溶解，在無(wú)水乙醚中(50mL)沉降，棄去上清液后，先在室溫下在水栗中干燥，再在真空干燥箱40°C干燥。最后得到粗產(chǎn)物，單體轉(zhuǎn)化率為84.6 %。
[0031]取300mg粗產(chǎn)物，置于50mL圓底燒瓶中。在燒杯中將0.7mL氫溴酸(40wt%)溶解在14mL冰醋酸中，將混合液倒入圓底燒瓶，將圓底燒瓶置于45°C油浴，一共反應(yīng)15小時(shí)，反應(yīng)完成后在150mL無(wú)水乙醚中沉降。充分?jǐn)嚢韬箪o止，棄去上清液，沉淀物用無(wú)水乙醚洗滌4次，最后得到淺綠色粉末，產(chǎn)率84.37 %。11
[0032]取57.94mg上述淺綠色產(chǎn)物(0.0lmmol)和138mg乳糖酸內(nèi)酯(0.4mmol)，置于25mL圓底燒瓶中，用翻口塞封口，真空線操作抽真空通氮?dú)鈦?lái)回三次后，用干燥過(guò)的甲醇(2mL)進(jìn)行溶解，再加入56yL干燥過(guò)的三乙胺(0.4mmol)，在30°C油浴下反應(yīng)36小時(shí)，反應(yīng)完成后，過(guò)濾去除多余乳糖酸，然后在無(wú)水乙醚(50mL)中沉降，棄去上清液后，先在室溫下在水栗中干燥，再在25°C下在真空干燥槍中干燥。最后得到目標(biāo)產(chǎn)物，產(chǎn)率為84.6 %。
[0033]實(shí)施例2:以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽(對(duì)-5，10，15，20-四(氨基)苯基卟啉:ε-芐氧羰基-L-賴氨酸-Ν-羧酸酐=1:80)的制備方法
[0034]對(duì)-5，10，15，20-四(氨基)苯基卟啉為引發(fā)劑(0.01811111101)，￡-芐氧羰基-1^-賴氨酸-Ν-羧酸酐(1.44_ο1)分別置于經(jīng)充分干燥的兩個(gè)不同試管中，用翻口塞封口，真空線操作抽真空通氮?dú)鈦?lái)回三次后，用干燥過(guò)的N，N’_二甲基甲酰胺(2mL)溶解ε-芐氧羰基-L-賴氨酸-N-羧酸酐，待完全溶解后用轉(zhuǎn)移針頭聯(lián)通兩個(gè)試管，將溶解的組分通入對(duì)_5,10,15,20-四(氨基)苯基卟啉中，在25°C油浴下反應(yīng)24小時(shí)。反應(yīng)完成后，在無(wú)水乙醚(50mL)中沉淀，棄去上清液后，先在室溫下在水栗中干燥，除去無(wú)水乙醚，再用5mL THF溶解，在無(wú)水乙醚中(50mL)沉降，棄去上清液后，先在室溫下在水栗中干燥，再在真空干燥箱40°C干燥。最后得到粗產(chǎn)物，單體轉(zhuǎn)化率為84.6 %。
[0035]取300mg粗產(chǎn)物，置于50mL圓底燒瓶中。在燒杯中將0.7mL氫溴酸(40wt%)溶解在14mL冰醋酸中，取1.4mL混合液倒入圓底燒瓶。將圓底燒瓶置于45°C油浴，一共反應(yīng)15小時(shí)，反應(yīng)完成后在150mL無(wú)水乙醚中沉淀。充分?jǐn)嚢韬箪o止，棄去上清液。沉淀物用無(wú)水乙醚洗滌4次，最后得到淺綠色粉末，產(chǎn)率84.37 %。
[0036]取109.2mg上述淺綠色產(chǎn)物(0.0lmmol)和276mg乳糖酸內(nèi)酯(0.8mmol)，置于25mL圓底燒瓶中，用翻口塞封口，真空線操作抽真空通氮?dú)鈦?lái)回三次后，用干燥過(guò)的甲醇(2mL)進(jìn)行溶解，再加入111.5yL干燥過(guò)的三乙胺(0.8mmol)，在30°C油浴下反應(yīng)36小時(shí)。反應(yīng)完成后，過(guò)濾去除多余乳糖酸，然后在無(wú)水乙醚(50mL)中沉降，棄去上清液后，先在室溫下在水栗中干燥，再在25°C下在真空干燥槍中干燥。最后得到目標(biāo)產(chǎn)物，產(chǎn)率為72.3%
[0037]實(shí)施例3
[0038]以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽的靶向識(shí)別能力
[0039]在生物系統(tǒng)中，通過(guò)糖-蛋白識(shí)別作用進(jìn)行控制，把糖類聚合物應(yīng)用到生物材料和藥物開(kāi)發(fā)領(lǐng)域，非常具有應(yīng)用前景。在細(xì)胞發(fā)生癌變之后，細(xì)胞表面糖鏈結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化，而某些凝集素具有識(shí)別與結(jié)合特定糖鏈的作用。其中，蓖麻凝集素(RCA)是一種能識(shí)別β-D-Gal(D_半乳糖)并能與其專一結(jié)合的蛋白質(zhì)。本發(fā)明中合成的聚合物具有D-半乳糖結(jié)構(gòu)，通過(guò)與蓖麻凝集素(RCA)的結(jié)合，可使聚合物在紫外光譜的特定波長(zhǎng)下吸光度增加。因此，我們使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)進(jìn)行測(cè)量，通過(guò)比較在特定波長(zhǎng)下加入蓖麻凝集素(RCA)前后聚合物吸光度的變化，測(cè)定不同濃度下以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽的靶向識(shí)別能力，得圖2。
