發(fā)明涉及一種白藜蘆醇的制劑技術(shù)，具體涉及一種負(fù)載活性成分白藜蘆醇的w/o/w乳液及其制備方法，特別涉及一種以白藜蘆醇為活性成分的微米級(jí)的w/o/w乳液的制備方法，屬于食品藥品和化妝品制備技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

白藜蘆醇(resveratrol，簡(jiǎn)稱res)，化學(xué)名3,4',5-三羥基-二苯乙烯，屬于含有芪類結(jié)構(gòu)的非黃酮類多酚化合物，廣泛存在于水果、中藥、葡萄酒等天然植物中，具有多種生理功效。白藜蘆醇的主要作用有：1、白藜蘆醇的非特異性抗炎作用：主要通過(guò)抑制核因子-κb活性來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)腸道的抗炎作用。2、白藜蘆醇的抑制腸道纖維化作用：通過(guò)抑制腸成纖維細(xì)胞中的igf-ⅰ受體活性來(lái)抑制膠原ⅰ合成，且中斷sirt1的表達(dá)并不影響白藜蘆醇的抗纖維化作用，提示白藜蘆醇可通過(guò)激活sirt1或抑制igf-ⅰ受體兩條通路來(lái)抑制細(xì)胞纖維化。3、白藜蘆醇的抗氧化作用：通過(guò)清除活性氧簇而發(fā)揮抗氧化作用，緩解各器官缺血再灌注導(dǎo)致的氧化應(yīng)激。4、白藜蘆醇的抑制腸道細(xì)胞凋亡作用：通過(guò)抑制上皮細(xì)胞凋亡的方式維護(hù)腸道屏障的完整，減輕腸道損傷，防止細(xì)菌和內(nèi)毒素移位。5、白藜蘆醇的心血管保護(hù)作用：通過(guò)抑制血小板功能和內(nèi)皮細(xì)胞tf的表達(dá)，減少血栓的形成。6、白藜蘆醇的神經(jīng)系統(tǒng)保護(hù)作用：白藜蘆醇可以標(biāo)識(shí)激酶和神經(jīng)細(xì)胞，通過(guò)葡萄酒攝入白藜蘆醇，對(duì)于老年人的退化病，如帕金森癥、癡呆癥、風(fēng)濕性疾病都有較好的預(yù)防和治療作用。7、白藜蘆醇的保肝作用：降低血清和肝臟的脂質(zhì)，減少脂質(zhì)過(guò)氧化物在體內(nèi)的堆積，保護(hù)肝臟不受損害。8、白藜蘆醇的調(diào)節(jié)免疫作用：白藜蘆醇可極大地減少肝癌、肝移植術(shù)后排斥反應(yīng)的發(fā)生。

白藜蘆醇是一種難溶于水的化合物，其見(jiàn)光易分解的特性限制了其在食品、藥品和化妝品行業(yè)的發(fā)展?，F(xiàn)有技術(shù)使得白藜蘆醇乳液體系不穩(wěn)定并且包封率較低，應(yīng)用效果不明顯。w/o/w乳液是分散相液滴中又包含另外一種更小液滴的復(fù)雜乳液體系，從內(nèi)到外依次具有內(nèi)水相、內(nèi)-水油界面膜、油相、外-油水界面膜、外水相等，屬于多相體系。與單層乳液相比可以延長(zhǎng)被乳化組分的釋放時(shí)間，起到隔離、保護(hù)、緩釋、控釋和靶向釋放的作用，可以廣泛的應(yīng)用于食品、醫(yī)藥和化妝品等行業(yè)。但是，w/o/w乳液體系穩(wěn)定性差，制備工藝復(fù)雜，限制了其在生產(chǎn)上的廣泛應(yīng)用?，F(xiàn)有技術(shù)中還沒(méi)有白藜蘆醇w/o/w乳液的相關(guān)研究報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明目的在于提供一種負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液，解決了現(xiàn)有技術(shù)中白藜蘆醇穩(wěn)定性差、負(fù)載量低和生物利用率低的問(wèn)題。

本發(fā)明技術(shù)方案如下：

一種負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液，其包括以下質(zhì)量百分含量的組分：

優(yōu)選地，所述負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液包括以下質(zhì)量百分含量的組分：

進(jìn)一步優(yōu)選地，所述負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液包括以下質(zhì)量百分含量的組分：

