取物的制備
[0022] 黃芪/刺五加復(fù)方提取物1 :取黃芪飲片80kg、刺五加飲片20kg;粉碎成最粗粉。 加入到多功能提取濃縮機(jī)組中，加8倍量水，浸泡lh。KKTC回流提取2. 0h，提取液經(jīng)濾布 過濾,濾渣再加水提取2次，每次加8倍量水并回流提取2h，分次過濾，合并濾液，趁熱(液溫 為55°C) 10000轉(zhuǎn)/min離心15分鐘，上清液減壓濃縮至相對(duì)密度約I. 1 (彡70°C，約I.Og 生藥/mL)，即得黃芪/刺五加復(fù)方提取物。
[0023] 黃芪/刺五加復(fù)方提取物2:取黃芪飲片80kg、刺五加飲片20kg;粉碎成最粗粉。 加入到多功能提取濃縮機(jī)組中，加8倍量水，浸泡lh。KKTC回流提取2. 0h，提取液經(jīng)濾布 過濾,濾渣再加水提取2次，每次加8倍量水并回流提取2h，分次過濾，合并濾液，趁熱(液溫 為45°C)，10000轉(zhuǎn)/min離心15分鐘，上清液減壓濃縮至相對(duì)密度約I. 1 (彡70°C，約I.Og 生藥/mL)，即得黃芪/刺五加復(fù)方提取物。
[0024] 黃芪/刺五加復(fù)方提取物3:取黃芪飲片80kg、刺五加飲片20kg;粉碎成最粗粉。 加入到多功能提取濃縮機(jī)組中，加8倍量水，浸泡lh。KKTC回流提取2. 0h，提取液經(jīng)濾布 過濾，濾渣再加水提取2次，每次加8倍量水并回流提取2h，分次過濾，合并濾液，冷至室溫 下10000轉(zhuǎn)/min離心15分鐘，上清液減壓濃縮至相對(duì)密度約I. 1 (彡70°C，約I.Og生藥/ mL)，即得黃芪/刺五加復(fù)方提取物。
[0025] 黃芪/刺五加復(fù)方提取物對(duì)比例：根據(jù)【背景技術(shù)】部分中公開號(hào)為CN101559095A的 專利公開的內(nèi)容，稱取80kg刺五加和20kg黃芪，除去雜質(zhì)，混合后置于多功能提取濃縮機(jī) 組中，進(jìn)行兩次提取，第一次以兩種藥材10倍量水進(jìn)行70°C低溫真空動(dòng)態(tài)提取濃縮，煎煮4 小時(shí)，收集濃縮液；第二次以兩種藥材8倍量水進(jìn)行70°C低溫真空動(dòng)態(tài)提取濃縮，煎煮3小 時(shí)，將兩次濃縮液混合，混合藥液濃縮至70°C熱測(cè)相對(duì)密度為1. 15的清膏，清膏經(jīng)醇沉，過 濾至澄清，過濾液回收乙醇后清液減壓濃縮至相對(duì)密度約I.I(< 70°C，約I.Og生藥/mL)， 即得黃芪/刺五加復(fù)方提取物對(duì)比例。
[0026] (2)黃芪/刺五加復(fù)方提取物有效成分的檢測(cè)對(duì)比試驗(yàn)
[0027] 檢測(cè)對(duì)象：上述制備的黃芪/刺五加復(fù)方提取物1、2、3和黃芪/刺五加復(fù)方提取 物對(duì)比例。
[0028] 檢測(cè)方法：
[0029] ①總糖含量的檢測(cè)
[0030] 對(duì)照品溶液的制備：取105°C干燥至恒重的無水葡萄糖0. 25g，精密稱定，置50ml 量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖 勾，備用；
[0031] 供試品溶液的制備：取黃芪/刺五加復(fù)方提取物0. 5g，精密稱定，置50ml量瓶中， 加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，備用；
[0032] 總糖含量的測(cè)定：精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各2ml，分別置25ml量瓶中， 各加5%苯酚溶液lml，硫酸5ml，搖勻，置水浴中加熱15min，取出，冰水冷卻5min，用水稀釋 至刻度，搖勻；另取水2. 0ml，同上平行操作作為空白對(duì)照，照紫外-可見分光光度法（2010 版獸藥典附錄26頁)，在490nm波長處測(cè)定吸收度，計(jì)算，即得。
[0033] ②還原糖含量的檢測(cè)
[0034] 3, 5-二硝基水楊酸試劑（DNS試劑）的配制：將6. 3克DNS和262ml2mol/L氫氧化 鈉，加到500ml含有182克酒石酸鉀鈉的熱水溶液中，再加上5克重苯酚和5克亞硫酸鈉， 攪拌溶解，冷卻后加水定容到1000ml，即制成3, 5-二硝基水楊酸試劑，貯于棕色瓶中備用；
