一種玫瑰發(fā)酵原漿及其制備方法與應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物技術領域，具體設及一種玫瑰發(fā)酵原漿及其制備方法與應用。
【背景技術】
[0002] 玫瑰，菩薇科菩薇屬落葉叢生灌木。玫瑰花有很高的經濟價值，一般用來提煉精油 和色素。玫瑰花成分復雜，含有多酪類、黃酬類等多種化學成分。運些化學成分有減少和消 除自由基、抗氧化活性、抗血栓、抗癌、抗炎、抑菌、免疫調節(jié)作用、降血脂和預防屯、臟病等生 理活性。我國玫瑰資源豐富，為開發(fā)應用玫瑰提供有利條件。隨著玫瑰栽培業(yè)迅速發(fā)展及 應用范圍拓寬，對玫瑰營養(yǎng)成分及在醫(yī)療保健作用方面研究也逐步深入。對玫瑰活性物質 的提取工藝也不斷完善，但是提取方法主要W閃式提取法、水提法為主。
[0003] 現有的玫瑰活性物提取最常采用的是水提法：玫瑰干品粉碎后加去離子水，調抑 后攬拌浸提一段時間，離屯、后取上清液濃縮，最后使用乙醇沉淀，干燥后粉碎得到產物。但 是該方法在提取過程中引入有機物，不僅破壞環(huán)境，且在應用的過程中存在潛在的安全隱 患。

【發(fā)明內容】

[0004] 本發(fā)明的一個目的是提供一種玫瑰發(fā)酵原漿及其制備方法。 陽〇化]本發(fā)明提供的玫瑰發(fā)酵原漿的制備方法，包括如下步驟：將玫瑰干粉、水和發(fā)酵菌 混合得到初始體系，并對初始體系進行發(fā)酵培養(yǎng)，得到玫瑰發(fā)酵原漿化妝品。
[0006] 上述制備方法中，所述發(fā)酵菌、所述玫瑰干粉和水的配比為（15-25)ml: (7-15)g: 350g，具體可為15ml:12g:350g，所述發(fā)酵菌的菌菌液濃度為105-108CFU/ml。
[0007] 所述發(fā)酵培養(yǎng)的溫度為25-38°C，具體可為35°C，時間為24-3化，具體可為2地。
[0008] 所述發(fā)酵菌可為酵母菌，具體可為己氏酵母菌Saccharomycespastorianus，ATCC 編號為28827。
[0009] 所述發(fā)酵菌具體可W其培養(yǎng)液或懸浮液的形式存在，所述發(fā)酵菌的培養(yǎng)液或懸浮 液的抑值為6. 5-7. 5。
[0010] 所述玫瑰干粉取自玫瑰花干花蕾，所述玫瑰干粉的目數為20-50目，具體可為30 目，可將玫瑰花干花蕾經粉碎機粉碎、過篩后得到。
[0011] 上述制備方法中，還包括對所述發(fā)酵培養(yǎng)后所得發(fā)酵液依次進行滅菌、離屯、、取上 清液的步驟，即得到玫瑰發(fā)酵原漿。
[0012] 其中，所述滅菌的條件如下：滅菌溫度為115-12rc(具體可為115°C)，滅菌時間 為 15-25min(具體可為 20min)。
[0013] 所述離屯、的條件如下：離屯、轉速為3800-4200r/min(具體可為4000r/min)、離屯、 時間為15-30min(具體可為20min)，離屯、半徑為9cm。
[0014] 本發(fā)明所制備得到的玫瑰發(fā)酵原漿也屬于本發(fā)明的保護范圍。
[0015] 本發(fā)明所制備得到的玫瑰發(fā)酵原漿在制備具有下述至少一種功能的化妝品中的 應用或在直接作為具有下述至少一種功能的化妝品中的應用：
[0016] 1)美白；2)抗衰老；3)清除DPPH自由基；4)抑制酪氨酸酶。
