組合物及飲食的制作方法
【專利說明】
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及組合物及飲食。
【【背景技術(shù)】】
[0002]已知糙米飲食能夠改善胰島素抗性、延緩糖尿病的病發(fā)。糙米中含有生理活性物質(zhì)γ -谷維素，其生物活性的機(jī)制不斷得到揭示。非專利文獻(xiàn)I中公開了，在經(jīng)口投藥γ -谷維素(320mg/kg)的肥胖模型小鼠中，抑制了從小腸吸收脂質(zhì)、抑制了胰島素的分泌促進(jìn)和血糖值降低、及對于高脂肪飲食的嗜好。
【先行技術(shù)文獻(xiàn)】
【非專利文獻(xiàn)】
[0003]【非專利文獻(xiàn)l】KozukaCet al.，Brown Rice and Its Component，y — OryzanoI?Attenuate the Preference for High — Fat Diet by Decreasing HypothalamicEndoplasmic Reticulum Stress in Mice.，Diabetes，2012，61，3084 — 93
【非專利文南犬 2】Takeuchi H et al.，Mucoadhesive nanoparticulate systems forpeptide drug delivery.，Adv Drug Deliv Rev，2001，47，39 — 54
【
【發(fā)明內(nèi)容】
】
【發(fā)明所要解決的課題】
[0004]但是，在肥胖、血脂異常及糖尿病等患者中，為了獲取γ -谷維素的上述作用所要的I天的用量是較大量的(以患者的體重為60kg計(jì)，用量為19.2g)。在接連數(shù)日經(jīng)口投藥如此大量的γ -谷維素的情況下，副作用是一個問題。另外，即使將I天的用量分為數(shù)次進(jìn)行投藥，則導(dǎo)致投藥次數(shù)增加、投藥管理變得復(fù)雜。因此，連續(xù)數(shù)日經(jīng)口投藥大量的γ -谷維素是不現(xiàn)實(shí)的。
[0005]本發(fā)明是鑒于上述實(shí)情而完成的，其目的在于提供一種能夠以較少的用量來發(fā)揮γ-谷維素的作用的組合物及飲食。
【解決課題的手段】
[0006]如上所述的需要大量的γ -谷維素的一個因素可以認(rèn)為是從腸管吸收γ -谷維素的吸收效率較低。因此，本發(fā)明人關(guān)注通過將藥劑進(jìn)行封裝以使得該藥劑的動態(tài)發(fā)生變化的藥物遞送系統(tǒng)(DDS)。通常，用于藥物遞送系統(tǒng)的微米尺寸的粒子，具有易于吸附于腸管黏膜層的性質(zhì)。進(jìn)而，納米尺寸的粒子，能夠附加如下功能，即進(jìn)入黏膜層內(nèi)、藥劑的釋放及送至腸管內(nèi)等功能(參考非專利文獻(xiàn)2)。至今為止，還未能確定利用藥物遞送系統(tǒng)的γ -谷維素在生物體內(nèi)的作用。在此，本發(fā)明人，反復(fù)研究了以實(shí)用的低用量γ -谷維素是否也能夠獲得上述效果，從而完成了本發(fā)明。
[0007]S卩，本發(fā)明的第I方面的組合物，包含:γ -谷維素；和生物相容性顆粒，將所述γ -谷維素封入其內(nèi)部。
[0008]在這種情況下，所述生物相容性顆粒可以含有數(shù)均粒徑為2.5?100nm的聚乳酸-乙醇酸共聚物或其聚乙二醇修飾物。
[0009]另外，上述組合物可以用于改善胰島素抗性。
[0010]另外，上述組合物可以用于抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激。
[0011]另外，上述組合物可以用于抑制源于腸上皮細(xì)胞的IL - 8的分泌。
[0012]另外，上述組合物可以用于治療或預(yù)防選自肥胖、血脂異常、糖耐量受損、糖尿病、動脈硬化癥及炎癥性疾病所形成的組的疾病。
[0013]在此情況下，以I日以上的投放間隔對于患者投藥上述組合物。
[0014]另外，上述投放間隔為7日以上14日以下。
[0015]本發(fā)明的第2方面的飲食含有上述本發(fā)明第I方面的組合物。
【發(fā)明效果】
