)會產(chǎn)生肌肉質(zhì)量增加的趨勢，甚至在lmg/kg的低劑量下。在這個實施例 中，術(shù)語 " FS315-GAG3-mFc "、" FS315-Fc " 和 " FS315-mFc " 可互換使用。
[0244] 具體來說，在這個研宄中，45只mdx小鼠用空媒介物、0mg/kg、l. Omg/kg或8mg/kg FS315-GAG3-mFc治療。媒介物組或治療組中的動物持續(xù)研宄的持續(xù)時間每周接受兩次皮下 (肩胛間）注射，并且通過眶后取樣來評估卵泡抑素融合蛋白水平。
[0245] 半數(shù)媒介物治療的對照動物與lmg/kg FS315-FC組一起被處死，并且剩余媒介物 治療的動物以及未治療的對照動物與8mg/kg治療組一起被處死。示例性治療時程是如表 5A和表5B中所不：
[0246] 表5. mdx小鼠的示例性注射和取樣時程
[0247] 5A: lmg/kg FS315-GAG3_mFc 治療過程
[0252] 媒介物治療組相對于lmg/kg FS315-FC組的關(guān)于肌肉重量的示例性數(shù)據(jù)顯示于圖 4中。具體來說，圖4顯示在用lmg/kg治療4和10周，以及用8mg/kg治療6周之后，四頭 ?。▓D4A)、腓腸肌（圖4B)、脛骨前?。▓D4C)和三頭?。▓D4D)的以克計的肌肉重量。肌 肉重量數(shù)據(jù)是關(guān)于基線體重加以調(diào)整。
[0253] 在施用之后卵泡抑素的循環(huán)水平的示例性數(shù)據(jù)顯示于圖5中。具體來說，圖5A顯 示用每周兩次lmg/kg注射液治療的動物的血清中的FS315-mFc的水平，并且圖5B顯示每 周兩次用8mg/kg治療的動物的血清中的FS315-mFc的水平。
[0254] 如圖4-5中所示，存在FS315-FC使DMD的動物模型中的肌肉質(zhì)量增加的明確指 不O
[0255] 實施例4.重組卵泡抑素-Fc融合蛋白的體內(nèi)功效
[0256] 這個實施例證明施用卵泡抑素-Fc融合蛋白會體內(nèi)導(dǎo)致肌肉肥大（例如肌肉質(zhì)量 和肌纖維直徑增加）。
[0257] 在這個研宄中，C57BL/10小鼠與mdx小鼠兩者均用FS315-GAG3-mFc直接向腓腸肌 中（肌肉內(nèi)，IM)注射。具體來說，各小鼠每周兩次接受2次注射，各側(cè)1次。左側(cè)腓腸肌 接受20 y L lmg/mL FS315-GAG3-mFc溶液，每次注射總計20 y g蛋白質(zhì)。右側(cè)腓腸肌接受 20 y L PBS (媒介物對照）。每周兩次進行注射，持續(xù)總計4周。在最終注射之后24小時， 處死小鼠，并且將腓腸肌小心解剖并稱重。包括在相同劑量下接受可溶性活化素IIB型受 體-Fc小鼠嵌合體（sActRIIB-mFc，R&D Systems)的一組作為陽性對照。此外，包括未治療 的小鼠作為陰性對照。
[0258] 圖6顯示在每周兩次用20 y g FS315-mFc或sActRIIB-mFc治療之后，C57對照小 鼠以及mdx小鼠中的肌肉質(zhì)量均顯著增加。圖6中表示的研宄設(shè)計和數(shù)值數(shù)據(jù)顯示于下表 6中：
[0259] 表6?肌肉重量
[0260]
[0261] *用于這個實施例中的所有卵泡抑素構(gòu)建體都含有GAG3接頭。
[0262] **P值由成對t檢驗獲得，并且進行邦弗倫尼（Bonferroni)校正（校正6種統(tǒng)計 檢驗）
[0263] 通過對注射的腓腸肌進行數(shù)字完全載片掃描來測定肌纖維直徑。將樣本固定 在10 %中性緩沖鹽水中，處理并包埋在石蠟中，切割成5 ym切片，并且用Alexa f Iuor 488綴合的麥胚凝集素（WGA)染色，這是一種染色肌肉細胞膜的方法。使用圖像分析軟件 (ImageScope和ImagePro Plus)分析掃描的圖像。對于各肌纖維，通過在2度間隔下，穿過 肌纖維的質(zhì)心來測量肌纖維橫截面長度來測定平均直徑。
