200±10g，放入5升左右的玻璃罩中，以400mmHg的壓力噴入3％氯化乙酞膽堿和0.1％磷酸組織胺容積混合液15秒鐘。噴霧停止后，觀察大鼠的引喘潛伏期(即發(fā)生哮喘、呼吸極度困難，直至抽搐跌倒的時間)，引喘潛期小于70秒或大于120秒的大鼠不予選用。2、實驗方法取經測定引喘潛伏期合格的大鼠，按照下表中的組別進行隨機分組，每組10只，每天在5升左右的玻璃罩中進行給藥，實驗組是將實施例1-1至1-44中的藥物裝入吸入裝置中按照吸入途徑同時給予藥物，模型組1不給藥，給藥的第10天當給予全部藥物后1.5小時后噴霧給予0.3％二鹽酸組織胺，觀察給藥物前后引喘潛伏期及抽搐發(fā)生率的變化(引喘時動物6分鐘內不出現(xiàn)跌倒者以引喘伏期為360秒計算)。本藥理實施例中實驗組號與活性成分對照方式與藥理實施例2相同。3、實驗過程及結果：動物發(fā)生哮喘、直至抽搐跌倒的時間見下表。表1-1對照實施例實驗結果(n＝10，mean±SD)通過藥理實施例3體內實驗結果表明，式I化合物能夠提高動物引喘潛伏期時間，實施例組的引喘潛伏期和模型組的引喘潛伏期相比，兩者差距明顯，所以說明式I化合物通過抑制新生血管生成，具有治療哮喘、慢性阻塞性肺炎等呼吸道炎癥疾病的作用。尤其是通過實驗數(shù)據證明，式I化合物及其生理上的鹽中含有氮雜環(huán)的化合物與含氧或硫雜環(huán)的化合物相比，提高動物引喘潛伏期時間相對較高，療效明顯好。通過藥理實施例1、2、3中的數(shù)據可以證明，式I化合物及其生理上的鹽對血管新生和VEGF具有抑制作用，可以治療或預防與此有關的疾病，能夠抑制腫瘤的生長與增殖，提高引喘潛伏期等。當前第1頁1 2 3