練過程同單數(shù)日，測試當(dāng)天（第11 天）不灌酒及鹽水，放入CPP箱中測試15分鐘，記錄動物在各箱的停留時(shí)間。
[0061] 2. 3觀察指標(biāo)及檢測方法
[0062] 2. 3. 1采用ZZ-6小鼠自發(fā)活動測試儀計(jì)數(shù)行為敏化實(shí)驗(yàn)中小鼠自發(fā)活動次數(shù)。 陽06引 2. 3. 2采用CPP-100條件位置偏好測試儀測定CPP實(shí)驗(yàn)中小鼠黑箱和白箱停留時(shí) 間。 W64] 2. 3. 3采用ELISA分析法測定行為敏化實(shí)驗(yàn)中小鼠腦組織多己胺、谷氨酸、丫-氨 基下酸的濃度水平。 陽0化]3.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
[0066] 各數(shù)據(jù)均W立生SD表示，采用SPSS17. 0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，兩組比較采用t檢 驗(yàn)；多組間比較采用化e-WayAN0VA分析，然后用LSD法進(jìn)行兩兩比較；行為敏化實(shí)驗(yàn)激發(fā) 期多組間比較采用協(xié)方差分析方法。
[0067] 4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0068] 4. 1行為敏化的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0069] 4. 1. 1本發(fā)明對小鼠自發(fā)活動的影響第1天與第9天，中藥+鹽水組狂+S，η= 30) 與鹽水+鹽水組（S+S，n= 30)相比，Z+S組小鼠的自發(fā)活動均無顯著性差異（Ρ〉0.05)，停 藥2天，第12天給予相應(yīng)劑量藥物激發(fā)后，中藥+鹽水+中藥組狂+S+Z，n= 10)與鹽水+ 鹽水+中藥組（S+S+Z，n= 10)相比，小鼠的自發(fā)活動差異無顯著性（P〉0.05);表明本發(fā)明 自身對小鼠自發(fā)活動沒有影響，也不誘導(dǎo)小鼠行為敏化形成，見圖1。
[0070] 4. 1. 2本發(fā)明對酒精單次誘導(dǎo)小鼠高活動性的影響鹽水+鹽水組（S+S，η= 30)小 鼠自發(fā)活動次數(shù)為230. 0次，鹽水+酒精組（S巧，η= 30)小鼠自發(fā)活動次數(shù)為335. 2次， 表明單次灌胃酒精增加小鼠的自發(fā)活動（Ρ<〇. 01)。中藥+酒精組狂+Ε，η= 30)小鼠自發(fā) 活動次數(shù)256. 3次，與S+E組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ρ<0. 05)，表明本發(fā)明能降低酒精單次誘 導(dǎo)的小鼠高活動性，見圖2。
[0071]4. 1. 3本發(fā)明對酒精誘導(dǎo)的小鼠行為敏化形成的影響第12天給予鹽水組（S+S，η =10)灌胃鹽水和酒精化2g/kg)的自發(fā)活動次數(shù)為317. 1次（圖3Α)，給予鹽水+酒精 組（S+E，n= 10)灌胃鹽水和酒精化2g/kg)的自發(fā)活動次數(shù)為495. 0次（圖3D)，明顯高 于S+S組（p<0. 05)，表明行為敏化模型建立成功。第12天時(shí)，給予中藥+酒精組狂+E，η =10)灌胃鹽水和酒精化2g/kg)的自發(fā)活動次數(shù)為386.4次（圖3Β)，明顯低于模型組 (p<0. 01)，表明本發(fā)明能抑制酒精誘導(dǎo)的小鼠行為敏化的形成。
[0072] 4. 1. 4本發(fā)明對酒精誘導(dǎo)的小鼠行為敏化表達(dá)的影響第12天給予鹽水組（S+S，η =10)灌胃鹽水和酒精化2g/kg)的自發(fā)活動次數(shù)為317. 1次（圖3Α)，給予鹽水+酒精組 (S+E，η= 10)灌胃鹽水和酒精化2g/kg)的自發(fā)活動次數(shù)為495. 0次（圖3D)，明顯高于 S+S組，表明行為敏化模型建立成功。第12天時(shí)，給予鹽水+酒精組（S巧，η= 10)灌胃中 藥和酒精化2g/kg)的自發(fā)活動次數(shù)為376. 0次（圖3D)，明顯低于模型組（ρ<0. 05)，表明 本發(fā)明能抑制酒精誘導(dǎo)的小鼠行為敏化的表達(dá)。 陽07引 4. 1. 5本發(fā)明對小鼠腦組織DA、Glu、GABA濃度水平的影響。
[0074] 激發(fā)階段開始，測定小鼠自發(fā)活動次數(shù)后，立即處死小鼠取腦組織，測定腦組織 中DA、GABA、Glu濃度。結(jié)果鹽水+酒精組DA濃度為69. 35ng/L明顯高于鹽水+鹽水組， 表明酒精誘導(dǎo)的行為敏化小鼠中腦組織DA水平升高（p<0.01);鹽水+酒精組Glu濃度 為136. 52nmom/l，高于鹽水+鹽水組，表明酒精誘導(dǎo)行為敏化小鼠中腦組織Glu水平升 高（p<0. 05)。中藥+酒精組經(jīng)酒精激發(fā)后，Ξ種遞質(zhì)濃度和鹽水+鹽水組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (p〉0. 05)，提示本發(fā)明能逆轉(zhuǎn)酒精引起的DA、Glu的高濃度水平，但對腦組織中丫-氨基下 酸水平無影響。見表1。 陽0巧]
