一種膦甲酸鈉眼玻璃體腔內(nèi)緩釋藥物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種眼玻璃體腔內(nèi)注射用藥物制劑，特別涉及到一種33G針頭注射用膦甲酸鈉眼玻璃體腔內(nèi)緩釋藥物。
【背景技術(shù)】
[0002]急性視網(wǎng)膜壞死是由皰瘆類病毒感染引起的一種重癥眼部疾病，發(fā)病后可出現(xiàn)中度以上的玻璃體混濁、廣泛視網(wǎng)膜壞死、視網(wǎng)膜變薄、多發(fā)裂孔及視神經(jīng)萎縮等癥狀。與急性視網(wǎng)膜壞死發(fā)病有關(guān)的皰瘆病毒包括水痘-帶狀皰瘆病毒、I型單純皰瘆病毒和II型單純皰瘆病毒，巨細胞病毒和EB病毒也是導(dǎo)致該疾病的致病病毒。急性視網(wǎng)膜壞死治療需要長期使用一種或多種抗病毒藥物，副作用多。
[0003]膦甲酸鈉是無機焦磷酸鹽的有機類似物，在不影響細胞DNA聚合酶濃度的情況下，膦甲酸鈉在病毒特異性DNA聚合酶的焦磷酸鹽結(jié)合位點產(chǎn)生選擇性抑制作用，從而表現(xiàn)出抗病毒活性。玻璃體腔內(nèi)注射膦甲酸鈉能有效地控制水痘-帶狀皰瘆病毒引起的急性視網(wǎng)膜壞死。膦甲酸鈉通常推薦用于巨細胞病毒感染為主的免疫功能低下的視網(wǎng)膜炎，但膦甲酸鈉口服吸收差，目前給藥途徑只有靜脈注射和玻璃體腔內(nèi)注射使用。靜脈注射全身給藥存在療效差、并發(fā)癥多、腎毒性等全身毒副作用大等問題，不能滿足臨床需求，現(xiàn)在主張進行玻璃體腔注射膦甲酸鈉進行抗病毒治療。但是膦甲酸鈉在玻璃體腔中的代謝半衰期短，單次注射只能維持10小時的有效藥物濃度(Claro Cl, Ruiz R, Cordero E,Pastor MT, Lopez-Cortes LF, Jimenez-Castellanos M, Lucero M.Determinat1n andpharmacokinetic profile of liposomal foscarnet in rabbit ocular tissues afterintravitreal administrat1n.Exp Eye Res.2009; 88 (3): 528-34.)。為維持玻璃體腔內(nèi)的有效藥物濃度，臨床上必須進行反復(fù)的玻璃體腔注射給藥，而反復(fù)進行玻璃體腔穿刺會造成眼內(nèi)出血、增生機化、視網(wǎng)膜脫離等嚴重并發(fā)癥，且進行玻璃體腔注射的針頭越粗，造成的并發(fā)癥越嚴重。權(quán)衡利弊，目前臨床上通常每周注射兩次。
[0004]為減少玻璃體腔穿刺注射引起的嚴重并發(fā)癥，使用針頭的直徑越細(也就是G值越大)的針頭進行玻璃體腔注射是臨床的發(fā)展趨勢，目前眼科臨床上已經(jīng)陸續(xù)選用更細的33G針頭來代替?zhèn)鹘y(tǒng)使用的30G針頭進行注射。此外，使用藥物制備成緩釋劑，也可有效減少玻璃體腔注射頻次。但是目前常規(guī)的緩釋劑均存在不同程度的技術(shù)缺陷，如授權(quán)公告號為CN 101390825B的發(fā)明專利所發(fā)明的固體植入劑無法進行常規(guī)玻璃體腔注射給藥，尤其是無法使用33G針頭注射，臨床上需要進行手術(shù)植入，給藥過程復(fù)雜，創(chuàng)傷大；而且微球因粒徑大，需要大直徑注射針頭進行玻璃體腔注射，無法使用極細的33G針頭注射；脂質(zhì)體納米粒等制劑，因粒子尺寸小，存在聚集效應(yīng)，不容易分散，在注射時極易堵塞針頭，也無法使用極細的33G針頭注射；而常規(guī)凝膠劑、殼聚糖等原位凝膠劑等緩釋劑為達到緩釋作用，需要高分子量的高分子材料如殼聚糖等，溶液黏度大，也無法使用極細的33G針頭進行注射。