[0017] 上述應用中，所述化妝品具體可為面膜、精華液或爽膚水中的任一種。
[0018] 通過實驗證明：本發(fā)明制備的玫瑰發(fā)酵原漿化妝品不含任何化學成分，可W直接 作為面膜或精華液或爽膚水的成品使用，比現有市面上的其他產品更加天然，不會給肌膚 造成任何負作用；與普通提取方法相比，本發(fā)明獲得小成分多膚，易于讓皮膚充分吸收。
[0019] 與現有技術相比，本發(fā)明具有如下有益效果：
[0020] (1)本發(fā)明采用己氏酵母對玫瑰進行發(fā)酵，保留了植物的全部功效成分及其活性， 避免了提取方法造成的活性成分流失；
[0021] (2)本發(fā)明所采用的發(fā)酵法，在對玫瑰有效成分提取過程中，不添加任何有機試 劑，發(fā)酵溫度和發(fā)酵抑溫和，植物活性成分結構不被破壞，保持植物的天然活性，同時，節(jié) 約生產成本，而且最大化的簡化了生產步驟，使該發(fā)酵技術能夠實現大量生產、工業(yè)化生 產，并能夠充分保證產品質量的穩(wěn)定性；
[0022] (3)本發(fā)明提供的玫瑰發(fā)酵原漿化妝品中不添加香精等對化學成分，確保產品對 人體的安全性。
[002引 （4)本發(fā)明提供的玫瑰發(fā)酵原漿中富含的蛋白質、多糖、黃酬等物質，與發(fā)酵濾液 中的益生菌發(fā)酵產物成分具有協同作用，從而具有顯著地抗氧化、抗衰老及美白作用。
【附圖說明】
[0024] 圖1為實施例2中玫瑰發(fā)酵原漿的活性多膚分子量分布HPLC圖譜。
[0025] 圖2為實施例2中不同濃度的玫瑰發(fā)酵原漿（溶劑為去離子水）與DPPH自由基 清除率的關系曲線。
[0026] 圖3為實施例2中10%的玫瑰發(fā)酵原漿（溶劑為去離子水）和1 %的熊果巧對酪 氨酸酶的抑制率的對比圖。
【具體實施方式】
[0027] 下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
[0028] 下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。
[0029] 下述實施例中的液體培養(yǎng)基由溶質和溶劑組成，溶劑為水，溶質及其在液體培養(yǎng) 基中的濃度為：葡萄糖20g/L，蛋白腺20g/L，酵母膏l(xiāng)Og/L，抑值為7. 0。
[0030] 下述實施例中的YTO培養(yǎng)基由溶質和溶劑組成，溶劑為水，溶質及其在液體培養(yǎng) 基中的濃度為：酵母提取物1% (質量分數），膜蛋白腺2% (質量分數），葡萄糖2% (質 量分數），抑值為7.0。
[0031] 下述實施例中的玫瑰干花來自市面銷售。
[0032] 下述實施例中的己氏酵母Saccharomycespastorianus的ATCC編號為28827,可 從ATCC獲得。
[0033] 下述實施例中所用的玫瑰發(fā)酵原漿為對發(fā)酵培養(yǎng)后所得發(fā)酵液依次進行滅菌、離 屯、后所得到的上清液。
[0034]實施例1、一種玫瑰發(fā)酵原漿及其制備方法： 陽0對 1、菌種的活化：
[0036] 挑取己氏酵母（Saccharomycespastorianus)菌落一環(huán)于液體培養(yǎng)基中，放入搖 床中將菌種活化，得到活化后己氏酵母菌液。
[0037] 2、菌種的純化：
[0038] 將步驟1得到的活化后的菌液梯度稀釋鋪板，W便獲取單菌落，得到純化后己氏 酵母。
