治療杜興氏肌營(yíng)養(yǎng)不良的卵泡抑素的制作方法
【專利說明】治療杜興氏肌營(yíng)養(yǎng)不良的卵泡抑素
[0001] 相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用
[0002] 本申請(qǐng)要求2013年1月25日提交的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)序列號(hào)61/756, 996和2013 年12月13日提交的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)序列號(hào)61/915, 733的優(yōu)先權(quán)，所述美國(guó)臨時(shí)專利申 請(qǐng)的公開內(nèi)容據(jù)此整體并入本文。
[0003] 背景
[0004] 杜興氏肌營(yíng)養(yǎng)不良（Duchenne muscular dystrophy，DMD)是隱性X染色體關(guān)聯(lián)形 式的肌營(yíng)養(yǎng)不良，其導(dǎo)致肌肉退化以及最終死亡。所述病癥是由位于人X染色體上的肌營(yíng) 養(yǎng)不良蛋白（dystrophin)基因的突變引起，所述基因編碼蛋白質(zhì)肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白，所述肌 營(yíng)養(yǎng)不良蛋白是肌肉組織內(nèi)的一種對(duì)細(xì)胞膜的肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白聚糖復(fù)合物（DGC)提供結(jié) 構(gòu)穩(wěn)定性的重要結(jié)構(gòu)組分。肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白連接內(nèi)部細(xì)胞質(zhì)肌動(dòng)蛋白微絲網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)和細(xì)胞 外基質(zhì)，從而對(duì)肌肉纖維提供物理強(qiáng)度。因此，改變肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白或不存在肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋 白會(huì)導(dǎo)致肌纖維膜功能異常。盡管兩種性別的人士均可攜帶突變，但男孩通常具有伴有早 期失能和死亡的重度表型，而攜帶突變的女性通常展現(xiàn)輕度得多的表型。
[0005] 目前，不存在用于DMD的已知治愈方法。已探宄許多治療途徑，包括基因療法和皮 質(zhì)類固醇的各種施用方案。盡管這些治療中的一些可延遲某些征象和癥狀，但目前不存在 用于DMD患者的滿意治療選項(xiàng)。
[0006] 發(fā)明概述
[0007] 本發(fā)明尤其提供用于基于卵泡抑素（follistatin)蛋白療法來治療肌營(yíng)養(yǎng) 不良，具體來說杜興氏肌營(yíng)養(yǎng)不良（DMD)和/或貝克爾肌營(yíng)養(yǎng)不良（Becker Muscular Dystrophy)的改進(jìn)方法和組合物。如本文中，包括以下實(shí)施例中所述，本發(fā)明者首次證明 向DMD動(dòng)物模型中全身性施用重組卵泡抑素蛋白（例如卵泡抑素-Fc重組融合蛋白）導(dǎo)致 全身各種組織中的有效肌肉生長(zhǎng)，并且減輕DMD的特征性癥狀肌肉纖維化和/或壞死。此 外，本發(fā)明者也已證明本發(fā)明的卵泡抑素-Fc融合蛋白具有多達(dá)約5天的延長(zhǎng)血清半衰期。 在不希望受任何理論束縛下，預(yù)期出乎意料長(zhǎng)久的血清半衰期可已促成優(yōu)越體內(nèi)功效。實(shí) 際上，在本發(fā)明之前，已知卵泡抑素是肌抑素和活化素的調(diào)節(jié)劑，所述肌抑素和活化素均是 肌肉生長(zhǎng)的重要負(fù)性調(diào)控劑。然而，在本發(fā)明之前，據(jù)報(bào)道卵泡抑素具有特別短暫的血清半 衰期，此構(gòu)成將卵泡抑素開發(fā)成蛋白質(zhì)治療劑的重大障礙。舉例來說，典型可商購獲得的野 生型卵泡抑素（FS315)蛋白具有血清半衰期約1小時(shí)。Fc-融合蛋白已用于延長(zhǎng)卵泡抑素 的血清半衰期。然而，由于Fc結(jié)構(gòu)域的尺寸較大，以及卵泡抑素蛋白的尺寸相對(duì)較小，認(rèn)為 Fc結(jié)構(gòu)域直接融合于卵泡抑素蛋白可干擾野生型卵泡抑素蛋白的正常結(jié)構(gòu)和功能。所報(bào)道 的卵泡抑素的不良藥物動(dòng)力學(xué)/藥力學(xué)（PK/PD)性質(zhì)和與卵泡抑素-Fc融合蛋白相關(guān)的不 確定性已阻礙科學(xué)家和臨床醫(yī)師進(jìn)一步將卵泡抑素開發(fā)成用于DMD或其它肌營(yíng)養(yǎng)不良的 蛋白質(zhì)療法。實(shí)際上，在本發(fā)明之前，基因療法已成為用于DMD的基于卵泡抑素的療法的焦 點(diǎn)。由本發(fā)明者顯示的出乎意料優(yōu)越的體內(nèi)功效和半衰期首次確定卵泡抑素可為用于治療 DMD的有效蛋白質(zhì)治療劑。