[0264] 與圖6 -致，圖15說明用FS315_mFc治療的腓腸肌的肌纖維直徑增加。這個增加 發(fā)生在C57(WT，圖15A)與mdx小鼠（圖15B)兩者中。對向較大直徑轉(zhuǎn)變的說明指示肌肉 重量增加是肌肉肥大的結(jié)果。表7是示例性平均直徑變化和相應(yīng)統(tǒng)計分析的概述。
[0265] 表 7
[0266]
[0267] 所用統(tǒng)計模型是分層線性模型（HLM)，其能夠慮及在各動物內(nèi)進行的多個測量。各 品系和治療組內(nèi)未治療腿與治療腿之間的差異是高度顯著的（p〈〇. 〇〇〇 1，此確證肌肉重量 數(shù)據(jù)）。
[0268] 這些數(shù)據(jù)證明卵泡抑素，具體來說卵泡抑素-Fc融合蛋白可有效誘導(dǎo)肌肉生長， 并且治療與DMD相關(guān)的肌肉萎縮。
[0269] 實施例5.示例性卵泡抑素變體的體內(nèi)功效
[0270] 實施例2-4中所示的基于野生型卵泡抑素FS315蛋白的體內(nèi)半衰期和功效數(shù)據(jù)證 明卵泡抑素可用作用于DMD的有效蛋白質(zhì)療法。這個實施例證明也可基于卵泡抑素變體開 發(fā)蛋白質(zhì)治療劑。
[0271] 具體來說，產(chǎn)生如下表8中所述的示例性卵泡抑素結(jié)構(gòu)域缺失或點突變，并且使 用明確確定的頂/AAV遞送系統(tǒng)測試它們的肌肉再生功效以有助于在變體與野生型卵泡抑 素之間進行比較。
[0272] 在這個研宄中，跨越7個組使用年齡是3-4周的總計35只C57小鼠。7個組各自 包括5只小鼠，其中測試5種卵泡抑素變體（表8)，并且野生型FS315和空載體用作對照。 編碼FS315的基因具有代表信號肽的額外29個氨基酸，其在自細胞分泌后被裂解。因此， FS315和FS344是指相同野生型構(gòu)建體，并且在以下實施例中可互換使用。
[0273] 表8.示例性卵泡抑素變體的功效篩選
[0274]
[0275]
[0276] 通過使用AAV9載體，在每個動物近似lxIO11個病毒粒子的劑量下向左側(cè)四頭肌 和左側(cè)腓腸肌中進行單次單側(cè)注射來施用卵泡抑素變體。在注射后2、4和6周考查以下終 點：血清和尿中的卵泡抑素水平、小鼠重量、個體肌肉重量（注射的肌肉群與遠端肌肉群兩 者）和組織學(xué)（例如纖維計數(shù)、尺寸和類型等）。對側(cè)肌肉充當這個研宄的動物內(nèi)比較物。
[0277] 如圖7中所示，野生型FS315與結(jié)構(gòu)域3缺失突變體兩者相較于空載體對照均使 體重顯著增加。具體來說，測試的結(jié)構(gòu)域3缺失的卵泡抑素變體早在注射后3周即使體重 增加。
[0278] 圖8顯示注射后兩周在同側(cè)與對側(cè)兩者上的A)腓腸肌和B)四頭肌的示例性平均 肌肉重量。截至注射后第2周，野生型FS315與結(jié)構(gòu)域3缺失卵泡抑素變體兩者均顯示同 側(cè)上的肌肉質(zhì)量顯著增加（圖8)。具體來說，相較于空載體，用FS315和dFSD3注射的肌肉 在重量方面大60%至70% (圖8)。在第2周時，解剖的用dFSD3注射的四頭肌顯著大于對 側(cè)未治療的肌肉（圖9)。
[0279] 在第4周時，結(jié)構(gòu)域3缺失的卵泡抑素和野生型卵泡抑素使注射的肌肉與遠端肌 肉兩者的肌肉質(zhì)量增加。參見圖10。如在第2周時所觀察，dFSD3在第4周時產(chǎn)生顯著肥大 作用，其中相較于未治療側(cè)，注射的肌肉的肌肉質(zhì)量顯著較大（圖11)。對于野生型和dFSD3 治療的小鼠，通過ELISA測定的血清中的卵泡抑素水平類似，并且在第2、4和6周時平均是 30ng/mL (數(shù)據(jù)未顯示）。
