一、動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 建立干燥綜合征動(dòng)物模型，觀察本發(fā)明中藥組合物對干燥綜合征模型小鼠唾液量及 外周血T淋巴細(xì)胞亞群的影響，以此探討本發(fā)明中藥組合物治療干燥綜合征的作用及其機(jī) 制。
[0014] 1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 1. 1小鼠及腫瘤細(xì)胞 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物取雄性BALb/C小鼠，體重為20g左右，60只。
[0015] 2.藥品與試劑 實(shí)驗(yàn)藥品為本發(fā)明中藥組合物，制成高、中、低三種不同濃度水煎劑； 醋酸潑尼松，天津藥業(yè)生產(chǎn)； 百白破疫苗，北京天壇生物制品股份有限公司生產(chǎn)；弗氏完全佐劑，Sigma公司生產(chǎn)； PBS緩沖液，博士德生物工程有限公司生產(chǎn)；⑶4、⑶8試劑，晶美生物制藥有限公司生產(chǎn)。
[0016] 3.動(dòng)物分組、造模及給藥方法 將60只小鼠隨機(jī)分成空白對照組、模型對照組、本發(fā)明中藥組合物高劑量組、本發(fā)明 中藥組合物中劑量組、本發(fā)明中藥組合物低劑量組、西藥醋酸潑尼松組，共6組，每組10只。 對模型對照組，本發(fā)明中藥組合物高、中、低劑量組，醋酸潑尼松組小鼠分別進(jìn)行造模：各取 10只同種小鼠，于無菌條件下取頜下腺，勻漿后加 PBS稀釋到1000yg/mL，加入弗氏完全 佐劑，調(diào)整濃度為500 μ g/mL，以每只I mL的總量于小鼠的尾根部多點(diǎn)注射免疫，同時(shí)于背 部注射百白破疫苗〇.5mL。在造模后第5周處死模型對照組小鼠2只，通過病理形態(tài)學(xué)觀 察，模型小鼠頜下腺發(fā)現(xiàn)特征性淋巴細(xì)胞浸潤、腺體萎縮等干燥綜合征典型病理改變，表明 造模成功?？瞻讓φ战M正常飼養(yǎng)，不予任何藥物；模型對照組予生理鹽水灌胃；本發(fā)明組合 物高劑量組給予相當(dāng)于生藥量6g/kg體重灌胃；本發(fā)明組合物中劑量組給予相當(dāng)于生藥 量3g/kg體重灌胃；本發(fā)明組合物低劑量給予相當(dāng)于生藥量1.5g/kg體重灌胃；醋酸潑尼 松西藥組予醋酸潑尼松0. 08mg/d灌胃。
[0017] 4檢測指標(biāo) 4. 1唾液量測定：灌胃2周后將無菌的脫脂棉球制成干重為5mg的棉球，放入小鼠的 后頰部，5min后取出，電子天平上稱重。唾液分泌量（mg)=棉球濕重-棉球干重。
[0018] 4.2小鼠唾液腺T淋巴細(xì)胞亞群 5統(tǒng)計(jì)分析 實(shí)驗(yàn)結(jié)果皆以I ±s表示，采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。采用單因素方 差分析（AN0VA)，組間兩兩比較，采用LSD法檢驗(yàn)，P < 0. 05為差異有顯著性。
[0019] 5.1各組小鼠唾液流量變化比較 與空白對照組比較，模型組唾液流量顯著降低（P< 0.01)，本發(fā)明組合物中、低劑 量組及西藥組明顯降低（P< 0.05);與模型組比較，本發(fā)明組合物高劑量組顯著升高（P < 0. 01)，本發(fā)明組合物中、低劑量組及西藥組明顯升高（P < 0. 05)。
[0020] 表3各組小鼠唾液量變化比較mg，? 土s)