具體地，所述負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液包括以下質(zhì)量百分含量的組分：

優(yōu)選地，所述負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液中在油相和內(nèi)水相中均負(fù)載有白藜蘆醇。

優(yōu)選地，所述親脂性乳化劑選自單硬脂酸甘油酯、卵磷脂、span80、聚甘油蓖麻醇酯(pgpr)等中的一種或幾種。

優(yōu)選地，所述脂質(zhì)材料選自中鏈甘油三酯(mct)、花生油、亞麻籽油、橙皮油、橄欖油等中的一種或幾種。

優(yōu)選地，所述親水性乳化劑選自tween80(吐溫80)、變性淀粉、花生分離蛋白、果膠、殼聚糖、乳清分離蛋白等中的一種或幾種。

優(yōu)選地，所述負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液中內(nèi)水相與油相的質(zhì)量比為(10:90)：(50:50)，例如10:90，20:80，30:70，40:60，50:50，進(jìn)一步優(yōu)選為20:80。

本發(fā)明優(yōu)選采用去離子水。

本發(fā)明另一目的在于提供一種負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液的制備方法，包括以下步驟：

(1)將親脂性乳化劑加入到脂質(zhì)材料中得到油相，將白藜蘆醇分別加入到油相和內(nèi)水相中，將內(nèi)水相和油相混合，高速剪切(例如轉(zhuǎn)速控制在25000r/min，剪切3min)，之后通過(guò)高壓均質(zhì)法制備w/o初乳；

(2)將親水性乳化劑加入到外水相中，在室溫下將步驟(1)得到的w/o初乳加入到外水相中，且邊加入邊高速剪切均勻(轉(zhuǎn)速控制在10000r/min，剪切2min)，最后將該混合物通過(guò)高壓均質(zhì)法制備w/o/w乳液。

優(yōu)選地，所述方法中制備油相的方法包括稱量質(zhì)量比為1:10的乳化劑和脂質(zhì)材料，將乳化劑和脂質(zhì)材料混合均勻后得到油相的步驟。

優(yōu)選地，所述方法中制備含有親水性乳化劑的外水相的方法包括稱量質(zhì)量比為1:20的親水性乳化劑和水，將親水性乳化劑和水進(jìn)行均勻混合，得到含有親水性乳化劑的外水相步驟。

優(yōu)選地，所述方法中高壓均質(zhì)法包括以下步驟：

a、將含有白藜蘆醇的水溶液加入到含有白藜蘆醇的油相中，轉(zhuǎn)速控制在25000r/min下進(jìn)行高速剪切均勻3min得到均勻的混合物，將該混合物放入高壓均質(zhì)機(jī)中循環(huán)4次，壓力在30mpa-60mpa，得到w/o的初乳。

b、將步驟a得到的乳液放入高壓均質(zhì)機(jī)中循環(huán)3次，壓力在5mpa-10mpa，得到w/o/w乳液。

具體地，本發(fā)明所述的負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液的制備方法包括以下步驟：

(1)分別稱量親脂性乳化劑和脂質(zhì)材料，兩者的質(zhì)量比為1:10，將兩者混合均勻得到油相；

(2)分別稱量白藜蘆醇和油相，兩者的質(zhì)量比為3×10^-5:1，將兩者混合均勻；

(3)稱量白藜蘆醇，白藜蘆醇和內(nèi)水相的質(zhì)量比為1×10^-5:1；

(4)分別稱量外水相和親水性乳化劑，兩者的質(zhì)量比為20:1，將兩者混合均勻；

(5)將步驟(3)中白藜蘆醇的水溶液加入到步驟(2)中的含有白藜蘆醇的油相中，高速剪切均勻，轉(zhuǎn)速為25000r/min，時(shí)間3min，將剪切后的乳液加入到高壓均質(zhì)機(jī)中均質(zhì)4次，均質(zhì)壓力30mpa，得到w/o初乳；

(6)將步驟(5)得到的初乳加入到步驟(4)中，高速剪切均勻，轉(zhuǎn)速為10000r/min，時(shí)間為2min，將剪切后的乳液加入到高壓均質(zhì)機(jī)中均質(zhì)3次，均質(zhì)壓力10mpa。

