一種黃芪/刺五加復(fù)方提取物的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥提取及應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種從黃芪、刺五加復(fù)方中提取 有效成分的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前由于人們?cè)絹?lái)越重視生態(tài)安全與食品安全，國(guó)內(nèi)外形成了食用產(chǎn)品要求"高 品質(zhì)、低藥物殘留、綠色無(wú)公害"的消費(fèi)潮流。而黃芪/刺五加復(fù)方提取物作為用現(xiàn)代工藝 提取的傳統(tǒng)中藥不僅具有以上良好效果并且具備綠色無(wú)公害的優(yōu)勢(shì)。
[0003]刺五加為扶正固本之良藥，擅長(zhǎng)益氣健脾，補(bǔ)腎安神，為補(bǔ)藥中之良品。黃芪為升 陽(yáng)補(bǔ)氣之良藥，擅長(zhǎng)于補(bǔ)益中土，溫養(yǎng)脾胃，強(qiáng)壯營(yíng)衛(wèi)，利水消腫。刺五加固本為主，黃芪益 氣為輔，兩藥相伍，相須為用，共收健脾胃，利水濕，益氣血，強(qiáng)營(yíng)衛(wèi)之功，協(xié)同增效，可增強(qiáng) 機(jī)體免疫力、抗應(yīng)激的功效。
[0004]-種中藥材往往含有多種有效成分，而一種有效成分又有多方面的藥理作用，其 作用機(jī)制十分復(fù)雜。中藥提取時(shí)往往得到的是"有效部位"（即有效成分)，如浸提物中含有 的總苷、總黃酮、總糖、總揮發(fā)油等。應(yīng)用有效部位在藥理和臨床上能夠代表或部分代表原 藥材或方劑的療效，有利于發(fā)揮其綜合效能，符合中醫(yī)藥的特點(diǎn)（見徐任生，陳仲良，"中草 藥有效成分提取與分離"，上海科學(xué)技術(shù)出版社，1989:22)。在中藥材的提取工藝中，應(yīng)最大 限度浸提出其有效部位或有效成分。
[0005]黃芪的主要有效成分為黃芪多糖、黃芪皂苷（以黃芪甲苷為主)、黃酮、氨基酸（25 種氨基酸）及微量元素（23種微量元素）等。其中黃芪多糖溶解于水，黃芪皂苷為三萜皂苷 成分，溶于熱水和乙醇，黃酮類化合物一般能溶于水、稀乙醇等溶劑中。
[0006]由于黃芪的主要有效成分溶于水，故提取黃芪的有效成分主要采用水提取工藝。 如劉瑞生("黃芪多糖提取方法研究進(jìn)展"，中國(guó)獸藥雜志，2007, 41(3) : 35~36)，倪艷、蘇 強(qiáng)等("黃芪多糖水煎提取工藝的優(yōu)化試驗(yàn)研究[J]"，中國(guó)中藥雜志，1998, 23(5) :284~ 285)等均采用水提取黃芪多糖。其中后者設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn)，對(duì)黃芪多糖水煎提取工藝進(jìn)行優(yōu) 化研究，其以〇. 5cm黃芪飲片為原料進(jìn)行水煎提取，發(fā)現(xiàn)黃芪粗多糖的得率與提取次數(shù)、時(shí) 間以及水量有關(guān)。由于該工藝中采取水煮醇沉的步驟，醇沉處理過(guò)程中會(huì)損失部分多糖，故 該黃芪多糖的得率有所降低。李紅民等("提高黃芪多糖提取收率的工藝研究[J]"，西北大 學(xué)學(xué)報(bào)，2000, 30 (6) ; 509~510)和丁利君等("黃芪多糖的提取及其對(duì)自由基的清除作用 [J] "，食品與機(jī)械，2003, 4:7)也對(duì)如何提高黃芪多糖的提取收率進(jìn)行了研究。如前者將一 般水煮工藝中的水煮步驟換成pH值為9~10的CaO水溶液或Na2CO3水溶液進(jìn)行提取，結(jié) 果顯示：CaO水溶液提取收率最高（I1. 7%)，是水提取法收率（3. 6%)的3. 25倍，是Na2CO3水 溶液提取收率（5. 7%)的2. 05倍。后者對(duì)同樣條件下水浴浸提法、超聲浸提法和微波浸提 法的提取效果進(jìn)行比較，測(cè)得水浴浸提法的提取效果最好，多糖得率為5. 94%，但其溶劑量 太大，成本增加。上述利用堿液提取法和微波浸提法雖然可提高黃芪多糖的提取收率，但會(huì) 破壞黃芪多糖的高級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)而影響其活性，同時(shí)中藥中的一些有效成分在堿性環(huán)境下其立 體構(gòu)型易發(fā)生旋轉(zhuǎn)，也會(huì)導(dǎo)致提取物的活性降低。