[0280] 也在注射后第2、4和6周使用標準組織學(xué)和免疫組織化學(xué)方法測定注射的肌肉組 織與遠端肌肉組織兩者中的肌纖維尺寸。示例性第2、4和6周結(jié)果分別顯示于圖12、13和 14中。所有統(tǒng)計都是使用GraphPad Prism中的單因素ANOVA以及鄧奈特氏多重比較檢驗 (Dunnett' s Multiple Comparison Test)來進行。誤差棒表不 SEM。
[0281] 如圖12中所示，在第2周時，在注射的肌肉中，在FS344(23% )、dFSD3(30% )、 Y185A和L191D組中的四頭肌中以及在FS344(17%)和dFSD3(25%)組中的腓腸肌中觀察 到肌纖維肥大。在遠端肌肉群中，在dFSD2(12%)組中的TA中觀察到肌纖維肥大。在三頭 肌或膈肌中未觀察到肥大。
[0282] 如圖13中所示，在第4周時，在注射的肌肉中，在FS344(41% )、dFSD3(50% )、 dFSD113 和 L191D 組中的四頭肌中以及在 FS344(42% )、dFSD2、dFSD3(73% )、dFSD113、 Y185A和L191D組中的腓腸肌中觀察到肌纖維肥大。在遠端肌肉群中，在dFSD3(10% )組 中的TA中以及在FS344(23% )和dFSD2(29% )組中的膈肌中觀察到肥大。在三頭肌中未 觀察到肥大。
[0283] 如圖14中所示，在第6周時，在注射的肌肉中，在FS344(41% )、dFSD3(30% )、 Y185A組中的四頭肌中以及在FS344(90% )、dFSD3(49% )、Y185A、L191D組中的腓腸肌中觀 察到肌纖維肥大。在遠端肌肉中，在FS344(26% )、dFSD3(41% )、dFSD113、Y185A和L191D 組中的TA中以及在dFSD3(35% )組中的膈肌中觀察到肌纖維肥大。在三頭肌中觀察到最 小限度的肥大。
[0284] 總之，這些結(jié)果指示可基于卵泡抑素變體開發(fā)蛋白質(zhì)治療劑。舉例來說，卵泡抑素 結(jié)構(gòu)域缺失或點突變可保留或改進肌肉再生功效。如上所示，結(jié)構(gòu)域3缺失物可為用于治 療DMD的特別適用的卵泡抑素變體。
[0285] 實施例6. FS315-GAG3_mFc的全身性功效
[0286] 如實施例4中所示，相對于對照肌肉，向腓腸肌中注射FS315_mFc導(dǎo)致肌肉質(zhì)量增 加。這個實施例顯示全身性注射FS315-mFc也能夠在遠離注射部位的各種部位處誘導(dǎo)肌肉 生長。用于這個實施例中的所有卵泡抑素構(gòu)建體都含有GAG3接頭。
[0287] 總計20只C57BL/6小鼠用于這個研宄中，其中半數(shù)動物每周兩次持續(xù)8周接受皮 下（肩胛間）注射PBS (對照），并且另外半數(shù)每周兩次持續(xù)8周接受皮下（肩胛間）注射 10mg/kg FS315-mFc。在末次注射之后24小時處死動物，并且測量左側(cè)和右側(cè)四頭肌、腓腸 肌、脛骨前肌和三頭肌的重量，也測量動物的總體重。下表9概述這個實施例的實驗設(shè)計。
[0288] 表9.實驗設(shè)計
[0289]
[0290] 圖16顯示通過8周研宄過程獲得的示例性體重數(shù)據(jù)。如可見，在2周時開始，并且 在整個8周研宄期間持續(xù)，F(xiàn)S315-mFc治療的動物的體重顯著大于那些媒介物治療的對照 動物。圖17代表示例性肌肉重量數(shù)據(jù)。相較于媒介物對照，來自用FS315-mFc治療的小鼠 的三頭肌早在第4周即在重量方面顯著較大。相較于媒介物，在治療8周之后，三頭肌群與 四頭肌群兩者均顯示在重量方面顯著增加（圖17)。通過實施例4中所述的方法來測定肌 纖維尺寸。圖18顯示在第4和8周時三頭肌群和四頭肌群的肌纖維直徑增加百分比。在 4周和8周時，兩種肌肉群均顯示在用FS315-mFc治療之后向較大肌纖維尺寸轉(zhuǎn)變。
