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一種同時(shí)處理多種生物組織的方法與流程

文檔序號(hào):12325284閱讀:來源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種同時(shí)處理生物組織的方法,其特征在于,所述方法包括以下步驟:

(a)預(yù)處理:將生物組織清洗后剝離無用組織,并進(jìn)行消毒,獲得預(yù)處理的目標(biāo)組織;

(b)脫脂:采用脫氧膽酸鈉或異丙醇浸泡所述預(yù)處理的目標(biāo)組織,獲得脫脂的目標(biāo)組織;

(c)脫細(xì)胞:通過高壓物理方法處理脫脂的目標(biāo)組織以破碎細(xì)胞,再通過DNA酶浸泡及α-Gal酶溶液浸泡去除所有細(xì)胞碎片及抗原得到脫細(xì)胞的目標(biāo)組織;

(d)交聯(lián):采用物理交聯(lián)方法或化學(xué)交聯(lián)方法對(duì)所述脫細(xì)胞的目標(biāo)組織進(jìn)行交聯(lián)。

(e)滅菌:采用輻照或環(huán)氧乙烷對(duì)經(jīng)步驟(d)交聯(lián)的目標(biāo)組織進(jìn)行滅菌。

2.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述生物組織指動(dòng)物源或同種異體組織,包括豬小腸、豬皮、牛皮、牛心包、豬心包、同種異體皮、牛心臟瓣膜、豬心臟瓣膜等任意兩種或兩種以上生物組織。

3.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟a)中,所述消毒為用75%乙醇或2%過氧化氫室溫下消毒0.5-2h。

4.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟b)中,所述浸泡為將所述預(yù)處理的目標(biāo)組織置于1-3%脫氧膽酸鈉或異丙醇中室溫下浸泡12-48h。

5.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述高壓物理方法是指將所述脫脂的目標(biāo)組織置于超高壓設(shè)備中,在1-10MPa、4-40℃條件下處理1-60min。

6.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述DNA酶浸泡為室溫下采用1-50U/mL的DNA酶溶液振蕩浸泡4-24h。

7.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述α-Gal酶溶液浸泡為室溫下采用1-50U/L的α-Gal酶溶液振蕩浸泡4-24h。

8.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述物理交聯(lián)方法是指將所述脫細(xì)胞的目標(biāo)組織進(jìn)行冷凍干燥,使其含水率低于10%,再置于真空干燥箱中,在80-130℃條件下,真空熱處理24-120h,然后包裝送滅菌。

9.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述化學(xué)交聯(lián)方法為將所述脫細(xì)胞的目標(biāo)組織浸泡于0.01-0.5mol/L的EDC溶液中,在室溫下交聯(lián)12-48h,再用純化水清洗3-8次,最后包裝送滅菌。

10.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述輻照采用的輻照源為伽馬射線或電子束,滅菌劑量為15-30kGy;和/或

采用環(huán)氧乙烷滅菌的參數(shù)為35-55℃下,滅菌4-20h,環(huán)氧乙烷濃度500-900mg/L。

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