菊粉末50g，加入500mL 70%乙醇，加熱回流提取2次，每次3h， 合并2次提取液后過濾，所得濾液于75 °C水浴中旋轉蒸發(fā)濃縮，再加入600mL水繼續(xù)濃縮至 300mL，所得濃縮液即為杭白菊提取液I ; 3) 超聲提?。合蚝及拙仗崛∫篒中加入300 mL石油醚，采用功率為800W，頻率為40kHz 的超聲波處理10 min，提取3次，合并提取液，回收溶劑，剩余溶液即為杭白菊提取液II ; 4) 純化：杭白菊提取液II以5mL/min的流速通過AB-8大孔吸附樹脂后，采用乙醇進行 洗脫，收集洗脫液； 5) 濃縮干燥：洗脫液通過旋轉蒸發(fā)濃縮后，采用真空法進行干燥即可。
[0026] 實施例7 一種菊花中黃酮的提取方法，包括以下步驟： 1) 粉碎：取干燥均勻的杭白菊粉碎，過30~60目篩后得到杭白菊粉末； 2) 溶劑提取：稱取杭白菊粉末50g，加入500mL 70%乙醇，加熱回流提取2次，每次3h， 合并2次提取液后過濾，所得濾液于75 °C水浴中旋轉蒸發(fā)濃縮，再加入600mL水繼續(xù)濃縮至 300mL，所得濃縮液即為杭白菊提取液I ; 3) 超聲提取：向杭白菊提取液I中加入300 mL石油醚，采用功率為800W，頻率為40kHz 的超聲波處理10 min，提取3次，合并提取液，回收溶劑，剩余溶液即為杭白菊提取液II ; 4) 純化：杭白菊提取液II以5mL/min的流速通過DM-130大孔吸附樹脂后，采用乙醇進 行洗脫，收集洗脫液； 5) 濃縮干燥：洗脫液通過旋轉蒸發(fā)濃縮后，采用真空法進行干燥即可。
[0027] 實施例8 一種菊花中黃酮的提取方法，包括以下步驟： 1) 粉碎：取干燥均勻的杭白菊粉碎，過30~60目篩后得到杭白菊粉末； 2) 溶劑提?。悍Q取杭白菊粉末50g，加入500mL 70%乙醇，加熱回流提取2次，每次3h， 合并2次提取液后過濾，所得濾液于75 °C水浴中旋轉蒸發(fā)濃縮，再加入600mL水繼續(xù)濃縮至 300mL，所得濃縮液即為杭白菊提取液I ; 3) 超聲提取：向杭白菊提取液I中加入300 mL石油醚，采用功率為480W，頻率為40kHz 的超聲波處理10 min，提取3次，合并提取液，回收溶劑，剩余溶液即為杭白菊提取液II ; 4) 純化：杭白菊提取液II以5mL/min的流速通過DM-130大孔吸附樹脂后，采用乙醇進 行洗脫，收集洗脫液； 5) 濃縮干燥：洗脫液通過旋轉蒸發(fā)濃縮后，采用真空法進行干燥即可。
[0028] 實施例9 一種菊花中黃酮的提取方法，包括以下步驟： 1) 粉碎：取干燥均勻的杭白菊粉碎，過30~60目篩后得到杭白菊粉末； 2) 溶劑提?。悍Q取杭白菊粉末100g，加入1000 mL 70%乙醇，加熱回流提取2次，每次 3h，合并2次提取液后過濾，所得濾液于75°C水浴中旋轉蒸發(fā)濃縮，再加入1200mL水繼續(xù)濃 縮至600mL，所得濃縮液即為杭白菊提取液I ; 3) 超聲提?。合蚝及拙仗崛∫篒中加入600 mL石油醚，采用功率為800W，頻率為40kHz 的超聲波處理10 min，提取3次，合并提取液，回收溶劑，剩余溶液即為杭白菊提取液II ; 4) 純化：杭白菊提取液II以5mL/min的流速通過DM-130大孔吸附樹脂后，采用乙醇進 行洗脫，收集洗脫液； 5) 濃縮干燥：洗脫液通過旋轉蒸發(fā)濃縮后，采用真空法進行干燥即可。
