本發(fā)明主要涉及制藥
技術領域：
，具體涉及一種雜質少的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無菌粉末及其制備方法。
背景技術：
：奧拉西坦(s-oxiracetam)是一種合成的羥基氨基丁酸(babob)環(huán)狀衍生物，僅用于中樞神經系統(tǒng)，主要分布在大腦皮層、海馬，有激活、保護或促進神經細胞的功能恢復，改善智能障礙患者的記憶學習功能，而藥物本身沒有直接的血管活性，也沒有中樞興奮作用，對學習記憶能力的影響是一種持久的促進作用。該藥于1987年在意大利上市，上市的劑型為片劑，800mg；膠囊，800mg；注射液，1g/5ml。目前國內只有奧拉西坦膠囊和注射液上市，且所用主要活性成分均為外消旋體。葉雷等在公開號為cn103735545a專利中提到左旋奧拉西坦對酒精中毒所致昏迷的促醒作用明顯，而右旋奧拉西坦基本沒有作用，左旋奧拉西坦的上述促醒效果為消旋奧拉西坦的2倍；左旋奧拉西坦對外傷、麻醉所致昏迷的促醒作用均顯著。張峰等在公開號為cn103599101a的專利中披露左旋奧拉西坦對液壓及自由落體所致創(chuàng)傷性腦損傷大鼠學習記憶認知功能障礙均有明顯的改善作用，其藥效遠高于右旋奧拉西坦。且200mg/kg左旋奧拉西坦與400mg/kg奧拉西坦的作用相當。藥代動力學研究結果顯示：左旋奧拉西坦和右旋奧拉西坦在比格犬體內無明顯手性轉化。比格犬單次靜脈注射給予左旋和2倍劑量的消旋奧拉西坦后血漿中左旋奧拉西坦的主要藥動學參數均無明顯差異。安全藥理、急毒、長毒等試驗結果表明，在同等劑量水平下，左旋奧拉西坦與奧拉西坦對受試動物或細胞的毒性無明顯差異。上述臨床前的研究結果表明，左旋奧拉西坦是奧拉西坦體內發(fā)揮藥效的主要活性成分，單獨使用本品可降低臨床使用劑量，降低潛在的毒副反應?，F有(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無菌粉末其主要存在無固定形狀、不易形成骨架、易出現干縮和鼓泡現象，產品均一性不好，上下層性狀不一致，澄清度不合格，穩(wěn)定性差，貨架期短，注射過程疼痛明顯，患者順應性差等問題。技術實現要素：本發(fā)明的目的在于提供一種具有固定形態(tài)、穩(wěn)定性好、雜質少的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無菌粉末。本發(fā)明的另一目的在于提供上述(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無菌粉末的制備方 法。本發(fā)明的目的是通過如下技術措施實現的：一種雜質少的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無菌粉末，其特征在于，它是以(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺為原料，再加入一定量的附加劑制得；其中所述附加劑為蔗糖、海藻糖、甘露醇、乳糖、葡萄糖、麥芽糖、葡聚糖、白蛋白、聚乙二醇、甘油、l-絲氨酸、谷氨酸鈉、丙氨酸、甘氨酸、肌氨酸、磷酸鹽、醋酸鹽、檸檬酸鹽、吐溫80、苯甲醇中的一種或多種。發(fā)明人在研究過程中通過大量實驗發(fā)現特定的附加劑種類以及特定的原輔料用量配比關系，配合特定的制備工藝，可使得上述(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無菌粉末具有固定形狀、易形成骨架，產品不易出現干縮和鼓泡現象，產品澄清度提高，貨架期延長，并且可以使產品在使用過程中患者疼痛感下降，患者順應性好；一種雜質少的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無菌粉末，其特征在于，它是以(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺、l-絲氨酸、甘露醇、聚乙二醇、吐溫80、苯甲醇為原輔料，按照濃配、稀配、冷凍干燥、軋蓋步驟制得；其中所述原輔料用量為重量百分比的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺51％～59％，l-絲氨酸11％～19％，甘露醇20％～28％、聚乙二醇20003％～9％，吐溫801％～2％，苯甲醇1％～3％；所述濃配步驟為將上述原輔料置于容器中，加入(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺10倍重量份的滅菌注射用水攪拌，溶解后，加入質量分數0.5％的針用活性炭，攪拌30min，隨后用0.45微米微孔濾膜濾過，收集濾液；所述稀配步驟為向濾液中加入滅菌注射用水至濾液體積的1000倍，用鹽酸或氫氧化鈉調節(jié)ph至5.5，隨后用0.22微米的微孔濾膜除菌過濾，取濾液合格后灌裝分裝于無菌玻璃瓶中；冷凍干燥步驟為快速將導熱油溫度冷凍至-40℃，保持恒溫60分鐘，以5℃/小時升溫至-10℃，保持恒溫80分鐘，在快速冷卻至-40℃，恒溫冷凍120分鐘；然后抽真空干燥，以10℃/小時升溫至，-10℃恒溫150分鐘；以4℃/小時升溫至0℃，0℃恒溫300分鐘；以5℃/小時升溫至10℃，10℃恒溫240分鐘，以10℃/小時升溫至30℃，30℃恒溫60分鐘，同時前箱真空降達到10pa/10分時，凍干結束。