本發(fā)明涉及使用一種或多種發(fā)酵生物從植物材料產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物的方法；可用于本發(fā)明的方法和/或工藝的組合物、轉(zhuǎn)基因植物和修飾的發(fā)酵生物。
背景技術(shù)：
：：大量難以合成產(chǎn)生的商品如今可通過發(fā)酵生物產(chǎn)生。此類產(chǎn)品包括醇(例如丁醇、乙醇、甲醇、1,3-丙二醇)；有機(jī)酸(例如乙酸、檸檬酸、葡糖酸酯/鹽(gluconate)、葡糖酸、衣康酸、乳酸、琥珀酸、2,5-二酮-D-葡糖酸)，酮(例如丙酮)，氨基酸(例如谷氨酸)；氣體(例如H2和CO2)，以及更復(fù)雜的化合物，包括，例如抗生素(例如青霉素和四環(huán)素)；酶；維生素(例如核黃素，B12，β-胡蘿卜素)和激素。發(fā)酵亦常用于可消費(fèi)的醇(例如啤酒和葡萄酒)，乳制品(例如，用于酸奶和奶酪的產(chǎn)生)，皮革，和煙草工業(yè)。本領(lǐng)域中已知大量通過發(fā)酵由含淀粉材料的降解提供的糖而產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物如乙醇的方法。然而，從此類植物材料產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物如乙醇仍然過于昂貴。因此，存在提供可增加發(fā)酵產(chǎn)物的收率(yield)，并由此減少生產(chǎn)成本的方法的需要。本發(fā)明的一個(gè)目的是提供改善的用于產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物的方法/工藝。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明涉及產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物的方法/工藝，其包括：(a)在氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶的存在下用α-淀粉酶將含淀粉材料液化為糊精；(b)用糖化酶將糊精糖化為糖；和(c)使用發(fā)酵生物發(fā)酵糖以產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物。本發(fā)明亦涉及產(chǎn)生糖的方法/工藝，其包括：(a)在氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶的存在下用α-淀粉酶將含淀粉材料液化為糊精；和(b)用糖化酶將糊精糖化為糖。本發(fā)明亦涉及產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物的方法/工藝，其包括：(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含淀粉材料；(b)用α-淀粉酶將經(jīng)處理的含淀粉材料液化為糊精；(c)用糖化酶將糊精糖化為糖；和(d)使用發(fā)酵生物發(fā)酵糖以產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物。本發(fā)明亦涉及產(chǎn)生糊精的方法/工藝，其包括：(a)在氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶的存在下用α-淀粉酶將含淀粉材料液化為糊精；和(b)回收所述糊精。本發(fā)明亦涉及產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物的方法/工藝，其包括：(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含淀粉材料；(b)用α-淀粉酶將經(jīng)處理的含淀粉材料液化為糊精；(c)用糖化酶將糊精糖化為糖；和(d)使用發(fā)酵生物發(fā)酵糖以產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物。本發(fā)明亦涉及產(chǎn)生糖的方法/工藝，其包括：(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含淀粉材料；(b)用α-淀粉酶將經(jīng)處理的含淀粉材料液化為糊精；和(c)用糖化酶將糊精糖化為糖。本發(fā)明亦涉及產(chǎn)生糊精的方法/工藝，其包括：(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含淀粉材料；和(b)用α-淀粉酶將經(jīng)處理的含淀粉材料液化為糊精。本發(fā)明亦涉及產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物的方法/工藝，其包括用α-淀粉酶將含淀粉材料轉(zhuǎn)化為糊精；用葡糖淀粉酶將糊精糖化為糖；和在氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶存在下在低于含淀粉材料的起始糊化溫度的溫度在單一步驟中使用發(fā)酵生物發(fā)酵糖。本發(fā)明亦涉及產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物的方法/工藝，其包括：(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含氨基酸和可溶性糖的植物提取物；(b)從所述植物提取物產(chǎn)生糖蜜；(c)稀釋所述糖蜜；和(d)用發(fā)酵生物發(fā)酵所述稀釋的糖蜜以產(chǎn)生乙醇。