[0029] 對比例1 一種菊花中黃酮的提取方法，包括以下步驟： 1) 粉碎：取干燥均勻的杭白菊粉碎，過30~60目篩后得到杭白菊粉末； 2) 溶劑提?。悍Q取杭白菊粉末50g，加入500mL丙酮，加熱回流2次(各3h)，合并2次 提取液后過濾，所得濾液于75°C水浴中旋轉蒸發(fā)濃縮，再加入600mL水繼續(xù)濃縮至300mL， 所得濃縮液即為杭白菊提取液I; 3) 超聲提?。合蚝及拙仗崛∫篒中加入300 mL石油醚，采用功率為800W，頻率為40kHz 的超聲波處理10 min，提取3次，合并提取液，回收溶劑，剩余溶液即為杭白菊提取液II ; 4) 純化：杭白菊提取液II以5mL/min的流速通過DlOl大孔吸附樹脂后，采用乙醇進行 洗脫，收集洗脫液； 5) 濃縮干燥：洗脫液通過旋轉蒸發(fā)濃縮后，采用真空法進行干燥，得到杭白菊黃酮提 取物。
[0030] 對比例2 一種菊花中黃酮的提取方法，包括以下步驟： 1) 粉碎：取干燥均勻的杭白菊粉碎，過30~60目篩后得到杭白菊粉末； 2) 溶劑提?。悍Q取杭白菊粉末50g，加入500mL甲醇，加熱回流2次(各3h)，合并2次 提取液后過濾，所得濾液于75°C水浴中旋轉蒸發(fā)濃縮，再加入600mL水繼續(xù)濃縮至300mL， 所得濃縮液即為杭白菊提取液I; 3) 超聲提?。合蚝及拙仗崛∫篒中加入300 mL石油醚，采用功率為800W，頻率為40kHz 的超聲波處理10 min，提取3次，合并提取液，回收溶劑，剩余溶液即為杭白菊提取液II ; 4) 純化：杭白菊提取液II以5mL/min的流速通過DlOl大孔吸附樹脂后，采用乙醇進行 洗脫，收集洗脫液； 5) 濃縮干燥：洗脫液通過旋轉蒸發(fā)濃縮后，采用真空法進行干燥，得到杭白菊黃酮提 取物。
[0031] 為了觀察實施例1~9及對比例1~2的杭白菊黃酮得率，可采用如下方法進行測試： 準確稱取實施例及對比例中的杭白菊黃酮提取物各25mg，置于25ml容量瓶中，加甲醇 2. 5ml充分溶解，再用蒸餾水定容。取樣品溶液各5ml，加入25ml容量瓶中，加蒸餾水至6ml， 加5%亞硝酸鈉溶液Iml，混勻，放置7min，加10%硝酸鋁溶液Iml，混勻，靜置7min，加入5% 氫氧化鈉溶液l〇ml，加蒸餾水定容，混勻，靜置20min。依據硝酸鋁-亞硝酸鈉顯色法，測定 510nm波長下各樣品的吸光度A，試驗重復三次取平均值。杭白菊花各提取樣品的黃酮濃度 通過蘆丁標準曲線得到，并以此計算出黃酮的得率。
[0032] Y=[(C*V*F/M*106)X100]% 公式中：c 一杭白菊樣品溶液黃酮濃度，μg/ml ; V 一杭白菊樣品溶液體積，ml ; F -稀釋的倍數； M-杭白菊樣品質量，g ; Y -杭白菊黃酮得率，％。
[0033] 實施例1~9及對比例1~2的黃酮得率如下表所示：