更為詳盡地，上述負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液的制備方法，包括以下步驟：

(1)稱取適量白藜蘆醇，加入到適量去離子水中，溶解得到白藜蘆醇水溶液；

(2)按配方稱取余量的白藜蘆醇、親脂性乳化劑、脂質(zhì)材料，混合均勻，得到油相；

(3)將步驟(1)得到的白藜蘆醇水溶液加入到步驟(2)得到的油相中，用高速剪切機(jī)剪切(例如25000r/min，時(shí)間為3min)，得到均勻的乳液；然后再將該乳液加入到高壓均質(zhì)機(jī)中均質(zhì)(例如30mpa，4個(gè)循環(huán))，制得初乳(w/o型)；

(4)按配方稱取親水性乳化劑，加入到適量去離子水中，得到外水相；

(5)將步驟(3)制備得到的初乳(w/o型)加入到所述外水相中，用高速分散機(jī)分散(例如轉(zhuǎn)速為10000r/min，時(shí)間為2min)；然后將得到的混合物加入到高壓均質(zhì)機(jī)中均質(zhì)(例如條件為10mpa，循環(huán)3次)，制得負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w型乳液。

進(jìn)一步地，上述負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液的制備方法中，

步驟(1)所制得的白藜蘆醇水溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.0005-0.0015％；優(yōu)選為0.001％；

步驟(2)所制得的油相中白藜蘆醇的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.001-0.003％；優(yōu)選為0.002727％；

步驟(3)中，步驟(1)所制得的白藜蘆醇水溶液與步驟(2)所制得的油相的質(zhì)量比為(10:90)-(50:50)；優(yōu)選為20:80；

步驟(5)中，步驟(3)所制得的初乳(w/o型)與步驟(4)所制得的外水相的質(zhì)量比為(10:90)-(30:70)；優(yōu)選為20:80。

本發(fā)明所述包封率與本領(lǐng)域常規(guī)含義相同，可采用現(xiàn)有常規(guī)方法檢測(cè)。一種包封率的具體檢測(cè)方法包括：4℃條件下，將所述w/o/w乳液在20,000×g下離心4min，乳液分層，獲得乳液下層液體中白藜蘆醇的含量w1；所述w/o/w乳液中總白藜蘆醇的含量計(jì)為w2，用下式計(jì)算包封率：

包封率＝(w2-w1)÷w2×100％

其中，獲得所述w/o/w乳液中及上述離心后乳液下層液體中白藜蘆醇含量份方法可為高效液相色譜法，流動(dòng)相a是離子水，流動(dòng)相b是色譜級(jí)的乙腈，流動(dòng)相a和b的體積比例是75:25，流速是0.8ml/min。

本發(fā)明還包括上述負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液在食品、藥品、化妝品領(lǐng)域的應(yīng)用。

本發(fā)明所述w/o是指油包水型乳液；o/w是指水包油型乳液；w/o/w指水油水型乳液。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是：

1.內(nèi)水相和油相中同時(shí)運(yùn)載了白藜蘆醇，可以在不增加任何壁材的條件下增加了白藜蘆醇的含量；

2.制備工藝條件靈活可控制?？梢酝ㄟ^(guò)調(diào)節(jié)高速剪切的轉(zhuǎn)速、均質(zhì)機(jī)的壓力、各組分比例可制備出含量高達(dá)0.00064％的白藜蘆醇w/o/w乳液；

3.w/o/w乳液具有兩層油水界面，與普通o/w乳液相比多了一層油水界面，因此可以很好的保護(hù)白藜蘆醇，降低光照、氧氣等條件存在下白藜蘆醇的降解，起到緩釋和控制釋放的作用；

4.制備的w/o/w乳液穩(wěn)定性好，4℃下保存2個(gè)月不分層，4000r/min下高速離心30min不分層。

本發(fā)明所述的負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液，其穩(wěn)定性高，該負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液可應(yīng)用于食品藥品行業(yè)。另外該負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液的制備方法是兩步法，其中制備條件是可以控制的，有利于工業(yè)化生產(chǎn)。此外，該體系可以在不增加壁材的條件下將內(nèi)水相和油相中同時(shí)負(fù)載白藜蘆醇，包封率高達(dá)99％，極大地增加了白藜蘆醇在整個(gè)體系的含量。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明方法的工藝流程圖。

