天然萘醌二聚體及其在制備抗菌藥物中的用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥學(xué)領(lǐng)域，涉及從中藥材分離得到的天然萘醌二聚體及其在制備抗菌 藥物中的用途，尤其是在抗耐藥金葡菌藥物中的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 研究報(bào)道，耐甲氧西林金黃葡萄球菌（Methicillin-ResistantStaphylococcusa ureus，MRSA)為醫(yī)院內(nèi)最常見的傳染病菌之一，除了淺表皮膚感染，它還可以引起人體深 度感染。有研究顯示，對(duì)所有內(nèi)酰胺類抗生素如青霉素等藥物具有耐藥性的MRSA，對(duì)大環(huán) 內(nèi)酯，氟喹諾酮，四環(huán)素等抗生素也都產(chǎn)生了耐藥性，這使得它的感染變得更加難以治療。 目前，可用于治療MRSA的抗生素僅有萬古霉素，然而不幸的是，完全抗萬古霉素MRSA菌株 2002年在美國已經(jīng)出現(xiàn)。我國近年來由于抗生素廣泛的使用，甚至濫用，特別是萬古霉素 在多家醫(yī)院成為常規(guī)抗生素類用藥之后，這一形勢(shì)變得愈加嚴(yán)峻。有關(guān)部門和人員認(rèn)為，除 了采取措施通過限制濫用抗生素以減緩耐藥MRSA增長的速度，同時(shí)必須研發(fā)新的抗耐藥 MRSA藥物，以防現(xiàn)有的抗菌藥物無法起作用時(shí)，細(xì)菌感染的大規(guī)模爆發(fā)。
[0003] 諾氟沙星是一種氟喹諾酮類抗生素，1986年開始被用于臨床。因它對(duì)革蘭氏陽性 菌及革蘭氏陰性菌，尤其是金黃色葡萄球菌，具有較強(qiáng)的抑制作用而廣泛用于尿道、呼吸道 等的抗感染治療。也正因?yàn)橹Z氟沙星在臨床及畜牧業(yè)的廣泛應(yīng)用，導(dǎo)致細(xì)菌對(duì)其產(chǎn)生了嚴(yán) 重耐藥性，從而限制了諾氟沙星的應(yīng)用。研究顯示，細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性的機(jī)制多樣，其中之一 是細(xì)菌外排泵。因此，選擇具有NorA外泵基因的MRSA細(xì)菌株作為外泵抑制劑的篩選靶標(biāo) 被認(rèn)為是尋找具有外泵抑制作用的抗耐藥金葡菌抗生素增敏劑的一種重要途徑。
[0004]中藥軟紫草（Arnebiaeuchroma(Royle)Johnst.)，是紫草科（Boraginaceae)多年 生草本植物。作為藥用紫草的主要來源，紫草始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為中品。味苦，性寒。 有涼血、活血、解毒和透疹的功能，主治血熱毒盛、斑疹紫黑、麻疹不透、瘡瘍、濕疹、水火燙 傷等。
[0005] 紫草中的特征性和主要化學(xué)成分是萘醌類化合物，到目前為止，從紫草中分離得 到的萘醌類化合物母核結(jié)構(gòu)為5, 8-二羥基-2-異己烯-1，4-萘醌。所不同的是旋光性、側(cè) 鏈中羥基的位置和羥基酯化的酸。目前在紫草屬植物中發(fā)現(xiàn)的幾類主要化合物在多種紫草 中均有存在，并具有相應(yīng)的藥理活性。作為紫草的主要成分的萘醌類化合物，具有抗炎、抗 菌、抗腫瘤和抗凝血等多方面的活性。
[0006] 本發(fā)明的申請(qǐng)人擬提供與目前報(bào)道的二聚體結(jié)構(gòu)不同的為紫草萘醌形成的二聚 體結(jié)構(gòu)化合物，進(jìn)一步將該萘醌二聚體天然成分與諾氟沙星制備組合藥物，以期降低諾氟 沙星的最低抑菌濃度，對(duì)諾氟沙星產(chǎn)生抗耐藥金葡菌的增效作用。
[0007] 于本發(fā)明相關(guān)的現(xiàn)有技術(shù)有：
[0008] [1]BeardenDT,DanzigerLH.Mechanismofactionofandresistancetoquinolones. Pharmacotherapy2001, 21:40-61.
