一種以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物的制備方法【
技術(shù)領(lǐng)域：
】[0001]本發(fā)明屬于光動(dòng)態(tài)治療
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體是一種以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物的制備方法?！?br>背景技術(shù)：
】[0002]光動(dòng)力療法是指光敏劑被細(xì)胞攝取后，在特定波長(zhǎng)的光激發(fā)下，產(chǎn)生具有細(xì)胞毒性的單線(xiàn)態(tài)氧，進(jìn)而殺死細(xì)胞的一種治療方法;光敏劑是光動(dòng)力療法的重要因素之一，在眾多光敏劑中，撲啉及其衍生物具有較好的發(fā)展前景，但是，因?yàn)檫策捌溲苌锓肿邮杷詮?qiáng)，在水系溶液中，大環(huán)平面間的疏水作用導(dǎo)致其具有較強(qiáng)的聚集傾向，這不僅給光敏劑的分離純化帶來(lái)困難，而且使得光敏劑的光動(dòng)力效果較差，從而影響了其光化學(xué)性質(zhì)及在體內(nèi)的功效;通過(guò)高分子功能化，合成多種拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的高分子，采用共聚，共混，超支化等方法可以克服上述缺陷，而在光敏劑分子上引入糖肽，能夠使光敏劑帶上親水基團(tuán)，增強(qiáng)其水溶性，因此設(shè)計(jì)和合成以卟啉為核的聚合物和樹(shù)枝狀高分子受到越來(lái)越多研究者的關(guān)注；同時(shí)，以卟啉及其衍生物為內(nèi)核，通過(guò)外部接枝形成拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的含有特異性識(shí)別基團(tuán)的糖肽化合物，可以有效地防止卟啉內(nèi)核的自猝滅，有望能夠高效地把高濃度的光敏藥物遞送到病灶部位。[0003]糖肽是糖基與氨基酸或多肽鏈以共價(jià)鍵相連而形成的綴合物;含有糖肽的物質(zhì)，既保留了糖蛋白的許多重要的生物功能，又沒(méi)有糖蛋白巨大的分子量和復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，是研究糖蛋白這種廣泛存在于生物體內(nèi)的蛋白質(zhì)的重要模型工具;選用糖肽作為靶向裝置具有以下優(yōu)點(diǎn):a.糖肽中含有特異性識(shí)別位點(diǎn)，能與腫瘤組織中的受體相結(jié)合，將光敏劑運(yùn)送至目標(biāo)細(xì)胞;b.與糖蛋白靶向裝置相比，糖肽修飾光敏劑分子質(zhì)量較小，能有效穿過(guò)組織，利于腫瘤細(xì)胞的選擇性結(jié)合與內(nèi)吞;c.引入糖肽能改變光敏劑的親水-疏水平衡，調(diào)節(jié)體內(nèi)攝取和運(yùn)輸?shù)人幬锎x特性;d.合成與修飾較為簡(jiǎn)單，得到的化合物組成確定可控;糖肽和糖蛋白在許多生理和病理過(guò)程中發(fā)揮著極為重要的作用，比如細(xì)胞間的粘連和識(shí)別、組織的分化和發(fā)育、免疫調(diào)節(jié)、腫瘤的轉(zhuǎn)移、炎癥的發(fā)生以及病原體的感染等方面，采用人工合成的方法，可以方便地對(duì)多種材料進(jìn)行糖肽修飾，以滿(mǎn)足不同領(lǐng)域的要求。[0004]本專(zhuān)利將糖肽類(lèi)聚合物的優(yōu)點(diǎn)和卟啉的光動(dòng)力性能相結(jié)合，制備了一種能夠有效提高光動(dòng)力療效的新型聚合物，時(shí)至今日，已經(jīng)有很多相關(guān)的研究成果，而主要的研究集中在乳糖糖肽材料上。[0005]經(jīng)對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的文獻(xiàn)檢索發(fā)現(xiàn)，TusharBorase等在2013年《AngewandteChemieInternat1nalEdit1n》上發(fā)表的“StableAqueousDispers1nsofGlycopeptide-GraftedSelectablyFunct1nalizedMagneticNanoparticles”(經(jīng)糖肽修飾能在水溶液穩(wěn)定分散的具有選擇性的功能化磁性納米粒子)，該文提出用3-胺丙基三乙氧基硅烷修飾的四氧化三鐵納米粒子引發(fā)炔丙基谷氨酸酯羧基內(nèi)酸酐的開(kāi)環(huán)聚合反應(yīng)，然后與疊氮功能化半乳糖發(fā)生Husigen環(huán)加成反應(yīng)，制備出糖肽功能化的磁性納米粒子，但是，迄今為止，以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽尚未見(jiàn)報(bào)道。【
發(fā)明內(nèi)容】[0006]本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種可注射光動(dòng)力治療用以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物的制備方法，通過(guò)開(kāi)環(huán)聚合和糖基化反應(yīng)可以方便地制得具有靶向識(shí)別且可調(diào)節(jié)的以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物，設(shè)計(jì)合理，操作方便，有望適用于工業(yè)化生產(chǎn)。