圖2為實(shí)施例1-4制備得到的w/o/w乳液的微觀結(jié)構(gòu)圖。

圖3為對(duì)比例1-4制備得到的w/o/w乳液的微觀結(jié)構(gòu)圖。

具體實(shí)施方式

以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，但不用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中未注明具體技術(shù)或條件者，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻(xiàn)所描述的技術(shù)或條件，或者按照產(chǎn)品說(shuō)明書進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可通過(guò)正規(guī)渠道商購(gòu)買得到的常規(guī)產(chǎn)品。

實(shí)施例1

一種負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液，包括如下組分：

其制備方法，包括如下步驟：

(1)稱取0.024mg白藜蘆醇，加入到2.4g去離子水中，溶解得到白藜蘆醇水溶液；

(2)稱取0.288mg白藜蘆醇，0.96g聚甘油蓖麻醇酯(pgpr)，9.6g中鏈甘油三酯(mct)，混合均勻，得到油相；

(3)將步驟(1)得到的白藜蘆醇水溶液加入到步驟(2)得到的油相中，在25000r/min下用高速剪切機(jī)剪切，時(shí)間為3min，得到比較均勻的乳液；

然后再將乳液加入到高壓均質(zhì)機(jī)中均質(zhì)，條件為30mpa，4個(gè)循環(huán)，制得初乳(w/o型)；

(4)稱取2.4gtween80，加入到約45g去離子水中(使得最終體系的總質(zhì)量為60g)，得到含有tween80的外水相；

(5)將步驟(3)制備得到的初乳(w/o型)加入到含有tween80的外水相中，用高速分散機(jī)分散，轉(zhuǎn)速為10000r/min，時(shí)間為2min；然后將得到的混合物加入到高壓均質(zhì)機(jī)中均質(zhì)，條件為10mpa，循環(huán)3次后制得負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w型乳液。

實(shí)驗(yàn)證明，該負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液在4℃下放置2個(gè)月不分層；將該負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液高速離心4000r/min、30min，乳液不分層。

實(shí)驗(yàn)證明，該負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液中白藜蘆醇的包封率為99％。

實(shí)施例2

一種負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液，與實(shí)施例1的區(qū)別僅在于：制備方法步驟(5)中，均質(zhì)壓力為5mpa。

實(shí)施例3

一種負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液與實(shí)施例1的區(qū)別僅在于：聚山梨酯(tween80)的用量為4.8g；即制備方法步驟(4)中，去離子水的用量為42.3g(使得最終體系的總質(zhì)量為60g)，tween80的用量為4.8g。

實(shí)施例4

一種負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w與實(shí)施例1的區(qū)別僅在于：聚甘油蓖麻醇酯(pgpr)的用量為0.48g；即制備方法步驟(2)中，聚甘油蓖麻醇酯的用量為0.48g。

實(shí)施例1-4制作得到的w/o/w乳液的對(duì)比結(jié)果如圖2所示，從微觀結(jié)構(gòu)來(lái)看，實(shí)施例1中，有大量的w/o/w乳液；實(shí)施例2和實(shí)施例3中，有較少的w/o/w乳液；實(shí)施例4中，有少量的w/o/w乳液。

對(duì)比例1

一種負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液與實(shí)施例1的區(qū)別僅在于：制備方法步驟(5)中，均質(zhì)壓力為0mpa。

對(duì)比例2

一種負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液與實(shí)施例1的區(qū)別僅在于：制備方法步驟(3)中，均質(zhì)壓力為65mpa。

對(duì)比例3

一種負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液與實(shí)施例1的區(qū)別僅在于：制備方法步驟(2)中，聚甘油蓖麻醇酯的用量為0.096g。

對(duì)比例4

一種負(fù)載白藜蘆醇的w/o/w乳液與實(shí)施例1的區(qū)別僅在于：制備方法步驟(4)中，聚甘油蓖麻醇酯的用量為4.8g。

對(duì)比例1-4制備得到的w/o/w乳液的對(duì)比結(jié)果如圖3所示，從微觀結(jié)構(gòu)來(lái)看，幾乎沒(méi)有w/o/w結(jié)構(gòu)的出現(xiàn)，并沒(méi)有成功的制備得到w/o/w乳液。

雖然，上文中已經(jīng)用一般性說(shuō)明及具體實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對(duì)之作一些修改或改進(jìn)，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見(jiàn)的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。