[0009] [2]Holmes，B，etal.Norfloxacin.Drugs. 1985, 30 (6) :482-513.
[0010] [3]MarkhamPN,NeyfakhAA.InhibitionofthemultidrugtransporterNorAInStaph ylococcusaureuspreventsemergenceofnorfloxacinresistance.AntimicrobialAgentsC hemotheropy. 1996,40(11) :2673-2674.
[0011] [4]HooperDC.Emergingmechanismsoffluoroquinoloneresistance.EmergingInf ectiousDiseases. 2001，7:337 - 341.
[0012] [5]WangW.J. ,BaiJ.Y. ,LiuD.P. ,XueL.M. ,ZhuX. Y.TheantiinflammatoryactivityofshikoninanditsinhibitoryeffectonleukotrieneB4 biosynthesis.ActaPharmaceuticaSinica，1994, 29:161-165.
[0013] [6]ShenC.C. ,SyuW.J. ,LiS.Y. ,LinC.H. ,LeeG.H. ,SunC. M.AntimicrobialActivitiesofNaphthazarinsfromArnebiaeuchroma.JournalofNatural Products，2002, 65:1857-1862.
[0014] [7]LiuH，JinYS，SongY，YangXN，YangXW，GengDSandChenHS. ThreenewcompoundsfromArnebiaeuchroma.JournalofAsianNaturalProductsResearc h，2010, 12(4) :286 - 292.。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0015] 本發(fā)明的目的是提供新的天然萘醌二聚體及其在制備抗菌藥物中的用途，尤其是 在抗耐藥金葡菌藥物中的用途。
[0016] 本發(fā)明的天然萘醌二聚體為可用作抗耐藥增效劑的天然物質(zhì)，其結(jié)構(gòu)特征在于， 構(gòu)成化合物的單元為一個(gè)去氧紫草素與一個(gè)具有紫草萘醌類化合物紫草素（Alkanin和 Shikonin)及其衍生物，通過萘環(huán)之間結(jié)合形成的二聚體結(jié)構(gòu)。
[0017]本發(fā)明提供了與目前報(bào)道的二聚體結(jié)構(gòu)不同的為紫草萘醌形成的二聚體結(jié)構(gòu)化 合物，進(jìn)一步將該萘醌二聚體天然成分與諾氟沙星制備組合藥物，以期降低諾氟沙星的最 低抑菌濃度，對(duì)諾氟沙星產(chǎn)生抗耐藥金葡菌的增效作用。
[0018] 本發(fā)明從軟紫草(又稱新疆紫草）中分離得到萘醌二聚體化合物，經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明，這 些化合物本身不具有抗菌活性，但與諾氟沙星共同給藥，能使抗生素最低抑菌濃度分別降 低4 - 64倍，表現(xiàn)出較強(qiáng)的協(xié)同抗耐藥菌作用。
[0019] 本發(fā)明的化合物通過下述方法制備：
[0020] 采用紫草科（Boraginaceae)紫草屬（Arnebia)植物軟紫草(又稱新疆紫草 (Arnebiaeuchroma))的根，粉碎,95%乙醇45攝氏度以下浸泡提取，合并提取液減壓濃 縮至乙醇全部揮發(fā)完畢，加水至浸膏混懸，用乙酸乙酯萃??；有機(jī)相減壓蒸干后用硅膠和 RP-18正反相柱層析多次分離得到紫色固體化合物。
[0021] 本發(fā)明所涉及萘醌二聚體化合物1 _ll(C〇mp〇undl-ll)其藥材可通過市購渠道 得到。本發(fā)明制得的化合物其理化數(shù)據(jù)如下所示：
[0022]
[0023] 本發(fā)明通過下述實(shí)驗(yàn)表明所述化合物具有抗菌及增效作用：
[0024] C?細(xì)菌培養(yǎng)及檢測(cè)
[0025]細(xì)菌培養(yǎng)在細(xì)胞培養(yǎng)室超凈臺(tái)中操作，在96孔板中進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)