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]針對上述問題，本發(fā)明的目的是提供一種可供極細的33G針頭注射用的膦甲酸鈉眼玻璃體腔內(nèi)釋藥物，可以延長藥物作用、減少給藥次數(shù)、減少玻腔反復(fù)注射引起的不良反應(yīng)。
[0006]本發(fā)明是對普通膦甲酸鈉注射劑的改進，將膦甲酸鈉、可生物降解的藥用聚乙二醇類輔料和GPQ肽類交聯(lián)劑，制備成具有緩釋作用的可供極細的33G針頭注射的眼玻璃體腔內(nèi)緩釋藥物。本發(fā)明包含A組分與B組分，A組分為膦甲酸鈉和可生物降解的藥用聚乙二醇類輔料共同構(gòu)成的均質(zhì)的混合溶液，B組分為肽類交聯(lián)劑溶液。注射前，只需用配33G針頭的注射器抽取等體積的A組分與B組分，輕輕混勻即可進行眼玻璃體腔內(nèi)注射。A組分與B組分在混勻后的10分鐘內(nèi)為普通液體，注射進眼玻璃體腔內(nèi)后，因藥用聚乙二醇類輔料在肽類交聯(lián)劑的作用下形成凝膠狀植入劑，阻滯膦甲酸鈉快速釋放，從而起到緩釋藥物作用，延長給藥間隔時間。
[0007]本發(fā)明的技術(shù)原理:可生物降解的藥用聚乙二醇類輔料為四臂-聚乙二醇-馬來酰亞胺，每個聚乙二醇分子上面連接有四個馬來酰亞胺活性基團，肽類交聯(lián)劑的氨基酸序列為GCRDQGWIGQP⑶RCG，四臂-聚乙二醇-馬來酰亞胺與肽類交聯(lián)劑在溶液中混合后，四臂-聚乙二醇-馬來酰亞胺中的酰胺鍵與肽類交聯(lián)劑中的半胱氨酸基團發(fā)生邁克爾加成反應(yīng)而發(fā)生交聯(lián)，從而使黏度急劇增加并最終形成凝膠狀植入劑，該反應(yīng)在生理條件下即可實現(xiàn)，即在生理鹽水或者pH值為7.4的緩沖液中反應(yīng)即可，無需傳統(tǒng)植入劑或凝膠劑所需要的特殊有機溶劑或者是強酸性條件，安全性高，有效避免對人體組織造成傷害。通過控制溶液中的四臂-聚乙二醇-馬來酰亞胺濃度和溶液中的三乙基胺濃度即可有效調(diào)控反應(yīng)時間，實現(xiàn)33G針頭注射前與注射時還是普通的注射液，進入玻璃體腔后發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)生成凝膠類型的植入劑。
[0008]本發(fā)明具體的技術(shù)方案如下:
一種膦甲酸鈉眼玻璃體腔內(nèi)緩釋藥物，其特征在于包含A組分與B組分，所述A組分為膦甲酸鈉和可生物降解的藥用聚乙二醇類輔料共同形成的均質(zhì)混合溶液，B組分為肽類交聯(lián)劑溶液。
[0009]所述A組分中可生物降解的藥用聚乙二醇類輔料是四臂-聚乙二醇-馬來酰亞胺，聚乙二醇分子量為1000?2000道爾頓，四臂-聚乙二醇-馬來酰亞胺在溶液中的質(zhì)量濃度為40mg/ml-80mg/ml，四臂-聚乙二醇-馬來酰亞胺和膦甲酸鈉二者的質(zhì)量比是
0.2:0.8-0.5:0.5。
[0010]所述A組分采用磷酸鹽緩沖液配制。
