本發(fā)明屬于納米藥物遞送系統(tǒng)，具體涉及一種抗腫瘤靶向納米藥物遞送系統(tǒng)及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、多發(fā)性骨髓瘤具有漿細(xì)胞惡性大量增生、單克隆免疫球蛋白過量分泌的特征，經(jīng)治療后大多數(shù)患者仍面臨預(yù)后差、復(fù)發(fā)的高風(fēng)險(xiǎn)。多柔比星（dox）作為一種臨床常見的抗腫瘤藥物，對治療多發(fā)性骨髓瘤有一定的療效，但仍對正常細(xì)胞和組織有明顯的毒副作用，如心臟毒性、骨髓抑制等，大大限制了以dox為主的方案在腫瘤治療領(lǐng)域的應(yīng)用。因此，在提高藥物療效的同時(shí)，減輕dox引起的藥物毒性已經(jīng)成為治療多發(fā)性骨髓瘤中面臨的一大難題。隨著治療方案的優(yōu)化，納米靶向載藥遞送系統(tǒng)在治療多發(fā)性骨髓瘤方面顯示出良好的應(yīng)用前景。

2、近年來，不同形式的納米載體在醫(yī)學(xué)上受到廣泛關(guān)注，如有機(jī)納米顆粒、無機(jī)納米顆粒等。然而，大多數(shù)納米藥物能提高一些療效，但通常較為有限。究其原因在于多數(shù)納米載體仍存在遞送效率低的問題。如臨床上已有納米藥物如多柔比星脂質(zhì)體，白蛋白紫杉醇，盡管納米藥物在一定程度上減少了藥物的毒副作用，但仍存在藥物遞送性能低的潛在問題，治療效果沒有明顯改善，進(jìn)而給藥頻繁產(chǎn)生耐藥性，毒副作用進(jìn)一步增大。因此，迫切需要發(fā)現(xiàn)具有提高藥物遞送效率的納米載體。如今，為了解決納米載體存在的問題，可利用受體和配體特異性結(jié)合來提高靶向性的基礎(chǔ)上，研究發(fā)現(xiàn)了介孔類的納米材料作為載體的潛力，然而由于體內(nèi)微環(huán)境的不穩(wěn)定性，它們在運(yùn)輸中導(dǎo)致遞送效率不足。因而，如何制備出一種穩(wěn)定性好，負(fù)載率和釋放率高的納米靶向載藥遞送系統(tǒng)成為亟待解決的技術(shù)問題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明提供了一種抗腫瘤靶向納米藥物遞送系統(tǒng)，該系統(tǒng)是一種a6多肽靶向新型聚電解質(zhì)多層膜體修飾中空介孔納米球的結(jié)構(gòu)，用于將抗腫瘤藥物dox靶向高效遞送到cd44過表達(dá)的mm細(xì)胞上進(jìn)行治療，更有利于實(shí)現(xiàn)藥物的高效靶向遞送。在體外研究對mm細(xì)胞的影響，結(jié)果顯示不僅提高負(fù)載效率，改善遞送效率不足，還能有效的抑制多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞的增殖，減少對正常組織的毒副作用。

2、本發(fā)明還提供了一種抗腫瘤靶向納米藥物遞送系統(tǒng)的制備方法和應(yīng)用。

3、為實(shí)現(xiàn)上述技術(shù)目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為：

4、一種抗腫瘤靶向納米藥物遞送系統(tǒng)，它是以表面修飾有支化聚乙烯亞胺和聚丙烯酸的中空介孔結(jié)構(gòu)的二氧化鈦為主要載體，同時(shí)在載體表面上再修飾a6短肽制成。

5、一種所述的抗腫瘤靶向納米藥物遞送系統(tǒng)的制備方法，它包括以下步驟：

6、（1）采用改性st?ber法合成單分散二氧化硅納米球；

7、（2）以三嵌段共聚物pluronic?f127、乙酸、濃鹽酸、鈦酸四丁酯為反應(yīng)原料，以四氫呋喃為反應(yīng)溶劑制備f127/tio2復(fù)合凝膠材料；

8、（3）以步驟（2）所得復(fù)合凝膠材料、步驟（1）所制備的單分散sio2納米球、無水乙醇、tmb為原料，添加少許甘油后加熱反應(yīng)，分離得反應(yīng)產(chǎn)物，干燥后經(jīng)退火得到sio2@h-mtio2核殼結(jié)構(gòu)納米粒子；

9、（4）將支化聚乙烯亞胺、聚丙烯酸通過自組裝修飾到步驟（3）所得sio2@h-mtio2表面上，然后采用氫氟酸溶液刻蝕處理并分離得到吸附包裹有bpei和paa的中空介孔tio2納米球，記為(bpei/paa)3@h-mtio2；