[0291] 此外，在皮下注射之后，血清卵泡抑素水平增加。舉例來說，治療的小鼠（通過每 周兩次皮下注射）的血清中的FS315-mFc水平顯示于圖19中。在第4和8周處死時間點收 集的血清中的FS315-mFc水平最高，所述時間點與FS315-mFc注射與血清收集之間的時間 量（24小時）一致。在這些點時，平均血清FS315-mFc水平是約200ng/mL。在注射FS315-mFc 之后3天收集每兩周眶后放血，并且平均血清FS315-mFc水平在約30 - 50ng/mL之間。
[0292] 這些數(shù)據(jù)證明全身性注射FS315-mFc (例如皮下注射）可有效誘導(dǎo)全身各種肌肉 組織中的肌肉生長。
[0293] 實施例7.卵泡抑素-Fc融合蛋白在DMD小鼠模型中的全身性功效
[0294] 這個實施例進一步證明在DMD疾病模型中的全身性功效。具體來說，如下所示，全 身性注射FS315-mFc成功地降低各種特征DMD癥狀，如肌肉壞死和/或纖維化的進展。用 于這個實施例中的所有卵泡抑素構(gòu)建體都含有GAG3接頭。
[0295] mdx小鼠模型已廣泛用作用以證明用于DMD的候選療法的概念驗證的臨床前模 型。mdx小鼠的肢體肌肉群與膈肌兩者均顯示傾向于隨年齡增加的廣泛病變。所述病變的 特征在于肌肉中具有炎癥性浸潤、壞死和纖維化區(qū)域。在這個模型中測試FS315-mFc以評 估它對肌肉中纖維化的進展的作用?？傆?0只mdx小鼠用于這個實施例中，其中20個動 物接受皮下注射PBS，并且30個動物接受皮下注射10mg/kg FS315-mFc，每周兩次，持續(xù)12 周。（參見表10)。在末次注射之后24小時處死動物，并且收集組織以分析壞死和纖維化 (參見表11)。
[0296] 表10?實驗設(shè)計
[0297]
[0301] 圖20顯示在RNA層面上FS315-mFc對纖維化蛋白質(zhì)表達的示例性作用。具體 來說，I型膠原蛋白、a-平滑肌肌動蛋白和含有膠原蛋白三螺旋重復(fù)序列的蛋白質(zhì)1的 RT-PCR證明這些纖維化相關(guān)蛋白質(zhì)的表達早在每周兩次SC治療之后6周即顯著降低。
[0302] 表12和13概述對肌肉組織切片中的壞死（如通過評估H&E染色的切片來確定） 和纖維化（如通過評估FS315-mFc治療的mdx小鼠肌肉的膠原蛋白I染色的肌肉切片來確 定）的組織病理學(xué)評估。對于FS315-mFc治療組和媒介物治療組，每組分別有總計15個和 10個動物。如表12中所指示，F(xiàn)S315-mFc治療早在自啟始每周兩次注射開始的6周即顯著 降低肢體肌肉中的壞死的發(fā)生率。這個壞死降低是通過四頭肌和三頭肌來說明于H&E切片 的圖像中（圖21)。在FS315-mFc治療12周之后，通過膠原蛋白I染色肌肉組織切片所說 明的纖維化的發(fā)生率顯著降低（也參見表13)。膠原蛋白沉積的這個降低說明于膠原蛋白 I染色的肌肉切片的圖像中（圖22)。
[0303] 這個研宄的結(jié)果證明FS315-mFc可通過有效降低DMD小鼠模型中患病肌肉病變 (包括但不限于肌肉壞死和/或纖維化）的進展來成功治療DMD。
[0304] 表12. FS315-mFc治療的mdx小鼠肌肉中的壞死的發(fā)生率（p值指示使用費雪氏精 確檢驗（Fisher' s Exact Test)得到的媒介物與FS315_mFc之間的顯著性程度）
[0305]
[0306] 在總檢查肌肉區(qū)域中，最小限度：〈5% ;輕度：〈30% ;顯著：>30%
[0307] 表13.纖維化的發(fā)生率，（p值指示使用費雪氏精確檢驗得到的媒介物與 FS315-mFc之間的顯著性程度）
[0308]
[0309] 實施例8.重組卵泡抑素結(jié)構(gòu)域3缺失Fc融合蛋白的體內(nèi)功效