[0008] 在一個(gè)方面，本發(fā)明提供治療杜興氏肌營(yíng)養(yǎng)不良（DMD)的方法，其包括向罹患或 易患DMD的個(gè)體施用有效量的重組卵泡抑素蛋白以使DMD的至少一種癥狀或特征在強(qiáng)度、 嚴(yán)重性或頻度方面得以降低，或延遲發(fā)作。在一些實(shí)施方案中，DMD的至少一種癥狀或特征 選自由以下組成的組：肌肉消耗、肌肉無力、肌肉脆弱、關(guān)節(jié)攣縮、骨骼變形、脂肪浸潤(rùn)肌肉、 肌肉被非收縮性組織替換（例如肌肉纖維化）、肌肉壞死、心肌病、吞咽受損、腸和膀胱功能 受損、肌肉缺血、認(rèn)知功能損害（例如學(xué)習(xí)困難、神經(jīng)行為病癥的危險(xiǎn)較高、認(rèn)知缺陷）、行 為功能障礙、社交損害、脊柱側(cè)凸和呼吸功能受損。
[0009] 在一些實(shí)施方案中，適于本發(fā)明的重組卵泡抑素蛋白包括與野生型人卵泡抑素蛋 白
[0010] GNCWLRQAKNGRCQVLYKTELSKEECCSTGRLSTSWTEEDVNDNTLFKWMIFNGGAPNCIPCKETCE NVDCGPGKKCRMNKKNKPRCVCAPDCSNITWKGPVCGLDGKTYRNECALLKARCKEQPELEVQYQGRCKKTCRDV FCPGSSTCVVDQTNNAYCVTCNRICPEPASSEQYLCGNDGVTYSSACHLRKATCLLGRSIGLAYEGKCIKAKSCE DIQCTGGKKCLWDFKVGRGRCSLCDELCPDSKSDEPVCASDNATYASECAMKEAACSSGVLLEVKHSGSCNSISE DTEEEEEDEDQDYSFPISSILEW(SEQ ID N0:1)至少 50% (例如至少 55%、60%、65%、70%、 75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)相同的氨基酸序列。
[0011] 在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素蛋白包括與野生型人卵泡抑素蛋白SEQ ID NO: 1至少70%相同的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素蛋白包括與野生型人 卵泡抑素蛋白SEQ ID NO: 1至少80%相同的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑 素蛋白包括與野生型人卵泡抑素蛋白SEQ ID NO: 1至少90%相同的氨基酸序列。在一些實(shí) 施方案中，重組卵泡抑素蛋白包括與野生型人卵泡抑素蛋白SEQ ID NO: 1至少95%相同的 氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素蛋白包括與野生型人卵泡抑素蛋白SEQ ID NO: 1相同的氨基酸序列。
[0012] 在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素蛋白相較于野生型人卵泡抑素蛋白包含一個(gè)或 多個(gè)缺失、突變或插入。在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素蛋白包含SEQ ID NO: 1的氨基酸 殘基212-288(其對(duì)應(yīng)于結(jié)構(gòu)域3)的缺失。在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素蛋白包含肝 素結(jié)合位點(diǎn)。
[0013] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療杜興氏肌營(yíng)養(yǎng)不良（DMD)的方法，其包括向 罹患或易患DMD的個(gè)體施用有效量的重組卵泡抑素蛋白以使DMD的至少一種癥狀或特征在 強(qiáng)度、嚴(yán)重性或頻度方面得以降低，或延遲發(fā)作，其中所述重組卵泡抑素蛋白包含與GNCWLR QAKNGRCQVLYKTELSKEECCSTGRLSTSWTEEDVNDNTLFKWMIFNGGAPNCIPCKETCENVDCGPGKKCRMNKKN KPRCVCAPDCSNITWKGPVCGLDGKTYRNECALLKARCKEQPELEVQYQGRCKKTCRDVFCPGSSTCVVDQTNNAYC VTCNRICPEPAS SEQYLCGNDGVTYSSACHLRKATCLLGRSIGLAYEGKCISISEDTEEEEEDEDQDYSFPISSILE W(SEQ ID N0:2)至少 50% (例如至少 55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、 96%、97%、98%、99%或100%)相同的氨基酸序列。