[0040]圖中可以看出，當(dāng)聚合物與蓖麻凝集素(RCA)混合后，在360nm出的吸光度出現(xiàn)了明顯的增強(qiáng)，這說(shuō)明了以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽與蓖麻凝集素(RCA)發(fā)生了結(jié)合，為其靶向識(shí)別能力提供了證明。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物的制備方法，其特征在于按照下述步驟進(jìn)行: (1)由對(duì)-5，10，15，20-四-(氨基)苯基卟啉化合物，在室溫下引發(fā)ε-芐氧羰基-L-賴氨酸-Ν-羧酸酐開(kāi)環(huán)聚合制備以卟啉為核的星型聚-ε_(tái)芐氧羰基-L-賴氨酸，聚合反應(yīng)時(shí)間為5天； (2)用氫溴酸/醋酸(HBr/CH3COOH)混合溶劑來(lái)對(duì)卟啉為核的星型聚-ε-芐氧羰基-L-賴氨酸上的芐氧羰基進(jìn)行脫保護(hù)，得卟啉為核的星型聚-L-賴氨酸； (3)以卟啉為核的星型聚-L-賴氨酸同乳糖酸內(nèi)酯糖基化，制得以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物。2.如權(quán)利要求1所述的一種以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物的制備方法，其特征在于:步驟(1)中，所述室溫指20°C_30°C ；所述對(duì)-5，10，15，20-四(氨基)苯基卟啉與ε-芐氧羰基-L-賴氨酸-Ν-羧酸酐的摩爾比為1:40-1:80。3.如權(quán)利要求1所述的一種以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物的制備方法，其特征在于步驟(1)的具體步驟為:將引發(fā)劑對(duì)_5，10，15，20-四(氨基)苯基卟啉，￡-芐氧羰基-1^-賴氨酸-Ν-羧酸酐分別置于經(jīng)充分干燥的兩個(gè)不同試管中，用翻口塞封口，真空線操作抽真空通氮?dú)鈦?lái)回三次后，用干燥過(guò)的Ν，Ν’_二甲基甲酰胺溶解ε-芐氧羰基-L-賴氨酸-Ν-羧酸酐，待完全溶解后用轉(zhuǎn)移針頭聯(lián)通兩個(gè)試管，將溶解的組分通入對(duì)-5，10，15，20-四(氨基)苯基卟啉中，在20°C_30°C油浴下反應(yīng)5天，反應(yīng)完成后，在無(wú)水乙醚中沉淀，棄去上清液后，先在室溫下在水栗中干燥，除去無(wú)水乙醚，再用THF溶解，在無(wú)水乙醚中沉降，棄去上清液后，先在室溫下在水栗中干燥，再在真空干燥箱干燥。4.如權(quán)利要求1所述的一種以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物的制備方法，其特征在于:步驟(2)中，反應(yīng)時(shí)間為15小時(shí)，反應(yīng)溫度在45°C;所述混合溶劑中，氫溴酸和醋酸混和的質(zhì)量比為:2:5。5.如權(quán)利要求1所述的一種以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物的制備方法，其特征在于:步驟(3)中，所述反應(yīng)時(shí)間為36小時(shí)，反應(yīng)溫度在30°C;所述卟啉為核的星型聚-L-賴氨酸與乳糖酸內(nèi)酯的摩爾比為1:40-1:80。6.如權(quán)利要求1所述的一種以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物的制備方法，其特征在于步驟(3)的具體步驟為:取卟啉為核的星型聚-L-賴氨酸和乳糖酸內(nèi)酯，置于圓底燒瓶中，用翻口塞封口，真空線操作抽真空通氮?dú)鈦?lái)回三次后，用干燥過(guò)的甲醇進(jìn)行溶解，再加入干燥過(guò)的三乙胺，在30°C油浴下反應(yīng)36小時(shí)，反應(yīng)完成后，過(guò)濾去除多余乳糖酸，然后在無(wú)水乙醚中沉降，棄去上清液后，先在室溫下在水栗中干燥，再在真空干燥槍中干燥，得到以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物。7.如權(quán)利要求1所述方法制備的以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物在在制備光動(dòng)力治療腫瘤細(xì)胞高分子藥物控制釋放載體中的用途。
【專利摘要】本發(fā)明屬于光動(dòng)態(tài)治療技術(shù)領(lǐng)域，具體是一種以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物的制備方法。由對(duì)-5,10,15,20-四-(氨基)苯基卟啉化合物，在室溫下引發(fā)ε-芐氧羰基-L-賴氨酸-N-羧酸酐開(kāi)環(huán)聚合制備以卟啉為核的星型聚-ε-芐氧羰基-L-賴氨酸，聚合反應(yīng)時(shí)間為5天；用氫溴酸/醋酸(HBr/CH3COOH)混合溶劑來(lái)對(duì)卟啉為核的星型聚-ε-芐氧羰基-L-賴氨酸上的芐氧羰基進(jìn)行脫保護(hù)，得卟啉為核的星型聚-L-賴氨酸；以卟啉為核的星型聚-L-賴氨酸同乳糖酸內(nèi)酯糖基化，制得以卟啉為核的星型乳糖擬糖肽聚合物。
【IPC分類】A61P35/00, C08G69/48, A61K47/48, C08G69/10, A61K41/00
【公開(kāi)號(hào)】CN105457027
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201511025161
【發(fā)明人】戴曉暉, 吳川
【申請(qǐng)人】江蘇大學(xué)
【公開(kāi)日】2016年4月6日
【申請(qǐng)日】2015年12月30日