[0016]根據(jù)本發(fā)明，通過封入生物相容性顆粒提高了從腸管吸收γ -谷維素的吸收效率，能夠以較少的用量發(fā)揮γ -谷維素的作用。
【【附圖說明】】
[0017]圖1 (A)是表示投藥γ -谷維素封入粒子的遺傳性肥胖小鼠的體重的經(jīng)時(shí)變化圖。圖1(B)是表示投藥γ -谷維素的遺傳性肥胖小鼠的體重的經(jīng)時(shí)變化的圖。
圖2(A)是表示投藥γ -谷維素封入粒子的遺傳性肥胖小鼠的血糖值的經(jīng)時(shí)變化圖。圖2(B)是表示投藥γ -谷維素的遺傳性肥胖小鼠的血糖值的經(jīng)時(shí)變化圖。
圖3(A)是表示對投藥γ -谷維素封入粒子的遺傳性肥胖小鼠的葡萄糖耐受性試驗(yàn)中血糖值的經(jīng)時(shí)變化的圖(其I)。圖3(B)是表示從圖3(A)的結(jié)果得到的曲線下面積(AUC)的圖。圖3(C)是表示對于投藥γ -谷維素的遺傳性肥胖小鼠的葡萄糖耐受性試驗(yàn)中血糖值的經(jīng)時(shí)變化的圖(其I)。圖3(D)是表示從圖3(C)的結(jié)果得到的AUC的圖。
圖4(A)是表示投藥γ -谷維素封入粒子的遺傳性肥胖小鼠中血漿中的中性脂肪的濃度的圖。圖4(B)是表示投藥γ -谷維素封入粒子的遺傳性肥胖小鼠的糞便中的脂質(zhì)濃度的圖。
圖5是表示投藥γ -谷維素封入粒子的遺傳性肥胖小鼠中血漿中的胰島素的濃度的圖。
圖6是表示投藥γ -谷維素封入粒子的遺傳性肥胖小鼠中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)應(yīng)激標(biāo)記物基因的表達(dá)量的圖。圖6(A)表示Chop的表達(dá)量。圖6(B)表示ERdj4的表達(dá)量。圖6 (C)表示Xbpls的表達(dá)量。
圖7是表示從通過TNF - α刺激的腸上皮細(xì)胞所分泌的IL - 8的量的圖。圖7㈧是由γ -谷維素進(jìn)行預(yù)處理的情況，圖7 (B)是由γ -谷維素封入粒子進(jìn)行預(yù)處理的情況，圖7 (C)是由作為PLGA粒子的對照而使用FITC封入粒子進(jìn)行預(yù)處理的情況。
圖8是將由腸上皮細(xì)胞所獲取的FITC的量通過由共聚焦激光顯微鏡進(jìn)行分析得到的焚光強(qiáng)度來表不的圖。圖8 (A)表不添加FITC封入粒子后當(dāng)天的焚光強(qiáng)度。圖8(B)表不在添加FITC封入粒子后的第I天的熒光強(qiáng)度。圖8 (C)表示在添加FITC封入粒子后的第3天的熒光強(qiáng)度。圖8(D)表示在添加FITC封入粒子后的第7天的熒光強(qiáng)度。
圖9(A)是表示投藥γ -谷維素封入粒子的遺傳性肥胖小鼠，其4周期間內(nèi)的體重的經(jīng)時(shí)變化的圖。圖9(B)是表示投藥γ -谷維素的遺傳性肥胖小鼠，其4周期間內(nèi)的體重的經(jīng)時(shí)變化的圖。
圖10㈧是表示投藥γ -谷維素封入粒子的遺傳性肥胖小鼠其4周期間的血糖值的經(jīng)時(shí)變化的圖。圖10(B)是表示投藥γ -谷維素的遺傳性肥胖小鼠其4周期間的血糖值的經(jīng)時(shí)變化的圖。
圖1l(A)是表示對投藥γ -谷維素封入粒子的遺傳性肥胖小鼠的葡萄糖耐受性試驗(yàn)中，血糖值的經(jīng)時(shí)變化的圖(其2)。圖1l(B)是表示從圖1l(A)的結(jié)果得到的AUC的圖。(C)是表示對于投藥γ -谷維素的遺傳性肥胖小鼠的葡萄糖耐受性試驗(yàn)中血糖值的經(jīng)時(shí)變化的圖(其2)。(D)是表示從圖11 (C)的結(jié)果得到的AUC的圖。
圖12(A)是表示對投藥γ -谷維素封入粒子的遺傳性肥胖小鼠的胰島素抗性試驗(yàn)中血糖值的經(jīng)時(shí)變化的圖。圖12(B)是表示從圖12(A)的結(jié)果得到的AUC的圖。圖12(C)是表示對投藥γ -谷維素的遺傳性肥胖小鼠的胰島素抗性試驗(yàn)中血糖值的經(jīng)時(shí)變化的圖。圖12(D)是表示從圖12(C)的結(jié)果得到的AUC的圖。
圖13是表示投藥γ -谷維素封入粒子或γ-谷維素的遺傳性肥胖小鼠的血漿中的中性脂肪的濃度的圖。