[0014] 在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素蛋白包括與SEQ ID NO:2至少70%相同的氨基 酸序列。在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素蛋白包括與SEQ ID NO:2至少80%相同的氨基 酸序列。在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素蛋白包括與SEQ ID NO:2至少90%相同的氨基 酸序列。在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素蛋白包括與SEQ ID NO:2至少95%相同的氨基 酸序列。在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素蛋白包括與SEQ ID N0:2相同的氨基酸序列。
[0015] 在一些實(shí)施方案中，DMD的至少一種癥狀或特征選自由以下組成的組：肌肉消耗、 肌肉無力、肌肉脆弱、肌肉肥大、肌肉假性肥大、關(guān)節(jié)攣縮、骨骼變形、心、肌病、吞咽受損、腸 和膀胱功能受損、肌肉缺血、認(rèn)知損害、行為功能障礙、社交損害、脊柱側(cè)凸和呼吸功能受 損。
[0016] 在一些實(shí)施方案中，使重組卵泡抑素蛋白融合于Fc結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中， 適于本發(fā)明的Fc結(jié)構(gòu)域包含與
[0020] 在一些實(shí)施方案中，F(xiàn)c結(jié)構(gòu)域包含與SEQ ID NO:3、4或14至少80%相同的氨基 酸序列。在一些實(shí)施方案中，F(xiàn)c結(jié)構(gòu)域包含與SEQ ID N0:3、4或14至少90%相同的氨基 酸序列。在一些實(shí)施方案中，F(xiàn)c結(jié)構(gòu)域包含與SEQ ID N0:3、4或14至少95%相同的氨基 酸序列。
[0021] 在一些實(shí)施方案中，合適的Fc結(jié)構(gòu)域包含一個(gè)或多個(gè)改進(jìn)Fc結(jié)構(gòu)域與FcRn受體 之間的結(jié)合，從而導(dǎo)致血清半衰期延長(zhǎng)的突變。在一些實(shí)施方案中，合適的Fc結(jié)構(gòu)域在對(duì) 應(yīng)于人 IgGl 的 Thr 250、Met 252、Ser 254、Thr 256、Thr 307、Glu 380、Met 428、His 433 和/或Asn 434的一個(gè)或多個(gè)位置處包含一個(gè)或多個(gè)突變。在特定實(shí)施方案中，合適的Fe 結(jié)構(gòu)域含有突變H433K(His433Lys)和/或N434F(Asn434Phe)。在特定實(shí)施方案中，合適的 Fc結(jié)構(gòu)域包含以下所示的并有突變H433K(His433Lys)和N434F(Asn434Phe)的序列：
[0023] 在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素蛋白是通過接頭融合于Fc結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施 方案中，接頭是包含3-100個(gè)氨基酸的肽。在一些實(shí)施方案中，接頭不是由ALEVLFQGP組 成的接頭。在一些實(shí)施方案中，接頭包含在10-100個(gè)、10-90個(gè)、10-80個(gè)、10-70個(gè)、10-60 個(gè)、10-50個(gè)、10-40個(gè)、10-30個(gè)、10-20個(gè)、10-15個(gè)之間的氨基酸。在一些實(shí)施方案中，接 頭包含至少 10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90 或 95 個(gè)氨基酸。在 一些實(shí)施方案中，接頭包含與GAPGGGGGAAAAAGGGGGGAP (GAG接頭，SEQ ID NO: 5)至少50% (例如至少55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%) 相同的序列。在一些實(shí)施方案中，接頭包含與GAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGA ￡(GAG2 接頭，SEQ ID N0:6)至少 50% (例如至少 55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、 90%、95%、96%、97%、98%或99%)相同的序列。在一些實(shí)施方案中，接頭包含與^AEGG GGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAP(GAG3 接頭，SEQ ID NO:7)至 少 50% (例如至少 55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或 99%)相同的序列。在一些實(shí)施方案中，接頭包含與SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7相同的序列。