[0007]本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的，一種用于光動(dòng)力治療的以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物的制備方法，按照下述步驟進(jìn)行:[0008](1)由對(duì)-5，10，15，20-四_(氨基)苯基撲啉化合物，在室溫下引發(fā)ε-芐氧羰基_L_賴(lài)氨酸-N-羧酸酐開(kāi)環(huán)聚合制備以卟啉為核的星型聚-ε_(tái)芐氧羰基-L-賴(lài)氨酸，聚合反應(yīng)時(shí)間為5天。[0009]所述室溫指20°C_30°C。[0010]所述對(duì)-5，10，15，20-四(氨基)苯基卟啉與ε-芐氧羰基-L-賴(lài)氨酸-N-羧酸酐的摩爾比為1:40-1:80。[0011]其中以臂支長(zhǎng)度為20的以卟啉為核的星型聚-ε-芐氧羰基-L-賴(lài)氨酸為例，對(duì)-5，10,15,20-四(氨基)苯基卟啉與-ε-芐氧羰基-L-賴(lài)氨酸-Ν-羧酸酐的摩爾比為1:80。[0012]具體步驟為:將引發(fā)劑對(duì)-5，10，15，20-四(氨基)苯基卟啉，ε_(tái)芐氧羰基_L_賴(lài)氨酸-N-羧酸酐分別置于經(jīng)充分干燥的兩個(gè)不同試管中，用翻口塞封口，真空線(xiàn)操作抽真空通氮?dú)鈦?lái)回三次后，用干燥過(guò)的N，N’_二甲基甲酰胺溶解ε-芐氧羰基-L-賴(lài)氨酸-N-羧酸酐，待完全溶解后用轉(zhuǎn)移針頭聯(lián)通兩個(gè)試管，將溶解的組分通入對(duì)_5，10，15，20_四(氨基)苯基卟啉中，在20°C_30°C油浴下反應(yīng)5天，反應(yīng)完成后，在無(wú)水乙醚中沉淀，棄去上清液后，先在室溫下在水栗中干燥，除去無(wú)水乙醚。再用THF溶解，在無(wú)水乙醚中沉降，棄去上清液后，先在室溫下在水栗中干燥，再在真空干燥箱干燥。[0013](2)用氫溴酸/醋酸(HBr/CH3C00H)混合溶劑來(lái)對(duì)卟啉為核的星型聚-ε-芐氧羰基-L-賴(lài)氨酸上的芐氧羰基進(jìn)行脫保護(hù)，得卟啉為核的星型聚-L-賴(lài)氨酸，反應(yīng)時(shí)間為15小時(shí)，反應(yīng)溫度在45°C。[0014]所述混合溶劑中，氫溴酸和醋酸混和的質(zhì)量比為:2:5。[0015](3)以卟啉為核的星型聚-L-賴(lài)氨酸同乳糖酸內(nèi)酯糖基化，制得以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物。[0016]所述反應(yīng)時(shí)間為36小時(shí)，反應(yīng)溫度在30°C。[0017]所述卟啉為核的星型聚-L-賴(lài)氨酸與乳糖酸內(nèi)酯的摩爾比為1:40-1:80。[0018]具體步驟為:[0019]取卟啉為核的星型聚-L-賴(lài)氨酸和乳糖酸內(nèi)酯，置于圓底燒瓶中，用翻口塞封口，真空線(xiàn)操作抽真空通氮?dú)鈦?lái)回三次后，用干燥過(guò)的甲醇進(jìn)行溶解，再加入干燥過(guò)的三乙胺，在30°C油浴下反應(yīng)36小時(shí)，反應(yīng)完成后，過(guò)濾去除多余乳糖酸，然后在無(wú)水乙醚中沉降，棄去上清液后，先在室溫下在水栗中干燥，再在真空干燥槍中干燥，得到以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物。[0020]本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn):[0021]1)用端基為胺基的對(duì)-5，10，15，20_四(氨基)苯基卟啉作為核引發(fā)聚合，可控合成多種不同鏈段長(zhǎng)度的擬糖肽結(jié)構(gòu)。[0022]2)精確合成的PLL鏈段的二級(jí)結(jié)構(gòu)可用于調(diào)節(jié)該材料自組裝后形成的納米粒子的大小及形狀。[0023]3)引入半乳糖殘基，對(duì)特定腫瘤細(xì)胞具有靶向識(shí)別作用。[0024]4)為制備新型的光動(dòng)力治療腫瘤細(xì)胞高分子藥物控制釋放載體提供了一種簡(jiǎn)單而有效的途徑?！靖綀D說(shuō)明】[0025]圖1為本發(fā)明合成路線(xiàn)圖。[0026]圖2為驗(yàn)證本發(fā)明制備的一種聚合物具有識(shí)別作用的效果圖?！揪唧w實(shí)施方式】[0027]下面對(duì)本發(fā)明的實(shí)施例作詳細(xì)說(shuō)明:本實(shí)施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進(jìn)行實(shí)施，給出了詳細(xì)的實(shí)施方式和具體的操作過(guò)程，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于下述的實(shí)施例。[0028]本發(fā)明實(shí)施例的合成路線(xiàn)如圖1所示。[0029]實(shí)施例1:以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽(對(duì)-5，10，15，20-四(氨基)苯基卟啉:ε-芐氧羰基-L-賴(lài)氨酸-Ν-羧酸酐=1:40)的制備方法[0030]將引發(fā)劑對(duì)-5，10，15，20-四(氨基)苯基卟啉(0.036mmol)，ε-芐氧羰基-L-賴(lài)氨酸-Ν-羧酸酐1.44mmol)分別置于經(jīng)充分干燥的兩個(gè)不同試管中，用翻口塞封口，真空線(xiàn)操作抽真空通氮?dú)鈦?lái)回三次后，用干燥過(guò)的N，N’_二甲基甲酰胺(2mL)溶解ε-芐氧羰基-L-賴(lài)氨酸-Ν-羧酸酐，待完全溶解后用轉(zhuǎn)移針頭聯(lián)通兩個(gè)試管，將溶解的組分通入對(duì)_5,10,15,20-四(氨基)苯基卟啉中，在25°C油浴下反應(yīng)5天。反應(yīng)完成后，在無(wú)水乙醚(50mL)中沉淀，棄去上清液后，先在室溫下在水栗中干燥，除去無(wú)水乙醚。再用5mLTHF當(dāng)前第1頁(yè)1 2