0029] 2、W0. 2%~0. 5%氯化鋼水溶液作為酶激活劑，噴入人參表面，干燥后粉碎成粗 粉。
[0030] 3、粗粉裝入好氧發(fā)酵罐，裝料體積為60%~80%，W30~12化pm速度攬拌，通入蒸 汽，90°C~110°C殺菌20~30min;冷卻至40°CW下；在攬拌情況下按10%~20%接種量接 種人參皂巧復合酶發(fā)酵液，混合均勻，使含水量達到30%~90%。
[0031] 4、發(fā)酵罐轉速30~120巧m，初期發(fā)酵溫度28°C~38°C，上下通入無菌空氣，發(fā)酵 3~5d;后期發(fā)酵溫度38°C~42°C，發(fā)酵5~10天；每天觀察含水量、溫度、轉速等情況，適 時進行調整。
[0032] 5、發(fā)酵完成后，罐內通入蒸汽，W100°C~120°C滅活20~30min。
[0033] 6、將冷卻后的發(fā)酵產(chǎn)物裝盤，轉入真空干燥箱，W65°C~75°C干燥至水分《5%。
[0034] 7、用帶有超細粉分離器的粉碎機粉碎，粉碎成100~250目的粉末，制成開菲爾發(fā) 酵黑人參粉。
[0035] 本發(fā)明所述的方法制成的開菲爾發(fā)酵黑人參粉，含有可被人體直接吸收利用而發(fā) 揮治療作用的稀有人參皂巧C-K、化1、化2。
[0036] 本發(fā)明：經(jīng)通化市產(chǎn)品檢驗所檢測（NO:WJ20150459)，黑人參粉人參皂巧化1、化2 、尺邑1,(：-1(、1?拓分別為2.08(111邑/邑）、0.80(111邑/邑）、2.34(111邑/邑）、4.56(111邑/邑）、4.03(111邑/邑）。
[0037]對照：經(jīng)通化市產(chǎn)品檢驗所檢測（NO:WJ20150460)，生曬參人參皂巧化1、化2、R邑1、 C-K、R拓分別為 0. 09 (%)、0. 21 (mg/g)、0. 14 (mg/g)、0 (mg/g)、0. 92 (mg/g)。 陽0測實施例2 開菲爾發(fā)酵黑人參粉的制備方法： 1、人參皂巧復合酶發(fā)酵液制備：用脫脂奶粉、波美度為12°Be'的麥芽汁、水作為培養(yǎng) 基，人參粉或人參提取物為產(chǎn)酶誘導劑。將開菲爾粒逐步轉接至脫脂奶粉：麥芽汁：水分 別為 1:8:1、1:7:2、1:6:3、1:5:4、1:4:5、1:5:6 不同的培養(yǎng)基中，依次加 0. 5%、1. 0%、1. 5〇/〇、 2. 0%、2. 5%、3. 0%的人參粉或人參提取物，分別W30°C培養(yǎng)4她，逐次增加培養(yǎng)溫度，最后接 種于麥芽汁：水為1:1的培養(yǎng)基中，添加5. 0%的人參粉或人參提取物，優(yōu)選38°C培養(yǎng)12化， 分離發(fā)酵液，得到人參皂巧復合酶發(fā)酵液。
[0039] 2、優(yōu)選0.3%氯化鋼水溶液作為酶激活劑，噴入人參表面，干燥后粉碎成粗粉。
[0040] 3、粗粉裝入好氧發(fā)酵罐，裝料體積優(yōu)選為60%，W10化pm速度攬拌，通入蒸汽， 100°C殺菌30min;冷卻至40°CW下；在攬拌情況下按15%接種量接種人參皂巧復合酶發(fā)酵 液，混合均勻，使含水量優(yōu)選為55%~65%。
[0041] 4、發(fā)酵罐轉速10化pm，初期發(fā)酵溫度28。上下通入無菌空氣，發(fā)酵3~5d;后期 發(fā)酵溫度40°C，發(fā)酵時間優(yōu)選5~7天。