[0035] 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備：準(zhǔn)確稱取干燥至恒重的葡萄糖lg，加少量蒸餾水溶解后 定容至250mL，使葡萄糖濃度為lmg/mL;
[0036]葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：分別吸取 0? 2、0. 4、0. 6、0. 8、1. 0、1. 2、1. 4、1. 6、1. 8、 2.OmL葡萄糖于25mL量瓶中，用蒸餾水補(bǔ)加至2mL，再加入3, 5-二硝基水楊酸溶液3mL，沸 水顯色5min，流水迅速冷卻后用水定容至25mL，搖勻，在540nm波長處測(cè)定吸光值。以2.Oml 蒸餾水代替葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液按同樣顯色方法操作為空白調(diào)零，在540nm處比色，以葡萄糖 量（mg)為橫坐標(biāo)，以吸光值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；
[0037] 還原糖含量的測(cè)定：吸取2mL黃芪/刺五加復(fù)方提取物樣液(可稀釋適當(dāng)倍數(shù))，置 于25mL容量瓶中，再加入3, 5-二硝基水楊酸溶液3mL，沸水顯色5min，然后以流水迅速冷 卻，用水定容至25mL，搖勻。以試劑空白調(diào)零，在540nm處比色，參照葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線求出還 原糖的量；
[0038] 計(jì)算出樣品管光密度值的平均值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上分別查出相應(yīng)的還原糖毫克數(shù)， 按下式計(jì)算出樣品中還原糖的百分含量。
[0039]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種黃芪/刺五加復(fù)方提取物的制備方法，其特征在于，將黃芪、刺五加飲片粉碎， 加水浸泡，提取，過濾，收集濾液，濾渣再提取2次，分次過濾，合并3次所述濾液；將合并后 的濾液趁熱離心；上清液濃縮至相對(duì)密度為1. 05-1. 2,即得所述黃芪/刺五加復(fù)方提取物。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述趁熱離心溫度為40~80°C。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述趁熱離心溫度為50~60°C。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述加水浸泡時(shí)固液比為1:8,浸泡 時(shí)間為1小時(shí)。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述提取溫度為100°C，提取時(shí)間為 每次2小時(shí)。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種黃芪/刺五加復(fù)方提取物的制備方法，包括將黃芪、刺五加飲片粉碎，加水浸泡，提取，過濾，收集濾液，濾渣再提取2次，分次過濾，合并3次所述濾液；將合并后的濾液趁熱離心；上清液濃縮至相對(duì)密度為1.05-1.2，即得所述黃芪/刺五加復(fù)方提取物。該制備方法通過對(duì)黃芪、刺五加復(fù)方采用水提并對(duì)濾液趁熱離心處理的提取工藝提高了所得到的黃芪/刺五加復(fù)方提取物中各有效成分的含量。
【IPC分類】A61K36-481
【公開號(hào)】CN104721251
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201310698088
【發(fā)明人】張?jiān)S科, 劉興金, 張曉會(huì)
【申請(qǐng)人】洛陽惠中獸藥有限公司
【公開日】2015年6月24日
【申請(qǐng)日】2013年12月18日