[0007] 刺五加莖或根的主要有效成分為刺五加多糖、酚苷類化合物、氨基酸（16種氨基， 其中7種為人體必需的）及多種微量元素等。其中刺五加多糖在藥材中的含量較低，包括 2%~6%堿溶性多糖及2. 3%~5. 7%水溶性多糖。徐任生等("刺五加多糖成分的研究"，科 學(xué)通報(bào)，1983,（3) : 185-187)研究的藥理試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)水溶性多糖有明顯增強(qiáng)小鼠免疫功能的 作用。紫丁香苷為(6-谷留醇葡萄糖苷，是一種較為典型的酚苷類化合物，已有文獻(xiàn)報(bào)道紫 丁香苷具有降血脂和增強(qiáng)免疫力的作用。
[0008] 酚苷類化合物主要采用水提（馬新飛，陸逸林，殷放宙等，"刺五加藥材中異嗪皮 啶提取方法的研究[J] "，南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2006, 22 (4) ; 246~247)、甲醇提（陸兔林， 馬新飛，毛春芹等，"刺五加藥材提取工藝的研究[J] "，上海中醫(yī)藥雜志，2006, 40 (4) : 59~ 61)、乙醇回流提?。惷策B，宋風(fēng)瑞，郭明全等，"刺五加葉中黃酮類化合物的分析[J]"， 分析化學(xué)，2002,30(6):690~694)以及超聲波法提取等(李慶勇，付玉杰，呂欣等， "超聲波法提取刺五加（Acanthopanaxsenticosus)中丁香苷的研究[J]"，植物研究， 2003, 23(2) ; 182 ~184)。
[0009]

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010] 本發(fā)明的主要目的在于針對(duì)現(xiàn)有的黃芪/刺五加復(fù)方提取物的提取方法中所得 的有效成分含量低的問(wèn)題，提供一種黃芪/刺五加復(fù)方提取物的制備方法，包括如下步驟： 將黃芪、刺五加飲片粉碎，加水浸泡，提取，過(guò)濾，收集濾液，濾渣再提取2次，分次過(guò)濾，合 并3次所述濾液；將合并后的濾液趁熱離心；上清液濃縮至相對(duì)密度為1. 05-1. 2,即得所述 黃芪/刺五加復(fù)方提取物。
[0011] 優(yōu)選地，所述趁熱離心溫度為40~80°C，更優(yōu)選為50~60°C。
[0012] 優(yōu)選地,所述加水浸泡時(shí)固液比為1:8,浸泡時(shí)間為1小時(shí)。
[0013]優(yōu)選地，所述提取溫度為KKTC，提取時(shí)間為每次2小時(shí)。
[0014] 本發(fā)明通過(guò)對(duì)黃芪、刺五加復(fù)方采用水提并對(duì)濾液趁熱離心處理的提取工藝提高 了所得到的黃芪/刺五加復(fù)方提取物中各有效成分的含量。該黃芪/刺五加復(fù)方提取物中 有效成分主要包括總糖、還原糖、紫丁香苷和黃芪甲苷。各有效成分含量分別采用如下檢測(cè) 方法：
[0015] (1)總糖含量：總糖含量為黃芪所含糖類成分和刺五加所含糖類成分的總和,采用 蒽酮法紫外-可見分光光度法（2010版獸藥典附錄26頁(yè)）測(cè)定；
[0016] (2)還原糖含量：按照3, 5-二硝基水楊酸比色法，以葡萄糖為對(duì)照品，在540nm波 長(zhǎng)處比色，繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)而計(jì)算還原糖含量；
[0017] (3)紫丁香苷含量：以紫丁香苷為對(duì)照品，采用高效液相色譜法（2010版獸藥典附 錄35頁(yè)）測(cè)定；
[0018] (4)黃芪甲苷含量：以黃芪甲苷為對(duì)照品，采用高效液相色譜法（2010版獸藥典附 錄35頁(yè)）測(cè)定。
【具體實(shí)施方式】
[0019] 下列提供的實(shí)施例說(shuō)明了本發(fā)明的具體實(shí)施方案，但本發(fā)明不限于下述實(shí)施例的 范圍。
[0020] 實(shí)施例1提取方法對(duì)黃芪/刺五加復(fù)方提取物有效成分提取率的影響的對(duì)比試驗(yàn)
[0021] (1)黃芪/刺五加復(fù)方提