[0310] 這個實施例證明類似于野生型卵泡抑素-Fc融合蛋白，卵泡抑素結(jié)構(gòu)域3缺失 (dFSD3)Fc融合蛋白體內(nèi)有效誘導(dǎo)肌肉生長。用于這個實施例中的所有卵泡抑素構(gòu)建體都 含有GAG3接頭。
[0311] 具體來說，使實施例5中所述的結(jié)構(gòu)域3缺失的構(gòu)建體融合于與用于FS315-mFc 相同的mFc。此外，相同GAG3接頭序列用于使dFSD3融合于mFc。C57BL/10小鼠用兩種融 合蛋白直接向腓腸肌中注射，如實施例4中所述。在每周兩次注射20 y g融合蛋白4周之 后處死小鼠，并且相對腓腸肌接受相同體積的PBS。在最終注射之后24小時，處死治療的小 鼠，并且將注射的腓腸肌小心注射并稱重。如圖23中所指示，dFSD3-GAG3-mFc融合蛋白導(dǎo) 致肌肉質(zhì)量超過媒介物對照顯著增加，并且所述增加類似于用FS315-mFc觀察到的增加。 這個實施例指示卵泡抑素結(jié)構(gòu)域3缺失Fc融合蛋白（例如dFSD3-GAG3-mFc)在體內(nèi)具有 活性，并且是用于DMD治療的另一有前途的治療候選物。
[0312] 實施例9.較長接頭關(guān)于卵泡抑素功能的優(yōu)勢
[0313] 這個實施例證明較長接頭，特別是含有至少10個氨基酸的接頭提供關(guān)于卵泡 抑素功能的出乎意料的優(yōu)勢。具體來說，這個實施例顯示含有57個氨基酸的接頭的 FS315-GAG3-FC融合蛋白（鼠類和/或人Fe)相較于可自Sino Biological商購獲得的含 有9個氨基酸的接頭ALEVLFQGP的FS315-hFc融合蛋白（Sino Biological Inc.目錄號 10685-H02H)，在它的抑制肌抑素和活化素的能力方面更強力。用于信號傳導(dǎo)測定的肌抑素 和活化素的濃度是I. 2nM。如圖24和表14中所指示，F(xiàn)S315-GAG3-mFc和FS315-GAG3-hFc 融合蛋白在CAGA-熒光素酶測定中在與天然FS315相同的程度上抑制肌抑素和活化素信號 傳導(dǎo)。相比較來說，可商購獲得的FS315-hFc融合蛋白（Sino Biological)的強力性顯著 較小。計算的IC50如下：
[0314] 表14 :卵泡抑素在針對Smad2/3信號傳導(dǎo)的CAGA-熒光素酶報道體測定中抑制肌 抑素和活化素的示例性IC50值
[0315]
[0316] 在不希望固守于特定理論下，有可能的是相較于具有短得多接頭（例如9個 氨基酸）的融合蛋白，F(xiàn)S315蛋白與Fe區(qū)域之間的較長接頭（例如這個特定構(gòu)建體FS315-GAG3-FC中的57個氨基酸的接頭）可能允許FS315具有更天然構(gòu)象，從而允許在與 用天然FS315觀察到的程度類似的程度上結(jié)合靶標配體以及抑制信號傳導(dǎo)。相比較來說， 可商購獲得的FS315-hFc蛋白具有9個氨基酸的短得多的接頭，其中在Fe與FS315蛋白之 間的間隔顯著較小，從而潛在導(dǎo)致對FS315構(gòu)象和生理活性的有害作用。
[0317] 實施例10.卵泡抑素融合蛋白FS315-GAG3_hFc具有延長的血清半衰期
[0318] 在這個實施例中，我們證明提供的卵泡抑素融合蛋白，特別是具有較長接頭（例 如具有至少10個氨基酸的接頭）的那些具有延長的血清半衰期。具體來說，我們首次在此 處證明以GAG3接頭融合于人Fe的FS315 (FS315-GAG3-hFc)在10mg/kg的單次劑量下向 Sprague-D awley大鼠中皮下（SC)施用時具有延長的血清半衰期。在施用之后，在于15分 鐘至5天的范圍內(nèi)的時間點收集血清。使用Mesoscale Di scovery (MSD)測定測量大鼠血 清中的FS315-GAG3-hFc，所述測定捕集人FS315,并且檢測血清樣本中完整融合蛋白的人 Fe結(jié)構(gòu)域。大鼠血清中的FS315-GAG3-hFc的水平顯示于圖25中。PK參數(shù)概述于表15中。
