一種開菲爾發(fā)酵黑人參粉及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種開菲爾發(fā)酵黑人參粉及其制備方法，屬于藥物保健品技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 人參皂巧并不是W天然形式被人體直接吸收，也不被胃液及肝臟酶分解，能被人 體直接吸收利用的程度極低。人參真正起治療作用的是人參皂巧經(jīng)腸道微生物代謝生成的 次生代謝產(chǎn)物，即人參皂巧C-K、化1、化2、Rgi、R拓等稀有人參皂巧。稀有人參皂巧具有極強(qiáng) 的生理活性，如人參皂巧C-K、化1、化2等，具有極強(qiáng)的抗癌活性和醫(yī)藥保健價值。
[0003] 人體腸道細(xì)菌的種類和個體代謝差異很大，日常飲食、健康狀況、精神壓力等均會 影響人體內(nèi)人參皂巧的代謝和吸收，不同的人會產(chǎn)生不同的藥效。因此，提高人參制品中的 稀有人參皂巧含量，增強(qiáng)藥理活性，提高藥效，節(jié)省藥材資源，都具有十分重要的意義。
[0004] 在現(xiàn)有技術(shù)中，黑人參一般采用發(fā)酵法和加熱法。發(fā)酵法是W細(xì)菌類、真菌類、擔(dān) 子菌、腸道菌等為菌種，經(jīng)發(fā)酵過程中產(chǎn)生的復(fù)合酶對人參皂巧進(jìn)行水解反應(yīng)，完成人參皂 巧的生物轉(zhuǎn)化。發(fā)酵法制成的黑人參制品含有大量的稀有人參皂巧和巧元，其優(yōu)點是反應(yīng) 條件溫和，發(fā)酵過程粗放，不需嚴(yán)格的無菌條件，操作簡單，無污染。加熱法是國內(nèi)外生產(chǎn)紅 參的主要方法。黑人參一般采用九蒸九曬的生產(chǎn)工藝，利用美拉德反應(yīng)、氧化反應(yīng)、熱水解 反應(yīng)所產(chǎn)生的褐變而制成的黑人參。其缺點是稀有人參皂巧含量低，反應(yīng)條件劇烈，專屬性 不強(qiáng)，耗工耗時，浪費能源。另有采用酶解法獲得稀有人參皂巧的大量報道，其方法是W人 參皂巧糖巧酶為高效催化劑對人參底物進(jìn)行酶解，轉(zhuǎn)化成稀有人參皂巧。一般酶反應(yīng)適合 溫度為40°c~50°C，制備人參皂巧C-K時，皂巧底物濃度在0.2%~1.0%之間；制備人參皂 巧陸2時，皂巧底物濃度在2%~2. 5%之間。其優(yōu)點是可W定向轉(zhuǎn)化，反應(yīng)條件溫和。缺點 是反應(yīng)底物濃度低，產(chǎn)量低，操作和技術(shù)條件復(fù)雜。 陽0化]開菲爾粒（Kefirgrain)起源于世界第一長壽地區(qū)的高加索地區(qū)，經(jīng)自然形成的 不規(guī)則乳白色或乳黃色、形狀不規(guī)則的菌塊顆粒物。開菲爾粒是由數(shù)十種乳酸菌、乳球菌、 明串珠菌、酵母菌、醋酸菌和枯草芽抱桿菌所組成的復(fù)合型發(fā)酵菌，其中乳酸菌包括高加索 乳桿菌、開菲爾乳桿菌、醋酸菌等；乳球菌包括乳鏈球菌、明串球菌等；酵母菌包括巨大克 魯維氏酵母菌、串狀釀母菌等。開菲爾粒所包含的微生物變化多樣，是數(shù)十種微生物幾千年 來長期共生所形成的具有特定菌相的結(jié)合體。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)不足，提供一種稀有人參皂巧含量高，經(jīng)濟(jì)實用， 易于操作的開菲爾發(fā)酵黑人參粉及其制備方法。
[0007] 本發(fā)明的技術(shù)方案是：一種開菲爾發(fā)酵黑人參粉的制備方法，是W開菲爾粒為菌 種，經(jīng)菌種馴化、產(chǎn)酶誘導(dǎo)制成人參皂巧復(fù)合酶發(fā)酵液；人參經(jīng)固體發(fā)酵、滅活、真空干燥、 超微粉碎，制成開菲爾發(fā)酵黑人參粉。
