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一種脂肪填充物及其制備方法與流程

文檔序號(hào):12211387閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種脂肪填充物,其特征在于,包括以下組分:細(xì)胞支架、細(xì)胞成分、生長(zhǎng)因子和抗疤痕因子,其用量比例為109-115:15-30:4:0.5。

2.如權(quán)利要求1所述的脂肪填充物,其特征在于,所述細(xì)胞成分為洗滌脂肪、可注射水凝膠、玻尿酸、纖連蛋白或?qū)诱尺B蛋白中的一個(gè)或組合。

3.如權(quán)利要求1所述的脂肪填充物,其特征在于,所述細(xì)胞成分為自體或異體的脂肪干細(xì)胞、SVF組分、臍帶干細(xì)胞、臍血干細(xì)胞、胎盤(pán)干細(xì)胞和骨髓干細(xì)胞中的一個(gè)或組合。

4.如權(quán)利要求1所述的脂肪填充物,其特征在于,所述生長(zhǎng)因子為VEGF、HGF、EGF、TGF-α、PRP、肝素、前列腺素E1或前列腺素E2中的一個(gè)或組合。

5.如權(quán)利要求1所述的脂肪填充物,其特征在于,所述抗疤痕因子為CD的抑制劑、CD的阻斷劑或CD的單克隆抗體中的一個(gè)或組合。

6.如權(quán)利要求1所述的脂肪填充物,其特征在于,所述細(xì)胞支架為洗滌脂肪和可注射水凝膠;所述細(xì)胞成分為臍帶干細(xì)胞、脂肪干細(xì)胞及SVF組分;所述生長(zhǎng)因子為VEGF、HGF和富含血小板的血漿(PRP);所述抗疤痕因子為CD26單克隆抗體。

7.如權(quán)利要求1-6所述的脂肪填充物的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:

步驟1、細(xì)胞成分的提取、培養(yǎng)和制備;

步驟2、將細(xì)胞支架和步驟1制備的細(xì)胞成分充分混合,再加入生長(zhǎng)因子和抗疤痕因子,混合均勻,即得脂肪填充物。

8.如權(quán)利要求7所述的脂肪填充物的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:

步驟1、初次提取SVF組分;

步驟2、對(duì)SVF組分中的脂肪干細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)、冷凍保存;

步驟3、臍帶干細(xì)胞的制備、培養(yǎng)和冷凍保存;

步驟4、采集脂肪,提取SVF和制備洗滌脂肪,備用;

步驟5、復(fù)蘇步驟2中的脂肪干細(xì)胞和步驟3中的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞備用;

步驟6、提取PRP;

步驟7、將洗滌脂肪100ml、可注射水凝膠9-15ml、SVF5-10ml、脂肪干細(xì)胞5-10ml和臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞5-10ml,充分混合,再加入VEGF0.5ml、HGF0.5ml、PRP3ml和CD26單克隆抗體0.5ml,混合均勻,即得脂肪填充物。

9.如權(quán)利要求8所述的脂肪填充物的制備方法,其特征在于,所述低氧培養(yǎng)的條件為氮?dú)?0%、二氧化碳5%、氮?dú)?5%;所述步驟2和步驟3的干細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)使用無(wú)血清培養(yǎng)體系,并添加5%的無(wú)血清添加劑;所述步驟4中提取SVF在提取時(shí)使用注射用水對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行裂解。

10.如權(quán)利要求1所述的脂肪填充物的制備方法,其特征在于,所述步驟7洗滌脂肪、可注射水凝膠、SVF、脂肪干細(xì)胞和臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的優(yōu)選體積比例為10:1:1:1;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞和脂肪干細(xì)胞的數(shù)量為1:1,數(shù)量為1×106-1×107/ml,優(yōu)選1×106/ml;SVF的細(xì)胞數(shù)量為1×105-106/ml,優(yōu)選1×105/ml;所述PRP的加入量為109-1010/ml,優(yōu)選109/ml;所述VEGF和HGF加入的量分別為1000-10000pg/ml,優(yōu)選1000pg/ml。

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