最優(yōu)選的上述(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無菌粉末，其特征在于，它是由下列重量百分比的原輔料制得：(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺53％～57％，l-絲氨酸13％～17％，甘露醇22％～26％、聚乙二醇20004％～7％，吐溫801％～2％，苯甲醇1％～2％；將上述原輔料置于容器中，加入(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺10倍重量份的滅菌注射用水攪拌，溶解后，加入質量分數0.5％的針用活性炭，攪拌30min，隨后用0.45微米微孔濾膜濾過，收集濾液，向濾液中加入滅菌注射用水至濾液體積的1000倍，用鹽酸或氫氧化鈉調節(jié)ph至5.5， 隨后用0.22微米的微孔濾膜除菌過濾，取濾液合格后灌裝分裝于無菌玻璃瓶中；快速將導熱油溫度冷凍至-40℃，保持恒溫60分鐘，以5℃/小時升溫至-10℃，保持恒溫80分鐘，在快速冷卻至-40℃，恒溫冷凍120分鐘；然后抽真空干燥，以10℃/小時升溫至，-10℃恒溫150分鐘；以4℃/小時升溫至0℃，0℃恒溫300分鐘；以5℃/小時升溫至10℃，10℃恒溫240分鐘，以10℃/小時升溫至30℃，30℃恒溫60分鐘，同時前箱真空降達到10pa/10分時，凍干結束。特定的處方配比，配合特定的ph以及特定的原輔料處理步驟，使得本品質量進一步提高。一種雜質少的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無菌粉末的制備方法有講究，其特征在于，它是按如下步驟制得的：1.濃配：將處方量的原輔料置于容器中，加入(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺10倍重量份的滅菌注射用水攪拌，溶解后，加入質量分數0.5％的針用活性炭，攪拌30min，隨后用0.45微米微孔濾膜濾過，收集濾液，備用；2.稀配：向濾液中加入滅菌注射用水至濾液體積的1000倍，用鹽酸或氫氧化鈉調節(jié)ph至5.5，隨后用0.22微米的微孔濾膜除菌過濾，取濾液合格后灌裝分裝于無菌玻璃瓶中，備用；3.冷凍干燥：快速將導熱油溫度冷凍至-40℃，保持恒溫60分鐘，以5℃/小時升溫至-10℃，保持恒溫80分鐘，在快速冷卻至-40℃，恒溫冷凍120分鐘；然后抽真空干燥，以10℃/小時升溫至，-10℃恒溫150分鐘；以4℃/小時升溫至0℃，0℃恒溫300分鐘；以5℃/小時升溫至10℃，10℃恒溫240分鐘，以10℃/小時升溫至30℃，30℃恒溫60分鐘，同時前箱真空降達到10pa/10分時，凍干結束；4.軋蓋：鋁塑組合蓋需經清洗后滅菌、干燥，然后進行軋蓋，即得。本發(fā)明具有如下的有益效果：本發(fā)明一種雜質少的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無菌粉末具有固定形狀、在凍干制備過程中無干縮和鼓泡的現象，產品均一性好，上下層性狀一致，雜質少，其總雜質低于0.28％，產品澄清度好，低于0.5號標準濁度液，穩(wěn)定性好，貨架期長達24月，注射過程中患者疼痛感較輕，患者順應性好。具體實施方式下面通過實施例對本發(fā)明進行具體的描述，有必要在此指出的是以下實施例只用于對本發(fā)明進行進一步說明，不能理解為對本發(fā)明保護范圍的限制，在不背離本發(fā)明精神和實質的 情況下，對本發(fā)明方法、步驟或條件所作的修改或替換，均屬于本發(fā)明的范圍。實施例1一種雜質少的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無菌粉末，按以下步驟制得：成分用量(重量百分比％)(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺53％l-絲氨酸15％甘露醇23％聚乙二醇20006％吐溫801％苯甲醇2％制成1000瓶制劑工藝：1.濃配：將處方量的原輔料置于容器中，加入(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺10倍重量份的滅菌注射用水攪拌，溶解后，加入質量分數0.5％的針用活性炭，攪拌30min，隨后用0.45微米微孔濾膜濾過，收集濾液，備用；2.稀配：向濾液中加入滅菌注射用水至濾液體積的1000倍，用鹽酸或氫氧化鈉調節(jié)ph至5.5，隨后用0.22微米的微孔濾膜除菌過濾，取濾液合格后灌裝分裝于無菌玻璃瓶中，備用；3.冷凍干燥：快速將導熱油溫度冷凍至-40℃，保持恒溫60分鐘，以5℃/小時升溫至-10℃，保持恒溫80分鐘，在快速冷卻至-40℃，恒溫冷凍120分鐘；然后抽真空干燥，以10℃/小時升溫至，-10℃恒溫150分鐘；以4℃/小時升溫至0℃，0℃恒溫300分鐘；以5℃/小時升溫至10℃，10℃恒溫240分鐘，以10℃/小時升溫至30℃，30℃恒溫60分鐘，同時前箱真空降達到10pa/10分時，凍干結束；4.