[0008] 上述方案中： 所述的人參皂巧復(fù)合酶發(fā)酵液是將開菲爾粒逐步轉(zhuǎn)接至脫脂奶粉：麥芽汁：水分別為 1:8:1、1:7:2、1:6:3、1:5:4、1:4:5、1:5:6、0:1:1 的培養(yǎng)基中，依次添加 0. 5%、1. 0%、1. 5〇/〇、 2. 0%、2. 5%、3. 0%、5. 0%的人參粉或人參提取物，分別W25°C~38°C培養(yǎng)24~120h，分離發(fā) 酵液，得到人參皂巧復(fù)合酶發(fā)酵液。
[0009] W0. 2%~0. 5%氯化鋼水溶液作為酶激活劑。
[0010] W人參皂巧復(fù)合酶發(fā)酵液接種人參粉，初期發(fā)酵溫度28°C~38°C，發(fā)酵1~5d; 后期發(fā)酵溫度38°C~42°C，發(fā)酵5~10天。
[0011] 人參是指鮮人參、生曬參、紅參或人參須。
[0012] 一種開菲爾發(fā)酵黑人參粉的制備方法，其步驟如下： (1)人參皂巧復(fù)合酶發(fā)酵液制備：用脫脂奶粉、波美度為12°Be'的麥芽汁、水作為培 養(yǎng)基，人參粉或人參提取物為產(chǎn)酶誘導(dǎo)劑。將開菲爾粒逐步轉(zhuǎn)接至脫脂奶粉：麥芽汁：水分 別為 1:8:1、1:7:2、1:6:3、1:5:4、1:4:5、1:5:6 不同的培養(yǎng)基中，依次加 0. 5%、1. 0%、1. 5〇/〇、 2. 0%、2. 5%、3. 0%的人參粉或人參提取物，分別W25°C~38°C培養(yǎng)24~4她，逐次增加培養(yǎng) 溫度，最后將開菲爾粒接種于麥芽汁：水為1:1的培養(yǎng)基中，添加5. 0%的人參粉或人參提 取物，W35°C~38°C培養(yǎng)48~12化，分離發(fā)酵液，得到人參皂巧復(fù)合酶發(fā)酵液。用此發(fā)酵 液對人參進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵，使其含有的原人參二醇類或Ξ醇類皂巧轉(zhuǎn)化為稀有人參皂巧，制 成開菲爾發(fā)酵黑人參粉。
[0013] (2)W0. 2%~0. 5%氯化鋼水溶液作為酶激活劑，噴入人參表面(人參是指鮮人參、 生曬參、紅參或人參須中一種或幾種組合)，干燥后粉碎成粗粉。
[0014] (3 )粗粉裝入好氧發(fā)酵罐，裝料體積為60%~80%，W30~12化pm速度攬拌，通入 蒸汽，90°C~110°C殺菌20~30min;冷卻至40°CW下；在攬拌情況下按10%~20%接種量 接種人參皂巧復(fù)合酶發(fā)酵液，混合均勻，使含水量達(dá)到30%~90%。
[0015] (4)發(fā)酵罐轉(zhuǎn)速30~12化pm，初期發(fā)酵溫度28°C~38°C，上下通入無菌空氣，發(fā) 酵3~5d;后期發(fā)酵溫度38°C~42°C，發(fā)酵5~10天；每天觀察含水量、溫度、轉(zhuǎn)速等情況， 適時進(jìn)行調(diào)整。
[0016] (5)發(fā)酵完成后，罐內(nèi)通入蒸汽，W100°C~120°C滅活20~30min。 陽017] (6)將冷卻后的發(fā)酵產(chǎn)物裝盤，轉(zhuǎn)入真空干燥箱，W65°C~75°C干燥至水分《5%。
[0018] (7)用帶有超細(xì)粉分離器的粉碎機(jī)粉碎，粉碎成100~250目的粉末，制成開菲爾 發(fā)酵黑人參粉。
[0019] 本發(fā)明所述的方法是采用開菲爾粒為菌種，利用其復(fù)雜的微生物結(jié)構(gòu)、菌群的多 樣化和共生等特性，通過菌種馴化，選育出旺盛的優(yōu)勢菌群，通過誘導(dǎo)制備人參皂巧復(fù)合酶 發(fā)酵液。用此發(fā)酵液對人參進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵，使其含有的原人參二醇類或Ξ醇類皂巧轉(zhuǎn)化為 稀有人參皂巧，制成開菲爾發(fā)酵黑人參粉。