綜上可知，實施例1~2所得杭白菊黃酮的得率最高，各工藝參數值也均達到最優(yōu)，所用 試劑成本低、毒性小，操作簡單，整個提取時間短，為從菊花天然植物資源入手開發(fā)品質優(yōu) 良的抗氧化、延衰老、防癌的食品和藥品奠定基礎。
【主權項】
1. 一種菊花中黃酮的提取方法，其特征在于，包括以下步驟： 粉碎：取干燥均勻的菊花粉碎過篩后得到菊花粉末； 溶劑提?。悍Q取菊花粉末，加入提取劑I，加熱回流提取2次，每次提取3h，合并2次提 取液后過濾，所得濾液于75°C水浴中旋轉蒸發(fā)濃縮，再加入蒸餾水繼續(xù)濃縮，所得濃縮液即 為菊花的提取液I; 超聲提?。合蚓栈ㄌ崛∫篒中加入提取劑II，超聲波處理10min，提取3次，合并提取 液，回收溶劑，剩余溶液即為菊花的提取液II; 純化：菊花的提取液II以l~l〇mL/min的流速通過大孔吸附樹脂后，采用洗脫液進行洗 脫，收集洗脫液； 濃縮干燥：洗脫液通過旋轉蒸發(fā)濃縮后，采用真空法進行干燥即可。2. 如權利要求1所述的一種菊花中黃酮的提取方法，其特征在于：所述菊花為杭白菊。3. 如權利要求1所述的一種菊花中黃酮的提取方法，其特征在于：所述步驟1中菊花 粉末的粒度為20~300目。4. 如權利要求1所述的一種菊花中黃酮的提取方法，其特征在于：所述步驟2中提取 劑I為乙醇與水的混合物。5. 如權利要求4所述的一種菊花中黃酮的提取方法，其特征在于：所述乙醇與水的混 合物中乙醇體積為兩者混合體積的50°/『99%。6. 如權利要求1所述的一種菊花中黃酮的提取方法，其特征在于：所述步驟3中提取 劑II為石油醚。7. 如權利要求5所述的一種菊花中黃酮的提取方法，其特征在于：所述石油醚的沸點 為 30~60°C。8. 如權利要求1所述的一種菊花中黃酮的提取方法，其特征在于：所述步驟3中的超 聲處理的條件為超聲功率為200~800W，超聲頻率為20~40kHz。9. 如權利要求1所述的一種菊花中黃酮的提取方法，其特征在于：所述步驟4中的大 孔吸附樹脂為球狀非極性吸附劑或苯乙烯型大孔吸附樹脂。10. 如權利要求1所述的一種菊花中黃酮的提取方法，其特征在于：所述步驟4中的洗 脫液為純乙醇。
【專利摘要】本發(fā)明屬于食品與醫(yī)藥技術領域，具體涉及一種菊花中黃酮的提取方法。本發(fā)明的提取黃酮的步驟如下：取干燥均勻的菊花粉碎過篩后得到菊花粉末，采用乙醇與水的混合物加熱回流進行提取，加水濃縮后即為菊花的提取液；繼續(xù)加入丙酮提取，超聲波處理，回收溶劑，剩余溶液通過大孔吸附樹脂后，收集洗脫液并進行濃縮干燥，得到菊花的黃酮提取物。本發(fā)明提取菊花中黃酮的方法結合回流、超聲、大孔吸附樹脂輔助手段，控制簡單，方便操作，提高了提取效率，有效去除雜質成分，為開發(fā)品質優(yōu)良的抗氧化、延衰老、防癌的食品和藥品奠定基礎。
【IPC分類】A61P35/00, A61P39/06, A61K36/287, A23L33/105
【公開號】CN105267275
【申請?zhí)枴緾N201510664230
【發(fā)明人】李雪暉, 田龍, 魯云風, 韓雪梅, 張英君, 惠豐立, 夏敏
【申請人】南陽師范學院
【公開日】2016年1月27日
【申請日】2015年10月15日