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種治療干燥綜合征的中藥組合物，其特征在于，由重量計(jì)的：西洋參10-30份、白 術(shù)10-30份、白扁豆5-20份、白芍10-30份、甘草10-40份、葛根10-30份、百合10-20份、 生地5-10份、女貞子10-40份、枸杞子10-40份、生山楂10-40份、雞血藤5-20份和紅藤 5-20份制成，其中，將西洋參、白術(shù)、白扁豆、白芍、甘草混合在一起，每次加西洋參、白術(shù)、白 扁豆、白芍和甘草6-10倍重量的水，加熱煎制2-3次，每次1-1. 5小時(shí)，合并煎液，過濾，得 第一濾液，濃縮至第一濾液體積的1/2-1/3,成A液；再將葛根、百合、生地、女貞子、枸杞子、 生山楂、雞血藤和紅藤混合在一起，加入葛根、百合、生地、女貞子、枸杞子、生山楂、雞血藤 和紅藤4-8倍重量的體積濃度為75%的乙醇，加熱回流提取4小時(shí)，過濾，濾液減壓回收乙 醇，得第二濾液，第二濾液濃縮至第二濾液體積的1/2-1/3,成B液；將A液和B液混合均勻， 濃縮至50°C下相對密度為1. 10-1. 30的清膏，清膏中加入清膏重量20%-60%的輔料，攪拌均 勻，即成；所述的輔料為蔗糖、淀粉、糊精、滑石粉、硬脂酸鎂、硫酸鈣中的一種或兩種以上的 組合物。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療干燥綜合征的中藥組合物，其特征在于，由重量計(jì)的：西 洋參15-25份、白術(shù)15-25份、白扁豆10-15份、白芍15-25份、甘草20-30份、葛根15-25 份、百合13-17份、生地6-8份、女貞子20-30份、枸杞子20-30份、生山楂20-30份、雞血藤 10-15份和紅藤10-15份制成，其中，將西洋參、白術(shù)、白扁豆、白芍、甘草混合在一起，每次 加西洋參、白術(shù)、白扁豆、白芍和甘草6-10倍重量的水，加熱煎制2-3次，每次1-1. 5小時(shí)， 合并煎液，過濾，得第一濾液，濃縮至第一濾液體積的1/2-1/3,成A液；再將葛根、百合、生 地、女貞子、枸杞子、生山楂、雞血藤和紅藤混合在一起，加入葛根、百合、生地、女貞子、枸杞 子、生山楂、雞血藤和紅藤4-8倍重量的體積濃度為75%的乙醇，加熱回流提取4小時(shí)，過 濾，濾液減壓回收乙醇，得第二濾液，第二濾液濃縮至第二濾液體積的1/2-1/3,成B液；將 A液和B液混合均勻，濃縮至50°C下相對密度為1. 10-1.30的清膏，清膏中加入清膏重量 20%-60%的輔料，攪拌均勻，即成。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療干燥綜合征的中藥組合物，其特征在于，由重量計(jì)的：西 洋參20份、白術(shù)20份、白扁豆13份、白芍20份、甘草25份、葛根20份、百合15份、生地8 份、女貞子25份、枸杞子25份、生山楂25份、雞血藤13份和紅藤13份制成，其中，將西洋 參、白術(shù)、白扁豆、白芍、甘草混合在一起，每次加西洋參、白術(shù)、白扁豆、白芍和甘草8倍重 量的水，加熱煎制2次，第一次煎制1. 5小時(shí)，第二次煎制1小時(shí)，合并煎液，過濾，得第一 濾液，濃縮至第一濾液體積的1/2-1/3,成A液；再將葛根、百合、生地、女貞子、枸杞子、生山 楂、雞血藤和紅藤混合在一起，加入葛根、百合、生地、女貞子、枸杞子、生山楂、雞血藤和紅 藤6倍重量的體積濃度為75%的乙醇，加熱回流提取4小時(shí)，過濾，濾液減壓回收乙醇，得第 二濾液，第二濾液濃縮至第二濾液體積的1/2-1/3,成B液；將A液和B液混合均勻，濃縮至 50°C下相對密度為1. 10-1. 30的清膏，清膏中加入清膏重量20%-60%的輔料，攪拌均勻，即 成。