[0024] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種重組卵泡抑素融合蛋白，其包括卵泡抑素多 肽、Fc結(jié)構(gòu)域和使所述卵泡抑素多肽與所述Fc結(jié)構(gòu)域締合的長(zhǎng)度是至少10 (例如至少15、 20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90 或 95)個(gè)氨基酸的接頭。在一些實(shí)施 方案中，本發(fā)明提供一種重組卵泡抑素融合蛋白，其包括卵泡抑素多肽、Fc結(jié)構(gòu)域和使所述 卵泡抑素多肽與所述Fc結(jié)構(gòu)域締合的接頭，其中所述接頭不是由ALEVLFQGP組成的接頭。 在一些實(shí)施方案中，合適的卵泡抑素多肽包含與野生型人卵泡抑素蛋白（SEQ ID N0:1)至 少 50% (例如至少 55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、 99%或100%)相同的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素融合蛋白能夠結(jié)合活 化素、肌抑素和/或GDF-11，并且具有在約0. 5-10天的范圍內(nèi)的體內(nèi)半衰期。
[0025] 在特定實(shí)施方案中，適于本發(fā)明的重組卵泡抑素蛋白包含與SEQ ID N0:8
97%、98%、99%或100% )相同的氨基酸序列。
[0030] 在特定實(shí)施方案中，適于本發(fā)明的重組卵泡抑素蛋白包含與SEQ ID NO: 10
97%、98%、99%或100% )相同的氨基酸序列。
[0039] 在一些實(shí)施方案中，適于本發(fā)明的重組卵泡抑素蛋白是由哺乳動(dòng)物細(xì)胞產(chǎn)生。在 一些實(shí)施方案中，哺乳動(dòng)物細(xì)胞是人細(xì)胞。在一些實(shí)施方案中，哺乳動(dòng)物細(xì)胞是中國(guó)倉鼠卵 巢（CHO)細(xì)胞或HT1080細(xì)胞。
[0040] 應(yīng)了解本發(fā)明的實(shí)施方案可通過多種途徑來遞送。在一些實(shí)施方案中，重組卵泡 抑素蛋白是全身性施用。在一些實(shí)施方案中，全身性施用選自靜脈內(nèi)、皮內(nèi)、吸入、經(jīng)皮（表 面）、眼內(nèi)、肌肉內(nèi)、皮下、肌肉內(nèi)、經(jīng)口和/或經(jīng)粘膜施用。
[0041] 實(shí)施方案可通過許多給藥方案來施用。在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素蛋白是 每?jī)稍?、每月、每三周、每?jī)芍?、每周、每日或在可變間隔下施用。
[0042] 在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素蛋白是向一種或多種選自橫紋?。ɡ绻趋?肌、心肌）的靶標(biāo)組織遞送。在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素蛋白是向心臟遞送。在一些 實(shí)施方案中，重組卵泡抑素蛋白是向骨骼肌遞送。在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素蛋白是 向一種或多種選自表1的骨骼肌遞送。在一些實(shí)施方案中，橫紋?。ɡ绻趋兰。┻x自由 三頭肌、脛骨前肌、比目魚肌、腓腸肌、二頭肌、斜方肌、三角肌、四頭肌和膈肌組成的組。
[0043] 在一些實(shí)施方案中，施用重組卵泡抑素蛋白會(huì)導(dǎo)致肌肉再生、纖維化減輕、肌肉力 量增加、靈活性增加、活動(dòng)范圍增加、耐力增加、易疲勞性降低、血流增加、認(rèn)知改進(jìn)、肺功能 改進(jìn)、炎癥抑制、肌肉纖維化和/或壞死減輕。
