本發(fā)明屬于藥物制劑，特別涉及一種欖香烯結(jié)腸靶向納米囊及其制備方法、用途。

背景技術(shù)：

1、結(jié)直腸癌(colorectal?cancer,crc)是常見的消化道惡性腫瘤，是多種致病因素綜合作用下形成的結(jié)直腸黏膜上皮和腺體部分發(fā)生的惡性腫瘤，在全球癌癥發(fā)病率高，并趨于年輕化，嚴(yán)重危害生命健康。臨床上常采用手術(shù)及術(shù)后輔助放化療的綜合療法，但常因藥物濃度在結(jié)直腸癌腫瘤部位的累積不足，阻礙藥物抗癌療效的充分發(fā)揮。

2、欖香烯(el)是從中藥溫莪術(shù)根莖中分離、提取出來的一種有效活性單體，是我國批準(zhǔn)的具有自主知識產(chǎn)權(quán)的二類非細(xì)胞毒性植物源性抗腫瘤藥物?；A(chǔ)研究提示其可以通過抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤組織血管新生等多種機(jī)制而發(fā)揮抗腫瘤作用，臨床研究發(fā)現(xiàn)欖香烯不僅對多種腫瘤有確切療效，同時還具有一定的免疫保護(hù)作用，與放療、化療聯(lián)合應(yīng)用有協(xié)同作用，能緩解癌性疼痛、升高白細(xì)胞和抑制血小板聚集等作用，具有低毒、高效和廣譜等優(yōu)點，不易產(chǎn)生耐藥。目前欖香烯已廣泛應(yīng)用于多種腫瘤的臨床治療中，如肺癌、胃癌、結(jié)直腸癌等癌癥治療。

3、口服結(jié)腸靶向給藥系統(tǒng)(oral?colon-target?drug?delivery?system，ocdds)是通過藥物傳遞技術(shù)使藥物口服后在上消化道不釋放，而被輸送至回盲部后在結(jié)腸部位釋放而發(fā)揮局部或全身療效作用的一種新型定位給藥系統(tǒng)。ocdds能顯著增強(qiáng)局部療效，彌補(bǔ)了許多傳統(tǒng)口服制劑的不足，在許多胃腸道疾病如潰瘍性結(jié)腸炎、克恩羅病、結(jié)腸癌等的治療上有廣闊的應(yīng)用前景。

4、納米囊(nanocapsules，ncs)是一種具有囊性結(jié)構(gòu)的納米粒子，其內(nèi)核作為藥物的液體儲存庫，主要是親脂性的溶劑(通常是油)；外殼通常是由聚合物制成的，尤其是生物可降解聚合物。采用這種囊性結(jié)構(gòu)的給藥系統(tǒng)具備如下優(yōu)點：1、具有較高的載藥量，由于脂質(zhì)核心優(yōu)化了藥物的溶解度，可以更大程度地提高難溶性藥物在納米粒子中的濃度；2、由于藥物在納米囊中受到“保護(hù)”，可以防止在給藥部位的組織刺激而導(dǎo)致的藥物本身的降解；3、通過篩選不同聚合物囊殼材料，可以實現(xiàn)納米囊在特定的組織部位響應(yīng)性釋放。

5、因此，基于納米囊結(jié)構(gòu)的特殊優(yōu)勢，本發(fā)明提供了一種欖香烯結(jié)腸靶向納米囊，解決現(xiàn)有欖香烯藥物在結(jié)直腸癌腫瘤部位的有效作用濃度不足和生物利用度較差的問題，本發(fā)明的欖香烯結(jié)腸靶向納米囊可以保護(hù)藥物不在胃和小腸中提前釋放，而在結(jié)腸環(huán)境中實現(xiàn)藥物以納米乳的形式快速釋放，具有一定的腫瘤靶向作用，增強(qiáng)了藥物在結(jié)直腸癌治療中的療效。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的主要目的在于提供一種欖香烯結(jié)腸靶向納米囊及其制備方法、用途，本發(fā)明的欖香烯結(jié)腸靶向納米囊，可保護(hù)藥物不在胃和小腸中提前釋放，而在結(jié)腸環(huán)境中實現(xiàn)藥物以納米乳的形式快速釋放。其脂質(zhì)內(nèi)核可以增加對難溶性藥物的溶解性以及增強(qiáng)在腫瘤組織中的滲透性；聚合物囊殼能夠根據(jù)消化道ph環(huán)境觸發(fā)的結(jié)腸溶性聚合物材料溶解，從而使藥物能夠在消化道內(nèi)保留并在結(jié)腸腔內(nèi)釋放，釋放后的藥物以納米乳的形式在結(jié)直腸癌腫瘤組織中積聚和滲透，可以發(fā)揮良好的抗腫瘤治療效果。

2、欖香烯是具有廣泛抗腫瘤活性的中藥有效活性單體，本發(fā)明利用乳化-溶劑擴(kuò)散法制備欖香烯結(jié)腸靶向納米囊(el@ncs)，首先利用自乳化法制備欖香烯自納米乳(el@sne)內(nèi)核，增加欖香烯的溶解性和穩(wěn)定性，再利用多級分散技術(shù)將ph敏感型聚合物包覆于內(nèi)核上獲得欖香烯結(jié)腸靶向納米囊，并考察其體外釋放、消化道保留、腫瘤靶向和體內(nèi)藥效學(xué)。