軋蓋：鋁塑組合蓋需經清洗后滅菌、干燥，然后進行軋蓋，即得。為了更好的理解本發(fā)明，以下通過本發(fā)明穩(wěn)定性試驗來進一步闡述發(fā)明藥物的有益效果，而非對本發(fā)明的限制。實驗一：本發(fā)明一種雜質少的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無菌粉末穩(wěn)定性實驗實驗材料：注射用的奧拉西坦無菌粉末樣品：為實施例1制得加速實驗方法：將實施例1制得的注射用的奧拉西坦無菌粉末按上市包裝，置加速實驗箱中，一定時間取樣，對考察項目進行檢驗。加速實驗溫度：40±2℃濕度：rh75％±5％考察時間：0、1、2、3、6月考察指標：性狀、可見異物、澄清度、ph、有關物質、含量、無菌檢查加速試驗穩(wěn)定性記錄：加速實驗結果表明：加速6月樣品與0月樣品各項檢測指標質量相當，表明本品加速實驗6月，質量保持穩(wěn)定，本品穩(wěn)定性較好。長期實驗方法：將實施例1制得的注射用奧拉西坦無菌粉末按上市包裝，置長期留樣箱中，一定時間取樣，對考察項目進行檢驗。加速實驗溫度：25±2℃濕度：rh60％±10％考察時間：0、3、6、9、12、18、24月考察指標：性狀、可見異物、澄清度、ph、有關物質、含量、無菌檢查長期試驗穩(wěn)定性記錄：長期試驗表明：本品長期試驗24個月性狀、可見異物、澄清度、ph值、有關物質、含量以及無菌檢查各項指標均無顯著變化，均符合生產用質量標準草案的各項相關規(guī)定。本品長期試驗24個月質量穩(wěn)定，故本品貨架期最少24個月，長期試驗仍在繼續(xù)考察過程中。實驗二：小鼠扭體法觀察注射過程中的疼痛感試驗試驗樣品：按實施例1制得的一種雜質少的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無菌粉末作為供試品，未加苯甲醇的處方按實施例1制得的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺凍干粉針作為對照樣品；目的：比較兩種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無菌粉末注射過程中的疼痛程度方法：取實驗用小白鼠，皮下注射(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無菌粉末(生理鹽水溶解稀釋至10ml)，觀察小白鼠是否會發(fā)生扭體反應，根據小鼠發(fā)生扭體反應的幾率來判斷注射過程中疼痛感的強弱，供試品與對照樣品各重復30次試驗；試驗結果：試驗結果見下表：產品名稱實驗樣本(小鼠)發(fā)生扭體反應個體數扭體反應發(fā)生率％供試品30只5只16.7％對照樣品30只27只90.0％結論：由上表可知，本發(fā)明一種注射用(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無菌粉末注射過程中疼痛感明顯弱于對照樣品。實施例2一種雜質少的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無菌粉末，按以下步驟制得：成分用量(重量百分比％)(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺57％l-絲氨酸13％甘露醇23％聚乙二醇20005％吐溫801％苯甲醇1％制成1000瓶制劑工藝：照實施例1的制備工藝制得。按實施例1的試驗方法，實施例2樣品穩(wěn)定性試驗結果表明加速6月樣品質量穩(wěn)定，長期24個月質量穩(wěn)定，故本品有效期最少24個月。小鼠扭體法觀察注射過程中的疼痛感試驗結果表明，實施例2樣品注射過程中疼痛感明顯弱于對照樣品。實施例3一種雜質少的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無菌粉末，按以下步驟制得：成分用量(重量百分比％)(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺54％l-絲氨酸15％甘露醇24％聚乙二醇20005％吐溫801％苯甲醇1％制成1000瓶制劑工藝：照實施例1的制備工藝制得。按實施例1的試驗方法，實施例3樣品穩(wěn)定性試驗結果表明加速6月樣品質量穩(wěn)定，長期24個月質量穩(wěn)定，故本品有效期最少24個月。小鼠扭體法觀察注射過程中的疼痛感試驗結果表明，實施例3樣品注射過程中疼痛感明顯弱于對照樣品。實施例4-6：一種雜質少的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺無菌粉末，按以下重量的原輔料制備而得，制備方法同實施例1：按實施例1的試驗方法，實施例4、5、6樣品穩(wěn)定性試驗結果表明加速6月樣品質量穩(wěn)定，長期24個月質量穩(wěn)定，故本品有效期最少24個月。小鼠扭體法觀察注射過程中的疼痛感試驗結果表明，實施例4、5、6樣品注射過程中疼痛感明顯弱于對照樣品。當前第1頁12