[0042] 5、發(fā)酵完成后，罐內通入蒸汽，W100°C滅活30min。
[0043] 6、將冷卻后的發(fā)酵產(chǎn)物裝盤，轉入真空干燥箱，W70°C干燥至水分《5%。
[0044] 7、用帶有超細粉分離器的粉碎機粉碎，粉碎成150目的粉末，制成開菲爾發(fā)酵黑 人參粉。
[0045] 實施例3發(fā)酵液培養(yǎng)條件對發(fā)酵產(chǎn)物的影響 1、發(fā)酵條件對誘導人參皂巧復合酶的影響 微生物菌種、培養(yǎng)基濃度、發(fā)酵溫度、發(fā)酵時間等發(fā)酵條件，對誘導人參皂巧復合酶的 種類具有較大影響。特異的人參皂巧糖巧酶發(fā)酵條件要求碳氮源含量更低，低濃度培養(yǎng)基、 高溫度培養(yǎng)、延長培養(yǎng)時間，其人參皂巧復合酶發(fā)酵液水解產(chǎn)物人參皂巧C-K含量較多。
[0046] 培養(yǎng)溫度25°C時，主要產(chǎn)水解人參皂巧化1轉化為Rd、Rg3的酶，也能水解Re、Rg1 的20-0-糖基，分別生成R拓和化1;培養(yǎng)溫度35°C時，主要產(chǎn)水解人參皂巧化1、化2、Rc 的20-0-糖基，轉化為Rd、Rg3;培養(yǎng)溫度大于40°C時，主要產(chǎn)水解人參皂巧化1、化2、Rc的 3-0-糖基和20-0-糖基，生成Rd、Fz、C-K。
[0047] 實施例4發(fā)酵時間對人參皂巧含量的影響 發(fā)酵前期（0天~第5天)人參皂巧化1含量大幅度下降，人參皂巧Rd含量大幅度增加。 在發(fā)酵后期（5天~第10天)，化1略有下降，Rd則大幅度下降。而Rc、化2發(fā)酵前期含量基 本無變化，發(fā)酵后期Rc大幅度下降，化2則有增加。人參皂巧C-K發(fā)酵前未檢出，發(fā)酵前期 可少量檢出，發(fā)酵后期大幅度增加；化2發(fā)酵前期大幅度增加，發(fā)酵后期呈下降趨勢。
[0048] 表1發(fā)酵前后人參皂巧成分含量變化

本領域技術人員借鑒本
【發(fā)明內容】
進行適當改進或替換就可w實現(xiàn)。本發(fā)明的方法己通 過實施例進行了描述，其他人員能在不脫離本
【發(fā)明內容】
、思路和范圍內對本發(fā)明所述的方 法進行改動或適當變更與組合，來實現(xiàn)和應用本發(fā)明技術。需要特別指出的是，所有類似的 替換和改動都被視為包括在本發(fā)明。
【主權項】
1. 一種開菲爾發(fā)酵黑人參粉的制備方法，其特征在于是以開菲爾粒為菌種，經(jīng)菌種馴 化、產(chǎn)酶誘導制成人參皂苷復合酶發(fā)酵液；人參經(jīng)固體發(fā)酵、滅活、真空干燥、超微粉碎，制 成開菲爾發(fā)酵黑人參粉。2. 如權利要求1所述的方法，其特征在于所述的人參皂苷復合酶發(fā)酵液是將開菲爾粒 逐步轉接至脫脂奶粉：麥芽汁：水分別為1:8 :1、1:7:2、1:6:3、1 :5:4、1:4:5、1:5 :6、0:1:1 的培養(yǎng)基中，依次添加〇. 5%、1. 0%、1. 5%、2. 0%、2. 5%、3. 0%、5. 0%的人參粉或人參提取物，分 別以25°C~38°C培養(yǎng)24~120h，分離發(fā)酵液，得到人參皂苷復合酶發(fā)酵液。3. 如權利要求1或2所述的方法，其特征在于以0. 2%~0. 5%氯化鈉水溶液作為酶激 活劑。