[0039] 3、菌種的擴大培養(yǎng)：
[0040] 將步驟2得到的純化后的菌種接種到YTO培養(yǎng)基（抑值為7. 0)中，在25°C的搖床 中培養(yǎng)，當0D值=0. 5-1. 0時，得到發(fā)酵菌菌液（菌種處在對數期，濃度為105-108CFU/ml)。
[0041] 4、玫瑰發(fā)酵原漿的獲得：
[0042] 將步驟3得到的發(fā)酵菌菌液15ml接種到12g的玫瑰花干粉和350g的水中，得到 發(fā)酵體系（發(fā)酵體系中菌種總量和玫瑰、水的配比為15ml:12g:350g);將發(fā)酵體系于35°C 搖床中發(fā)酵24h，得到發(fā)酵產物；將發(fā)酵產物于115°C下滅菌20min，使菌失活，得到滅菌后 的發(fā)酵產物；將滅菌后的發(fā)酵產物于4000r/min、離屯、半徑為9cm的條件下離屯、20min，棄沉 淀，收集上清液，即為玫瑰發(fā)酵原漿。
[0043] 實施例2、玫瑰發(fā)酵原漿在作為化妝品中的應用：
[0044] 一、玫瑰發(fā)酵原漿化妝品的性質：
[0045] 將實施例1所制備得到的玫瑰發(fā)酵原漿外觀為粘稠液體、顏色為淡黃色至棟黃 色。抑值5. 2-6. 8,粘度200-500CP，可溶性固含物含量1. 5-5. 0%，菌落總數小于50CFU/ ml,無致病菌檢出。根據化妝品衛(wèi)生標準GB7916-87,化妝品細菌總數不高于lOOOCFU/ml， 所W此發(fā)酵提取物符合化妝品質量要求。
[0046] 對該玫瑰發(fā)酵原漿進行成分分析，蛋白質檢測方法參照GB5009. 5-2010;粗多糖 檢測方法參照GB/T5009. 8-2008;黃酬檢測方法參照GB/T5009. 124-2003;總酪檢測方法 參照GB/T8313-2008,所得結果如下：
[0047] 本發(fā)明制得的玫瑰發(fā)酵原漿含蛋白質7. 91g/kg、粗多糖12. 97g/kg、總黃酬 0. 25g/kg(W蘆下計）、總酪 0. 85g/kg。
[0048] 二、玫瑰發(fā)酵原漿的安全性檢測：
[0049] 人體斑貼試驗主要是用于檢測化妝品終產品或原料的刺激性。本發(fā)明對實施例1 獲得的玫瑰發(fā)酵原漿進行人體封閉式斑貼試驗，旨在對其潛在皮膚刺激性進行評估。 陽化0] 1、試驗對象：
[0051] 選擇合適的志愿者30人，年齡范圍在18-60歲隨機選擇。
[0052] 2、試驗方法：
[0053] 若為固體樣品或半固體的樣品，則稱取0.020g-0.025g置于斑試器中備用；若是 液體樣品，則量取0. 〇25mL-〇. 2血滴加于濾紙片上，再將濾紙片置于斑試器內。本發(fā)明采用 后者，每個樣品均設置空白對照，在對照斑試器孔內加入與樣品等量的樣品溶劑，如蒸饋水 或橄攬油，本發(fā)明采用蒸饋水。
[0054] 試驗部位選為人體背部，利用無刺激性的膠帶將斑試器固定貼敷于受試者背部。 測試周期持續(xù)2地。為了試驗結果的準確、可信和科學，在測試期間志愿者按照要求，不能摘 掉斑試器，亦不可使受試部位接觸水。24h后去除斑試器，靜置30min后，等待壓痕消失，觀 察皮膚的反應。如果試驗結果為陰性，則需要在斑貼試驗后24h和4化分別再觀察一次。 陽化5] 3、試驗結果：
[0056] 斑貼試驗結果如表1所示：
[0057] 其中，=陰性反應； 陽05引一級不良反應："± "=可疑反應：僅有微弱紅斑；