[0044] 在另一方面，本發(fā)明提供用于本文所述的各種方法中的組合物。在一些實(shí)施方案 中，本發(fā)明提供重組卵泡抑素融合蛋白，其包括卵泡抑素多肽、Fc結(jié)構(gòu)域和使所述卵泡抑素 多肽與所述Fc結(jié)構(gòu)域締合的接頭，其中所述卵泡抑素多肽包含與野生型人卵泡抑素蛋白 (SEQ ID N0:1)至少 50% (例如至少 55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、 96%、97%、98%、99%或100%)相同的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素融 合蛋白能夠結(jié)合活化素、肌抑素和/或GDF-11。在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素融合蛋 白的體內(nèi)半衰期大于約2天（例如大于約2. 5天、約3天、約3. 5天、約4天、約4. 5天、約 5天、約5. 5天、約6天）。在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素融合蛋白的體內(nèi)半衰期在約 2-10天的范圍內(nèi)（例如在約2. 5-10天、約3-10天、約3. 5-10天、約4-10天、約4. 5-10天、 約5-10天、約3-8天、約3. 5-8天、約4-8天、約4. 5-8天、約5-8天、約3-6天、約3. 5-6天、 約4-6天、約4. 5-6天、約5-6天的范圍內(nèi)）。在一些實(shí)施方案中，體內(nèi)半衰期是在小鼠、大 鼠、非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物和/或人中的一個(gè)或多個(gè)中測(cè)量。在一些實(shí)施方案中，卵泡抑素多肽具 有與野生型人卵泡抑素蛋白（SEQ ID NO: 1)至少70%相同的氨基酸序列。在一些實(shí)施方 案中，卵泡抑素多肽具有與野生型人卵泡抑素蛋白（SEQ ID NO: 1)至少80%相同的氨基酸 序列。在一些實(shí)施方案中，卵泡抑素多肽具有與野生型人卵泡抑素蛋白（SEQ ID N0:1)至 少90 %相同的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，卵泡抑素多肽具有與野生型人卵泡抑素蛋 白（SEQ ID NO: 1)至少95%相同的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，卵泡抑素多肽具有與 野生型人卵泡抑素蛋白（SEQ ID NO: 1)相同的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，卵泡抑素 多肽含有SEQ ID NO: 1的氨基酸殘基212-288(其對(duì)應(yīng)于結(jié)構(gòu)域3)的缺失。在各種實(shí)施方 案中，卵泡抑素多肽含有硫酸肝素結(jié)合位點(diǎn)。
[0045] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供重組卵泡抑素融合蛋白，其包括卵泡抑素多肽、Fc 結(jié)構(gòu)域和使所述卵泡抑素多肽與所述Fc結(jié)構(gòu)域締合的接頭，其中所述卵泡抑素多肽包含
[0046] 在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素融合蛋白能夠結(jié)合活化素、肌抑素和/或 GDF-11。在一些實(shí)施方案中，重組卵泡抑素融合蛋白的體內(nèi)半衰期大于約2天（例如大于 約2. 5天、約3天、約3. 5天、約4天、約4. 5天、約5天、約5. 5天、約6天）。在一些實(shí)施方 案中，重組卵泡抑素融合蛋白的體內(nèi)半衰期在約2-10天的范圍內(nèi)（例如在約2. 5-10天、約 3-10天、約3. 5-10天、約4-10天、約4. 5-10天、約5-10天、約3-8天、約3. 5-8天、約4-8 天、約4. 5-8天、約5-8天、約3-6天、約3. 5-6天、約4-6天、約4. 5-6天、約5-6天的范圍 內(nèi)）。在一些實(shí)施方案中，體內(nèi)半衰期是在小鼠、大鼠、非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物和/或人中的一個(gè)或 多個(gè)中測(cè)量。
[0047] 在一些實(shí)施方案中，F(xiàn)c結(jié)構(gòu)域是IgGlFc結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，F(xiàn)c結(jié)構(gòu)域具
[0050] 在一些實(shí)施方案中，合適的Fc結(jié)構(gòu)域包含一個(gè)或多個(gè)改進(jìn)Fc結(jié)構(gòu)域與FcRn受體 之間的結(jié)合，從而導(dǎo)致血清半衰期延長(zhǎng)的突變。在一些實(shí)施方案中，F(xiàn)c結(jié)構(gòu)域在對(duì)應(yīng)于人 IgGl 的 Thr 250、Met 252、Ser 254、Thr 256、Thr 307、Glu 380、Met 428、His 433和 /或 Asn 434的一個(gè)或多個(gè)位置處包含一個(gè)或多個(gè)突變。在特定實(shí)施方案中，合適的Fe結(jié)構(gòu)域 含有突變H433K(His433Lys)和/或N434F(Asn434Phe)。在特定實(shí)施方案中，合適的Fc結(jié) 構(gòu)域包含以下所示的并有突變H433K(His433Lys)和N434F(Asn434Phe)的序列：