4. 如權利要求2所述的方法，其特征在于以人參皂苷復合酶發(fā)酵液接種人參粉，初期 發(fā)酵溫度28°C~38°C，發(fā)酵1~5d;后期發(fā)酵溫度38°C~42°C，發(fā)酵5~10天。5. 如權利要求1所述的方法，其特征在于人參是指鮮人參、生曬參、紅參或人參須。6. 如權利要求1所述的方法，其特征在于步驟如下： (1) 人參皂苷復合酶發(fā)酵液制備：將開菲爾粒逐步轉接至脫脂奶粉：麥芽汁：水分別為 1:8:1、1:7:2、1:6:3、1:5:4、1:4:5、1:5:6 不同的培養(yǎng)基中，依次加 0· 5%、1· 0%、1· 5%、2· 0%、 2. 5%、3. 0%的人參粉或人參提取物，分別以25°C~38°C培養(yǎng)24~48h，逐次增加培養(yǎng)溫度， 最后將開菲爾粒接種于麥芽汁：水為1:1的培養(yǎng)基中，添加5. 0%的人參粉或人參提取物， 以35°C~38°C培養(yǎng)48~120h，分離發(fā)酵液，得到人參皂苷復合酶發(fā)酵液； (2) 以0. 2%~0. 5%氯化鈉水溶液作為酶激活劑，噴入人參表面，干燥后粉碎成粗粉； (3 )粗粉裝入好氧發(fā)酵罐，裝料體積為60%~80%，以30~120rpm速度攪拌，通入蒸汽， 90°C~110°C殺菌20~30min ;冷卻至40°C以下；在攪拌情況下按10%~20%接種量接種 人參皂苷復合酶發(fā)酵液，混合均勻，使含水量達到30%~90% ; (4) 發(fā)酵罐轉速30~120rpm，初期發(fā)酵溫度28°C~38°C，上下通入無菌空氣，發(fā)酵3~ 5d;后期發(fā)酵溫度38°C~42°C，發(fā)酵5~10天； (5) 發(fā)酵完成后，罐內通入蒸汽，以100°C~120°C滅活20~30min ; (6) 將冷卻后的發(fā)酵產(chǎn)物裝盤，轉入真空干燥箱，以65°C~75°C干燥至水分< 5% ; (7) 用帶有超細粉分離器的粉碎機粉碎，粉碎成100~250目的粉末，制成開菲爾發(fā)酵 黑人參粉。7. 如權利要求6所述的方法，其特征在于人參是指鮮人參、生曬參、紅參或人參須。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種發(fā)酵黑人參粉及其制備方法，是以開菲爾粒為菌種，經(jīng)菌種馴化、產(chǎn)酶誘導制成人參皂苷復合酶發(fā)酵液。人參經(jīng)固體發(fā)酵、滅活、真空干燥、超微粉碎等工藝制成的開菲爾發(fā)酵黑人參粉。本發(fā)明所述的方法制成的開菲爾發(fā)酵黑人參粉，含有可被人體直接吸收利用而發(fā)揮治療作用的稀有人參皂苷C-K、Rh1、Rh2。所述的方法具有反應條件溫和，高底物濃度可產(chǎn)出高濃度產(chǎn)物，節(jié)省能源、無需嚴格的無菌條件，無污染等優(yōu)點。
【IPC分類】A61P17/18, A61P37/02, A61P1/16, A61P25/00, A61K36/258, A61K9/14, A61P9/00, A61P35/00, A61P37/08, A61P29/00
【公開號】CN105412189
【申請?zhí)枴緾N201510911795
【發(fā)明人】李錫濤, 許勇男, 郭敏
【申請人】許勇男
【公開日】2016年3月23日
【申請日】2015年12月11日