[0319] 表 15. FS315-GAG3_hFc 體內(nèi) PK 數(shù)據(jù)
[0320]
[0321] 總之，以上實施例證明通過例如全身性施用，卵泡抑素，包括提供的變體，在DMD 疾病模型中高度有效誘導(dǎo)肌肉肥大，并且減弱肌肉壞死和纖維化。因此，卵泡抑素和提供的 變體可為用于治療DMD的有效蛋白質(zhì)治療劑。
[0322] 等效物和范圍
[0323] 本領(lǐng)域技術(shù)人員將僅使用常規(guī)實驗即會認識到或能夠確定本文所述的本發(fā)明的 具體實施方案的許多等效物。本發(fā)明的范圍不意圖限于以上描述，而是如以下權(quán)利要求中 所闡述。
【主權(quán)項】
1. 一種治療杜興氏肌營養(yǎng)不良（DMD)的方法，其包括 向罹患或易患DMD的個體施用有效量的重組卵泡抑素蛋白以使DMD的至少一種癥狀或 特征在強度、嚴重性或頻度方面得以降低，或延遲發(fā)作。2. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述重組卵泡抑素蛋白包含與野生型人卵泡抑素蛋 白 GNCWLRQAKNGRCQVLYKTELSKEECCSTGRLSTSWTEEDVNDNTLFKWMIFNGGAPNCIPCKETCENVDC GPGKKCRMNKKNKPRCVCAPDCSNITWKGPVCGLDGKTYRNECALLKARCKEQPELEVQYQGRCKKTCRDVFCPGS STCVVDQTNNAYCVTCNRICPEPASSEQYLCGNDGVTYSSACHLRKATCLLGRSIGLAYEGKCIKAKSCEDIQCT GGKKCLTOFKVGRGRCSLCDELCPDSKSDEPVCASDNATYASECAMKEAACSSGVLLEVKHSGSCNSISEDTEEE EEDEDQDYSFPISSILEW(SEQIDN0:1)至少 70%相同的氨基酸序列。3. 如前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述重組卵泡抑素蛋白包含與所述野生 型人卵泡抑素蛋白SEQIDNO: 1至少80%相同的氨基酸序列。4. 如前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述重組卵泡抑素蛋白包含與所述野生 型人卵泡抑素蛋白SEQIDNO: 1至少90%相同的氨基酸序列。5. 如前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述重組卵泡抑素蛋白包含與所述野生 型人卵泡抑素蛋白SEQIDNO: 1至少95%相同的氨基酸序列。6. 如前述權(quán)利要求中任一項所述的方法，其中所述重組卵泡抑素蛋白包含與所述野生 型人卵泡抑素蛋白SEQIDNO: 1相同的氨基酸序列。7. 如權(quán)利要求1-5中任一項所述的方法，其中所述重組卵泡抑素蛋白相較于所述野生 型人卵泡抑素蛋白包含一個或多個缺失、突變或插入。8. 如權(quán)利要求7所述的方法，其中所述重組卵泡抑素蛋白包含SEQIDNO: 1的氨基酸 殘基212-288的缺失。9. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述重組卵泡抑素蛋白包含與 GNCWLRQAKNGRCQVLYKTELSKEECCSTGRLSTSWTEEDVNDNTLFKWMIFNGGAPNCIPCKETCENVDC GPGKKCRMNKKNKPRCVCAPDCSNITWKGPVCGLDGKTYRNECALLKARCKEQPELEVQYQGRCKKTCRDVFCPGS STCVVDQTNNAYCVTCNRICPEPASSEQYLCGNDGVTYSSACHLRKATC