[0052] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的重組卵泡抑素融合蛋白包括接頭以使通過所述接頭 達(dá)成的Fc融合不實(shí)質(zhì)上改變卵泡抑素與同源配體的結(jié)合性質(zhì)，包括維持缺乏與肝素結(jié)合。 在一些實(shí)施方案中，合適的接頭是包含3-60個(gè)氨基酸的肽。在一些實(shí)施方案中，合適的接 頭是包含至少 1〇(例如至少 15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90 或 95) 個(gè)氨基酸的肽。在一些實(shí)施方案中，合適的接頭包含與eAEGGGGGAAAAAGGGGGSAE(GAG接頭， SEQ ID NO:5)至少 50% (例如至少 55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、 96%、97%、98%、99%或100%)相同的序列。在一些實(shí)施方案中，合適的接頭包含與GAP GGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAP (GAG2 接頭，SEQ ID NO: 6)至少 50% (例如至少 55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)相同 的序列。在一些實(shí)施方案中，合適的接頭包含與GAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGG GAPGGGGGAAAAAGGGGGGAP (GAG3 接頭，SEQ ID NO: 7)至少 50 % (例如至少 55 %、60 %、65 %、 70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或100%)相同的序列。
[0053] 在特定實(shí)施方案中，由本發(fā)明提供的重組卵泡抑素融合蛋白包含與SEQIDN0:8、 9、10、11、16 或 17 至少 50% (例如至少 55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、 95%、96%、97%、98%、99%或100%)相同的氨基酸序列。
[0054] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含編碼本文所述的重組卵泡抑素融合蛋白的核 苷酸序列的核酸。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種包含核酸的細(xì)胞，所述核酸包含編碼 本文所述的重組卵泡抑素融合蛋白的核苷酸序列。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含本 文所述的重組卵泡抑素融合蛋白和藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物。
[0055] 如本申請(qǐng)中所用，術(shù)語"約"和"近似"用作等效語。與或不與約/近似一起用于 本申請(qǐng)中的任何數(shù)字都意圖涵蓋由相關(guān)領(lǐng)域普通技術(shù)人員所了解的任何正常波動(dòng)。
[0056] 本發(fā)明的其它特征、目標(biāo)和優(yōu)勢(shì)在以下詳細(xì)描述中顯而易知。然而，應(yīng)了解盡管指 示本發(fā)明的實(shí)施方案，但詳細(xì)描述是通過僅僅說明而非限制的方式給出。在本發(fā)明的范圍 內(nèi)的各種變化和修改將根據(jù)詳細(xì)描述而變得為本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易知。
[0057] 附圖簡(jiǎn)述
[0058] 圖式僅出于說明目的而出于非限制目的。
[0059] 圖1顯示說明相較于可商購獲得的可溶性活化素受體（sActRIIB)，F(xiàn)S315_Fc不通 過Smad 1/5/8路徑抑制BMP-9或BMP-10信號(hào)傳導(dǎo)的示例性結(jié)果。圖IA顯示BMP-9抑制 測(cè)定的示例性結(jié)果，而圖IB顯示BMP-10抑制測(cè)定的示例性結(jié)果。
[0060] 圖2顯示說明FS315-FC抑制肌抑素和活化素介導(dǎo)的Smad 2/3信號(hào)傳導(dǎo)的示例性 結(jié)果。圖2A顯示肌抑素抑制測(cè)定的示例性結(jié)果，而圖2B顯示活化素A抑制測(cè)定的示例性 結(jié)果。
[0061] 圖3顯示說明跨越各組織的PK曲線的示例性結(jié)果。一示例性卵泡抑素-Fc蛋白 具有于小鼠血清中的血清半衰期~5天（圖3A)和組織半衰期2 - 5天（圖3B)。
[0062] 圖4顯不說明在4和10周暴露于lmg/kg FS315_mFc以及6周暴露于8mg/kg之 后，示例性卵泡抑素-Fc蛋白對(duì)四頭?。▓D4A)、腓腸?。▓D4B)、脛骨