[0011 ] 所述B組分中的肽類交聯(lián)劑為GPQ肽，氨基酸序列為GCRDQGWIGQP⑶RCG，GPQ肽溶解在含有三乙基胺的磷酸鹽緩沖液中，GPQ肽在磷酸鹽緩沖液中的質(zhì)量濃度為64mg/ml-128mg/ml，三乙基胺濃度為2mM-20mM，其pH值調(diào)節(jié)為?.0-7.4。。
[0012]本發(fā)明的制備方法如下:
(1)取無菌的可生物降解的藥用聚乙二醇類輔料，在無菌條件下用磷酸鹽緩沖液溶解，然后加入膦甲酸鈉粉末，溶解后灌裝于無菌處理的西林瓶中，配制成A組分溶液；
(2)取三乙基胺溶解于磷酸鹽緩沖液中，用氫氧化鈉調(diào)pH值至7.0-7.4，得到含三乙基胺的磷酸鹽緩沖液；取肽類交聯(lián)劑，用上述含三乙基胺的磷酸鹽緩沖液充分溶解后，灌裝于無菌處理的西林瓶中，配制成B組分溶液。
[0013]本發(fā)明使用時，采用33G針頭的注射器抽取等量體積的A組分液和B組分液，然后將注射器輕輕搖動混勻里面的液體，在10分鐘之內(nèi)注射入玻璃體腔即可。
[0014]本發(fā)明的優(yōu)點:本發(fā)明的A組分與B組分在注射進眼玻璃體腔內(nèi)后，可很快形成凝膠狀植入劑，阻滯膦甲酸鈉快速釋放，從而起到緩釋藥物作用，延長給藥間隔時間；該反應(yīng)在生理條件下即可實現(xiàn)，即在生理鹽水或者pH值為7.4的緩沖液中反應(yīng)即可，無需傳統(tǒng)植入劑或凝膠劑所需要的特殊有機溶劑或者是強酸性條件，安全性高，有效避免對人體組織造成傷害；通過控制溶液中的四臂-聚乙二醇-馬來酰亞胺濃度和溶液中的三乙基胺濃度即可有效調(diào)控反應(yīng)時間，實現(xiàn)33G針頭注射前與注射時還是普通的注射液，進入玻璃體腔后發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)生成凝膠類型的植入劑。
【具體實施方式】
[0015]下面通過具體實施例來進一步詳細說明本發(fā)明。
[0016]實施例1:
(I)取無菌的分子量1000道爾頓的四臂-聚乙二醇-馬來酰亞胺80mg，在無菌條件下用pH7.4磷酸鹽緩沖液Iml溶解，然后加入膦甲酸鈉粉末20mg，溶解后灌裝于已經(jīng)無菌處理的西林瓶中，配制成A瓶溶液。
[0017](2)稱取三乙基胺2.98mg，溶解于1ml pH7.4磷酸鹽緩沖液中，用氫氧化鈉調(diào)pH值至7.4，配制含三乙基胺為2mM的磷酸鹽緩沖液，稱取GPQ肽64mg，用Iml含三乙基胺為2mM的磷酸鹽緩沖液充分溶解后，溶解后灌裝于已經(jīng)無菌處理的西林瓶中，配制成B瓶溶液。
[0018](3)使用時，使用帶有33G針頭的注射器按需抽取A瓶溶液(如0.1ml)，再抽取等體積的B瓶溶液(如0.1ml)，只需將注射器輕晃兩次，或者將注射器上下顛倒兩次即可混勻溶液，然后在10分鐘內(nèi)完成眼玻璃體腔內(nèi)注射即可。該藥液注射在玻璃體腔后可實現(xiàn)10天的藥物緩釋，GPQ肽交聯(lián)的四臂-聚乙二醇-馬來酰亞胺在蛋白酶的降解作用下，將在15天完全降解成無毒的聚乙二醇和氨基酸而被組織吸收。
[0019]實施例2:
取無菌的分子量2000道爾頓的四臂-聚乙二醇-馬來酰亞胺80mg，在無菌條件下用PH7.4磷酸鹽緩沖液Iml溶解，然后加入膦甲酸鈉粉末20mg，溶解后灌裝于已經(jīng)無菌處理的西林瓶中，配制成A瓶溶液。
[0020]稱取三乙基胺2.98mg，溶解于10mlpH7.4磷酸鹽緩沖液中，用氫氧化鈉調(diào)pH值至7.4，配制稱含三乙基胺為2mM的磷酸鹽緩沖液，稱取GPQ肽64mg，