圖14是表示投藥γ -谷維素封入粒子或γ-谷維素的遺傳性肥胖小鼠中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)記基因的表達(dá)量的圖。圖14(A)表示丘腦下部的Chop的表達(dá)量。圖14(B)表示丘腦下部的ERdj4的表達(dá)量。圖14(C)表示胰島中的ERdj4的表達(dá)量。圖14(D)表示胰島中的Xbpls的表達(dá)量。
圖15是表示投藥γ -谷維素封入粒子或γ-谷維素的遺傳性肥胖小鼠中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)記基因的表達(dá)量的圖。圖15(A)表示腸間膜的脂肪組織中Chop的表達(dá)量。圖15(B)表示腸間膜的脂肪組織中的Xbpls的表達(dá)量。圖15(C)表示肝臟中的Chop的表達(dá)量。圖15(D)表示肝臟中的Xbpls的表達(dá)量。
圖16是表示投藥γ -谷維素封入粒子或γ-谷維素的遺傳性肥胖小鼠中的炎癥性細(xì)胞因子及趨化因子基因的表達(dá)量的圖。圖16(A)表示附睪的脂肪組織中的TNFa的表達(dá)量。圖16(B)表示附睪的脂肪組織中的MCP -1的表達(dá)量。圖16(C)表示皮下脂肪組織中的TNFa的表達(dá)量。圖16(D)表示皮下脂肪組織中的MCP — I的表達(dá)量。
【【具體實(shí)施方式】】
[0018]對于本發(fā)明的實(shí)施方式進(jìn)行說明。
(實(shí)施方式I)
首先，對于本發(fā)明的實(shí)施方式I進(jìn)行說明。本實(shí)施方式的組合物，含有γ -谷維素、以及將γ -谷維素封入其內(nèi)部的生物相容性顆粒。
[0019]γ -谷維素是米糠等脂質(zhì)中所含有的生理活性物質(zhì)。γ -谷維素是留醇或三萜醇與阿魏酸進(jìn)行酯連接的化合物或其混合物。γ -谷維素，主要可以從米糠油、米胚芽油提取。另外，可以利用市售的γ -谷維素(和光純藥社制)。
[0020]將γ -谷維素封入其內(nèi)部的生物相容性顆粒，可以由生物相容性聚合物來制備。生物相容性聚合物，由于其各種各樣的平均鏈長，導(dǎo)致內(nèi)部粘性及聚合物特性的不同。本實(shí)施方式中所用的聚合物，優(yōu)選具有對生物體的刺激或毒性較低的生物相容性，是在投藥后進(jìn)行分解代謝的生物體內(nèi)分解性的聚合物。作為生物體內(nèi)分解性的聚合物，例如可以舉出聚羥基丁酸、聚羥基戊酸乙酯等高分子，以及膠原蛋白、醋酸纖維素、細(xì)菌纖維素、高直鏈玉米淀粉、淀粉、殼聚糖等天然高分子等。
[0021]從生物相容性聚合物所得到的生物相容性顆粒，優(yōu)選將所封入的γ -谷維素持續(xù)釋放，即逐漸釋放。為此，作為生物相容性聚合物，例如為分子量5000?200000的聚合物，優(yōu)選分子量為5000?25000的聚合物。
[0022]生物相容性顆粒，可以由生物相容性聚合物，例如生物相容性聚酯來制備。生物相容性聚酯為選自例如D，L -丙交酯、D -丙交酯、L -丙交酯、D，L -乳酸、D -乳酸、L -乳酸、乙交酯、乙醇酸、ε -己內(nèi)酯、ε -羥基己酸、γ -丁內(nèi)酯、γ -羥丁酸、δ -戊內(nèi)酯、δ -羥基戊酸、羥丁酸、蘋果酸等中的I種或I種以上的單體通過聚合而合成的聚酯。優(yōu)選地，生物相容性聚合物為聚乳酸、聚乙醇酸、乳酸.乙醇酸共聚物、或乳酸?天冬氨酸共聚物，特別優(yōu)選聚乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)或聚乙二醇/殼聚糖修飾-PLGA(PEG/CS - PLGA)。
[0023]作為生物相容性聚合物的PLGA，例如是以1:99?99:1、優(yōu)選為3:1的比例，由乳酸或丙交酯與乙醇酸或乙交酯所形成的共聚物。PLGA可以是將任意的單體通過普通的方法進(jìn)行合成，也可以使用市售的。作為市售的PLGA，例如有PLGA7520(乳酸:乙醇酸=75:25，平均重量分子量20000，和光純藥社制)。乳酸及乙醇酸的含量為25重量％?65重量％的PLGA是非晶體，可溶于丙酮等有機(jī)溶劑，故而優(yōu)選。
[0024]在由PIGA制備上述生物相容性顆粒的情況下，生物相容性顆粒中可以含有粒徑不足lOOOnm，例如2.5