[0020] 本發(fā)明的原理是：對人參中不被人體直接吸收的原人參二醇類皂巧或Ξ醇類皂巧 進(jìn)行糖基結(jié)構(gòu)修飾改造，利用人參皂巧復(fù)合酶發(fā)酵液對人參進(jìn)行水解，使人參中含有的原 二醇類人參皂巧化1、化2、化I、Rc轉(zhuǎn)化為人參皂巧C-K、化2及其巧元（PPD)，原人參Ξ醇類 皂巧Re、Rgi、Rg2轉(zhuǎn)化成化1及其巧元（PPT)。 陽02U 原人參二醇類皂巧的轉(zhuǎn)化途徑：抓1 一Rd-F2-C-K和巧元（PPD); 化2一Rd-C-Y-C-K和巧元（PPD);Rd-F2-C-K和巧元（PPD);Rd-Rg3-化 2和巧元 (PPD);Rc一Mb一Me一C-K和巧元（PPD)。
[0022] 原人參Ξ醇類皂巧的轉(zhuǎn)化途徑：Re-Rgi或Rg2-F1或化1和巧元（PPT)。
[0023] 人參皂巧C-K(compoundK)是天然的二醇型人參皂巧在人腸道內(nèi)的代謝產(chǎn)物，是 人參真正發(fā)揮藥理高活性的化合物，是一個多祀點，可W直接作用于人體的高效成分。在抗 皮膚老化、抗腫瘤、抗炎、保護(hù)屯、肌、保肝、抗過敏等方面具有更好的生物活性，在神經(jīng)系統(tǒng) 及免疫系統(tǒng)方面具有很好的調(diào)節(jié)作用，出色的藥理活性越來越受醫(yī)學(xué)界的關(guān)注。
[0024] 人參皂巧化1具有促進(jìn)肝細(xì)胞增殖和促進(jìn)DNA合成的作用，可用于治療和預(yù)防肝 炎、肝硬化。
[0025] 人參皂巧化2具有抑制癌細(xì)胞向其它器官轉(zhuǎn)移，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，快速恢復(fù)體質(zhì)， 對癌細(xì)胞具有明顯的抗轉(zhuǎn)移作用，服用人參皂巧化2可增強(qiáng)手術(shù)后傷口的愈合及體力恢復(fù)。 [00%] 本發(fā)明優(yōu)點是：1、反應(yīng)條件溫和，高底物濃度可產(chǎn)出高濃度產(chǎn)物，節(jié)省能源、無需 嚴(yán)格的無菌條件，無污染。2、本方法得到的發(fā)酵黑人參粉稀有人參皂巧含量高，經(jīng)濟(jì)實用， 方法易于操作。3、經(jīng)通化市產(chǎn)品檢驗所檢測（NO:WJ20150459)，黑人參粉人參皂巧化1、化2 、尺邑1,(：-1(、1?拓分別為2.08(111邑/邑）、0.80(111邑/邑）、2.34(111邑/邑）、4.56(111邑/邑）、4.03(111邑/邑）?！揪唧w實施方式】
[0027] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進(jìn)一步地描述。 陽0測 實施例1 開菲爾發(fā)酵黑人參粉的制備方法： 1、人參皂巧復(fù)合酶發(fā)酵液制備：用脫脂奶粉、波美度為12°Be'的麥芽汁、水作為培養(yǎng) 基，人參粉或人參提取物為產(chǎn)酶誘導(dǎo)劑。將開菲爾粒逐步轉(zhuǎn)接至脫脂奶粉：麥芽汁：水分 別為 1:8:1、1:7:2、1:6:3、1:5:4、1:4:5、1:5:6 不同的培養(yǎng)基中，依次加 0. 5%、1. 0%、1. 5〇/〇、 2. 0%、2. 5%、3. 0%的人參粉或人參提取物，分別W25°C~38°C培養(yǎng)24~4她，逐次增加培 養(yǎng)溫度，最后接種于麥芽汁：水為1:1的培養(yǎng)基中，添加5. 0%的人參粉或人參提取物，W 35°C~38°C培養(yǎng)48~12化，分離發(fā)酵液，得到人參皂巧復(fù)合酶發(fā)酵液。
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