3、為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種欖香烯結(jié)腸靶向納米囊，包括內(nèi)核和包覆在所述內(nèi)核表面的ph敏感型腸溶聚合物，所述內(nèi)核包括欖香烯和自納米乳脂質(zhì)材料，所述自納米乳脂質(zhì)材料包括油相、乳化劑和助乳化劑。

4、進(jìn)一步地，所述ph敏感型腸溶聚合物為甲基丙烯酸和丙烯酸甲酯的陰離子共聚物。

5、進(jìn)一步地，所述油相為中鏈脂肪酸；所述乳化劑選自聚氧乙烯氫化蓖麻油、月桂酰聚氧基-32甘油酯、蓖麻油聚氧乙烯醚或辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯中的一種或多種；所述助乳化劑選自二乙二醇單乙醚、聚乙二醇400或丙二醇單辛酸酯中的一種或多種。

6、進(jìn)一步地，所述欖香烯結(jié)腸靶向納米囊的平均粒徑為130～140nm，多分散性指數(shù)為0.17～0.21，表面電荷為-13.33～-12.61mv；所述欖香烯結(jié)腸靶向納米囊的載藥量和包封率分別為4.6～5.5％、77～80.6％。

7、本發(fā)明的另一方面，提供了一種前述的欖香烯結(jié)腸靶向納米囊的制備方法，包括以下步驟：將欖香烯、油相、乳化劑和助乳化劑混合，得到欖香烯自納米乳；

8、將ph敏感型腸溶聚合物包覆在所述欖香烯自納米乳的表面，得到所述欖香烯結(jié)腸靶向納米囊。

9、進(jìn)一步地，所述欖香烯結(jié)腸靶向納米囊的制備方法包括以下步驟：

10、欖香烯自納米乳的制備包括：將欖香烯和油相進(jìn)行第一攪拌混合，得到欖香烯溶液；將乳化劑和助乳化劑攪拌混合，得到自納米乳空白基質(zhì)；將所述欖香烯溶液滴加到所述自納米乳空白基質(zhì)中經(jīng)第二攪拌混合，得到所述欖香烯自納米乳；

11、和/或，

12、ph敏感型腸溶聚合物溶液的制備包括：將ph敏感型腸溶聚合物溶解于水飽和乙酸乙酯溶液中，并調(diào)節(jié)體系的ph至弱堿性，得到ph敏感型腸溶聚合物溶液；

13、和/或，

14、欖香烯結(jié)腸靶向納米囊的制備包括：將所述欖香烯自納米乳與所述ph敏感型腸溶聚合物溶液渦旋混合，得到第一混合乳液；將所述第一混合乳液滴加至乙酸乙酯飽和水溶液中，經(jīng)第三攪拌混合，乳化擴(kuò)散，得到第二混合乳液；將所述第二混合乳液與純水經(jīng)第四攪拌混合，溶劑擴(kuò)散，形成欖香烯結(jié)腸靶向納米囊溶液；將所述欖香烯結(jié)腸靶向納米囊溶液依次進(jìn)行濃縮、離心、透析，即得到所述欖香烯結(jié)腸靶向納米囊。

15、進(jìn)一步地，所述欖香烯溶液中欖香烯的濃度為0.4mg/ml～0.6mg/ml；所述ph敏感型腸溶聚合物溶液中ph敏感型腸溶聚合物的質(zhì)量濃度為0.03～0.1％。

16、進(jìn)一步地，所述欖香烯溶液滴加的速度為0.1～1ml/min，所述乙酸乙酯飽和水溶液的用量為所述第一混合乳液的3～6倍量；所述純水的用量為所述第二混合乳液的8～12倍量。

17、進(jìn)一步地，所述欖香烯自納米乳經(jīng)50倍量水復(fù)乳化后的平均粒徑為40～45nm，多分散性指數(shù)為0.10～0.12，表面電荷為-6.07～-5.73mv。

18、本發(fā)明的另一方面，還提供了一種前述的欖香烯結(jié)腸靶向納米囊的用途，所述欖香烯結(jié)腸靶向納米囊在制備治療結(jié)腸癌的口服結(jié)腸靶向制劑中的用途。

19、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：本發(fā)明制備的欖香結(jié)腸靶向烯納米囊是一種口服結(jié)腸靶向制劑，納米囊粒徑較小，分散均勻，具有邊緣清晰的囊結(jié)構(gòu)，載藥量和包封率較優(yōu)，可保護(hù)藥物不在胃和小腸中提前釋放，而在結(jié)腸位置處以納米乳的形式快速釋放。由于ph敏感型腸溶聚合物的存在而在酸性條件下(ph為1.2～6.8)始終保持著表面負(fù)電荷，而在堿性條件下(ph為7.4)ph敏感型腸溶聚合物發(fā)生溶解，藥物以粒徑更小的納米乳形態(tài)釋放，實現(xiàn)了在結(jié)腸腫瘤部位的聚集及滲透，具有一定的腫瘤靶向性。

20、通過體外試驗研究表明，本發(fā)明的欖香烯結(jié)腸靶向納米囊在模擬結(jié)腸液中以納米乳的形式快速釋放藥物，可在結(jié)直腸癌原位荷瘤小鼠模型上展現(xiàn)出一定的腫瘤靶向性；通過體內(nèi)藥效研究表明相對于欖香烯原料藥和上市藥物(欖香烯口服乳)，本發(fā)明的欖香烯結(jié)腸靶向納米囊可顯著抑制原位荷瘤小鼠的腫瘤增長，并具有較好的生物安全性，說明該制劑可顯著提高藥物的抗結(jié)直腸癌治療作用。