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療干燥綜合征的中藥組合物，其特征在于，由重量計(jì)的：西 洋參12份、白術(shù)28份、白扁豆6份、白芍28份、甘草12份、葛根28份、百合12份、生地9 份、女貞子12份、枸杞子38份、生山楂12份、雞血藤18份和紅藤7份制成，其中，將西洋參、 白術(shù)、白扁豆、白芍、甘草混合在一起，每次加西洋參、白術(shù)、白扁豆、白芍和甘草6-8倍重量 的水，加熱煎制3次，第一次加其重量8倍的水，煎制1. 5小時(shí)，第二次加其重量6倍的水， 煎制1小時(shí)，合并煎液，過濾，得第一濾液，濃縮至第一濾液體積的1/2-1/3,成A液；再將葛 根、百合、生地、女貞子、枸杞子、生山楂、雞血藤和紅藤混合在一起，加入葛根、百合、生地、 女貞子、枸杞子、生山楂、雞血藤和紅藤7倍重量的體積濃度為75%的乙醇，加熱回流提取4 小時(shí)，過濾，濾液減壓回收乙醇，得第二濾液，第二濾液濃縮至第二濾液體積的1/2-1/3,成 B液；將A液和B液混合均勻，濃縮至50°C下相對密度為1. 10-1. 30的清膏，清膏中加入清 膏重量20%-60%的輔料，攪拌均勻，即成。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療干燥綜合征的中藥組合物，其特征在于，由重量計(jì)的：西 洋參28份、白術(shù)12份、白扁豆18份、白芍12份、甘草38份、葛根12份、百合19份、生地6 份、女貞子38份、枸杞子12份、生山楂38份、雞血藤7份和紅藤18份制成，其中，將西洋 參、白術(shù)、白扁豆、白芍、甘草混合在一起，每次加西洋參、白術(shù)、白扁豆、白芍和甘草8-10倍 重量的水，加熱煎制2次，第一次加其重量10倍的水，煎制1. 5小時(shí)，第二次加其重量8倍 的水，煎制1小時(shí)，合并煎液，過濾，得第一濾液，濃縮至第一濾液體積的1/2-1/3,成A液； 再將葛根、百合、生地、女貞子、枸杞子、生山楂、雞血藤和紅藤混合在一起，加入葛根、百合、 生地、女貞子、枸杞子、生山楂、雞血藤和紅藤4-8倍重量的體積濃度為75%的乙醇，加熱 回流提取4小時(shí)，過濾，濾液減壓回收乙醇，得第二濾液，第二濾液濃縮至第二濾液體積的 1/2-1/3,成B液；將A液和B液混合均勻，濃縮至50°C下相對密度為1. 10-1. 30的清膏，清 膏中加入清膏重量20%-60%的輔料，攪拌均勻，即成。
【專利摘要】本發(fā)明涉及治療干燥綜合征的中藥組合物,可有效解決干燥綜合征的治療用藥問題，該中藥組合物是由重量計(jì)的：西洋參10-30份、白術(shù)10-30份、白扁豆5-20份、白芍10-30份、甘草10-40份、葛根10-30份、百合10-20份、生地5-10份、女貞子10-40份、枸杞子10-40份、生山楂10-40份、雞血藤5-20份和紅藤5-20份制成，發(fā)明組方科學(xué)合理，原料豐富，易生產(chǎn)制備，服用方便，效果好，具有健脾益氣、養(yǎng)心潤肺、滋補(bǔ)肝腎、活血化瘀之功效，可有效改善干燥綜合征病人臨床癥狀及主要免疫學(xué)指標(biāo)等功效，是治療干燥綜合征藥物上的創(chuàng)新。
【IPC分類】A61P37-02, A61K36-8967, A61P1-02, A61P27-02
【公開號】CN104547502
【申請?zhí)枴緾N201510049232
【發(fā)明人】李曉冰, 王繼慧, 張慧儉, 霍磊, 常征輝, 陳團(tuán)營, 郭曉娜, 劉現(xiàn)輝, 王君明, 李瑞琴, 李寧, 金艷
【申請人】河南中醫(yī)學(xué)院
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2015年1月31日