[0076] 表1 :激發(fā)階段開始后，小鼠腦組織中多己胺（DA)、谷氨酸（Glutamate)、丫-氨基 下酸（GABA)遞質(zhì)含量變化。"^<0. 01表示和鹽水組比較高于鹽水組，#p<0. 05表示和鹽水 組比較高于鹽水組（均數(shù)+標(biāo)準(zhǔn)差，η= 10,采用單因素方差分析LSD法）。 陽077] 4. 2條件位置偏好實(shí)驗(yàn)（CP巧的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0078] 4. 2. 1小鼠的天然偏好效應(yīng)實(shí)驗(yàn) 陽0巧]如圖4,小鼠在900s的預(yù)測實(shí)驗(yàn)，在黑箱停留時(shí)間為537. 7+27. 6. S。結(jié)果提示， 小鼠對四周為黑色、底面為金屬網(wǎng)格狀盒子具有天偏愛性，因此，我們采用有偏性的實(shí)驗(yàn)設(shè) 計(jì)將白箱作為伴藥箱，黑箱作為非伴藥箱。
[0080] 4. 2. 2在CPP模型上本發(fā)明致精神依賴潛能研究治療成癒的藥物首先要排除自身 的成癒性，故需單獨(dú)觀察本發(fā)明自身有沒有獎賞效應(yīng)。經(jīng)過五個周期（10天）的訓(xùn)練，酒精 組在伴藥箱時(shí)間為736.Os，顯著高于鹽水組在伴藥箱時(shí)間245. 5s (P<0. 001)，提示小鼠己 形成偏愛。中藥組在白箱時(shí)間239.0s，和鹽水組無差異，提示本發(fā)明自身不具有成癒的潛 力，見圖5。
[0081] 4. 2. 3本發(fā)明對酒精誘導(dǎo)小鼠CPP形成期影響經(jīng)過五個訓(xùn)練周期W后，酒精組小 鼠在伴藥箱停留的時(shí)間為623. 8s，顯著高于鹽水組234.Os(P<0. 01)，表明小鼠對位置的偏 好已形成，CPP模型建立成功。中藥+酒精組小鼠在伴藥箱停留的時(shí)間為438. 7s，明顯低于 酒精組（P<〇. 05)，提示本發(fā)明能抑制酒精誘導(dǎo)小鼠CPP形成，見圖6。 陽0間 5.結(jié)論
[0083] 本發(fā)明藥物不僅能降低酒精引起的小鼠急性高活動性，同時(shí)對酒精誘導(dǎo)的小鼠行 為敏化的形成和表達(dá)都有良好的抑制作用，CPP實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)本發(fā)明藥物具有防止酒精誘導(dǎo)小 鼠條件位置偏好形成的作用；從神經(jīng)學(xué)角度出發(fā)，本發(fā)明能對抗性抑制酒精行為敏化小鼠 的DA、Glu病態(tài)性釋放，逆轉(zhuǎn)酒精刺激引起的高DA、Glu水平，奠定了本發(fā)明防治小鼠中樞神 經(jīng)系統(tǒng)的可塑性變化的神經(jīng)生物學(xué)基礎(chǔ)，即調(diào)節(jié)因情志"思"導(dǎo)致的陰陽失衡及臟腑功能素 亂，從而起到戒除酒精成癒及依賴的作用，同時(shí)本發(fā)明自身不具有藥物成癒及依賴特質(zhì)，可 為中醫(yī)藥防治酒精成癒及酒精依賴提供新的治法和制劑。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種治療酒精成癮或/和依賴的藥物組合物，其特征在于：它是由下述重量配比的 原料藥制備而成的制劑：仙靈脾2-6份，酸棗仁3-10份。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料藥制 備而成的制劑：仙靈脾3-5份，酸棗仁4-6份。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料藥制 備而成的制劑：仙靈脾4份，酸棗仁5份。4. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的藥物組合物，其特征在于：所述仙靈脾為生仙靈 脾或/和炙仙靈脾，所述酸棗仁為生酸棗仁或/和炒酸棗仁。5. 根據(jù)權(quán)利要求1-4任意一項(xiàng)所述的藥物組合物，其特征在于：它是由仙靈脾，酸棗仁 原生藥粉，或水或有機(jī)溶劑提取物為活性成分，加入藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制 備而成的口服制劑。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組合物，其特征在于：所述的口服制劑為顆粒劑、散劑、 丸劑、滴丸劑、膠囊劑、軟膠囊劑、片劑或口服液。7. -種制備權(quán)利要求1-6任意一項(xiàng)所述的藥物組合物的方法，它包括如下步驟： a、 稱取各重量配比的原料藥； b、 直接打粉；或加水煎煮；或加有機(jī)溶劑提取，再加入藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性 成分制備而成的口服制劑。8. 權(quán)利要求1-6任意一項(xiàng)的藥物組合物在制備酒精成癮或/和依賴的用途。9. 權(quán)利要求1-6任意一項(xiàng)所述的藥物組合物在制備治療酒毒所致脾腎兩虛（氣陽兩 虛），心神失養(yǎng)的藥物中的用途。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種治療酒精成癮或/和依賴的藥物組合物，它是由下述重量配比的原料藥制備而成的制劑：仙靈脾2-6份，酸棗仁3-10份。本發(fā)明還提供了該藥物組合物的制備方法和用途。本發(fā)明藥物組合物能有效的消除酒精成癮及依賴的“成癮記憶”，即調(diào)節(jié)因情志“思”導(dǎo)致的陰陽失衡及臟腑功能紊亂，具有良好的戒除酒精成癮及依賴的作用，為臨床用藥提供了一種新的選擇。
【IPC分類】A61P25/32, A61K36/725
【公開號】CN105381018
【申請?zhí)枴緾N201511016442
【發(fā)明人】扈曉宇, 溫大超, 扈曉剛, 陳云鳳, 林武
【申請人】成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院
【公開日】2016年3月9日
【申請日】2015年12月29日