10、（5）a6-(bpei/paa)3@h-mtio2系統(tǒng)的制備：取步驟（4）所得載體(bpei/paa)3@h-mtio2與短肽a6混合通過縮合反應(yīng)制備得到載體a6-(bpei/paa)3@h-mtio2。

11、優(yōu)選的，所述步驟（1）具體制備方法為：先取30.0?ml無水乙醇、5.0?ml去離子水和2.0?ml濃氨水溶液，在圓底燒瓶中均勻攪拌混合。然后加入0.2?ml?teos，攪拌30?min，形成sio2前驅(qū)體，然后，在溶液中滴入3.8?ml?teos，在室溫下繼續(xù)反應(yīng)，最后離心收集，用去離子水和乙醇反復(fù)洗滌，在烘箱中干燥，得到單分散sio2納米球。

12、優(yōu)選的，所述步驟（2）的具體方法為：取30.0?ml四氫呋喃，將1.5?g三嵌段共聚物pluronic?f127、2.4?ml乙酸和3.2?ml濃鹽酸依次加入，然后將3.0?ml?鈦酸四丁酯滴入混合物中，攪拌10?min后，最后將溶液放在45℃的烘箱中，靜置24h，使thf溶劑緩慢蒸發(fā)，得到f127/tio2復(fù)合凝膠材料。

13、優(yōu)選的，所述步驟（3）的具體方法為：取10.0?ml?無水乙醇，將3.0?gf127/tio2復(fù)合凝膠材料和3.0?ml?tmb依次加入并攪拌數(shù)分鐘，然后滴加少許甘油攪拌5?min后，再將1.0?g單分散sio2納米球和4.0?ml的無水乙醇相互震蕩融合后，加入上述混合物中，整個(gè)混合溶液在100℃的油浴中加熱，攪拌6h，冷卻至室溫，用無水乙醇反復(fù)洗滌白色沉淀物，離心收集，并在烘箱中干燥，最后在350℃氮?dú)庀峦嘶鸬玫疆a(chǎn)物sio2@h-mtio2。

14、優(yōu)選的，所述步驟（4）的具體方法為：取1.0?ml濃度為0.01-1mol/l的bpei和0.1-10g的sio2@h-mtio2粉末充分混合均勻，將其放置到振蕩器上震蕩20-30?min充分反應(yīng)，離心棄上清，用去離子水進(jìn)行超聲清洗3-4次，隨后離心，將吸附了bpei的粒子放進(jìn)1.0?ml濃度為0.01-1mol/l的paa中充分混合均勻，重復(fù)以上步驟三次，隨后離心，棄上清液，產(chǎn)物浸泡在4%氫氟酸溶液中10?min，最后離心分離得到產(chǎn)物(bpei/paa)3@h-mtio2。

15、優(yōu)選的，所述步驟（5）的具體方法為：取步驟（4）得到的(bpei/paa)3@h-mtio2，溶解于10ml?dmso中，取濃度為10?mm的a6短肽溶液與(bpei/paa)3@h-mtio2溶液以體積2:1的比例混合，37℃下攪拌反應(yīng)6小時(shí)，混合液離心分離后冷凍干燥即得a6-(bpei/paa)3@h-mtio2。

16、一種上述的抗腫瘤靶向納米藥物遞送系統(tǒng)在制備抗腫瘤靶向藥物中的應(yīng)用，所述腫瘤為多發(fā)性骨髓瘤。將本發(fā)明所制備的納米藥物遞送系統(tǒng)作為載體，負(fù)載抗腫瘤藥物多柔比星(dox)，可提高藥物dox的遞送效率，且釋放率高達(dá)80%左右。

17、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明所制備的中空介孔的球形二氧化鈦結(jié)構(gòu)具有空腔結(jié)構(gòu)，內(nèi)部空間大，形態(tài)規(guī)則，提供足夠的空間來容納小分子物質(zhì)，能高效、均勻的負(fù)載dox，且利用bpei/paa聚電解質(zhì)多層膜自修復(fù)能力和在酸性條件下可裂解最大程度的釋放藥物的特點(diǎn)，通過物理組裝的方式包裹在已經(jīng)被刻蝕硅芯的中空介孔的二氧化鈦的結(jié)構(gòu)上，極大程度地解決了負(fù)載率低、遞送效果不足的缺點(diǎn)。與此同時(shí)，本發(fā)明設(shè)計(jì)用a6短肽修飾(bpei/paa)3@h-mtio2結(jié)構(gòu)作為外殼，靶向配體結(jié)合多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞arh-77表面過表達(dá)的cd44受體，從而高效靶向遞送藥物，提高治療效果，減少對正常組織和細(xì)胞的副作用，這為a6-(bpei/paa)3@h-mtio2納米結(jié)構(gòu)負(fù)載dox治療多發(fā)性骨髓瘤提供了明確的理論基礎(chǔ)。