本發(fā)明亦涉及產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物的方法/工藝，其包括：(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含氨基酸和可溶性糖的植物提取物；和(b)用發(fā)酵生物發(fā)酵經(jīng)處理的植物提取物以產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物。本發(fā)明亦涉及產(chǎn)生糖的方法/工藝，其包括：(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含氨基酸和可溶性糖的植物提取物；和(b)從經(jīng)處理的植物提取物回收糖。本發(fā)明亦涉及產(chǎn)生蔗糖的方法/工藝，其包括：(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含氨基酸和可溶性糖的植物提取物；(b)澄清所述植物提取物；(c)濃縮見于澄清的植物提取物中的糖(例如通過蒸發(fā))以形成含蔗糖的糖漿；(d)從所述糖漿結(jié)晶蔗糖；和(e)回收蔗糖。本發(fā)明亦涉及組合物，其包含(a)天冬酰胺酶、精氨酸酶和/或氨基酸氧化酶，(b)葡糖淀粉酶和(c)α-淀粉酶。發(fā)明詳述定義α-淀粉酶(α-1,4葡聚糖-4-葡聚糖水解酶，EC3.2.1.1)是一組酶，其催化淀粉和其它直鏈和支化的1,4-葡糖苷寡糖和多糖的水解。氨基酸氧化酶(L-氨基酸氧化酶，EC1.4.3.2和D-氨基酸氧化酶，EC1.4.3.3)是一組酶，其催化下述反應(yīng)：精氨酸酶(L-精氨酸氨基水解酶，EC3.5.3.1)是一組酶，其催化下述反應(yīng)：L-精氨酸+H2O=鳥氨酸+尿素天冬酰胺酶是EC3.5.1.1(天冬酰胺酶或L-天冬酰胺酰胺基水解酶)和EC3.5.1.38(谷氨酰胺-天冬酰胺-酶或谷氨酰胺酶天冬酰胺酶)的酶，其催化下述反應(yīng)：L-天冬酰胺+H2O=L-天冬氨酸+NH4+片段：術(shù)語“片段”意指具有從成熟多肽氨基和/或羧基端缺失一個(gè)或多個(gè)(幾個(gè))氨基酸的多肽，其中所述片段具有酶活性。葡糖淀粉酶(葡聚糖-1,4-α-葡糖苷酶，EC3.2.1.3)是一組酶，其催化從鏈的非還原性末端連續(xù)地水解末端(1→4)-連接的α-D-葡萄糖殘基，而釋放β-D-葡萄糖。分離的：術(shù)語“分離的”和“純化的”意指從預(yù)期天然結(jié)合的至少一種組分分離的多肽或多核苷酸。例如，多肽或變體如通過SDS-PAGE確定可為至少1%純，例如至少5%純，至少10%純，至少20%純，至少40%純，至少60%純，至少80%純，和至少90%純，而多核苷酸如通過瓊脂糖電泳確定可為至少1%純，例如至少5%純，至少10%純，至少20%純，至少40%純，至少60%純，至少80%純，至少90%純，和至少95%純。成熟多肽：術(shù)語“成熟多肽”意指在翻譯和任何翻譯后修飾如N端加工、C端截短、糖基化、磷酸化等之后以其最終形式存在的多肽。親本酶：術(shù)語“親本”意指對其進(jìn)行改變以產(chǎn)生變體的酶。親本可為天然存在的(野生型)多肽或其變體。序列同一性：參數(shù)“序列同一性”描述兩個(gè)氨基酸序列之間或兩個(gè)核苷酸序列之間的相關(guān)性。就本發(fā)明而言，兩個(gè)氨基酸序列之間的序列同一性程度使用如EMBOSS軟件包(EMBOSS:TheEuropeanMolecularBiologyOpenSoftwareSuite,Rice等,2000,TrendsGenet.16:276-277)，優(yōu)選3.0.0版或更高版本的Needle程序中所執(zhí)行的Needleman-Wunsch算法(Needleman和Wunsch,1970,J.Mol.Biol.48:443-453)來測定。使用的可選參數(shù)為缺口開放罰分(gapopenpenalty)10，缺口延伸罰分(gapextensionpenalty)0.5和EBLOSUM62(BLOSUM62的EMBOSS版)取代矩陣。使用Needle標(biāo)記為“最高同一性(longestidentity)”的輸出結(jié)果(使用-nobrief選項(xiàng)獲得)作為同一性百分比，并計(jì)算如下：(同樣的殘基×100)/(比對長度-比對中缺口的總數(shù))就本發(fā)明而言，兩個(gè)脫氧核糖核苷酸序列之間的序列同一性程度使用如EMBOSS軟件包(EMBOSS:TheEuropeanMolecularBiologyOpenSoftwareSuite,Rice等,2000,見上文)，優(yōu)選3.0.0版或更高版本的Needle程序中所執(zhí)行的Needleman-Wunsch算法(Needleman和Wunsch,1970,見上文)來測定。使用的參數(shù)為缺口開放罰分10，缺口延伸罰分0.5和EDNAFULL(NCBINUC4.4的EMBOSS版)取代矩陣。使用Needle標(biāo)記為“最高同一性”的輸出結(jié)果(使用-nobrief選項(xiàng)獲得)作為同一性百分比，并計(jì)算如下：(同樣的脫氧核糖核苷酸×100)/(比對長度-比對中缺口的總數(shù))變體：術(shù)語“變體”意指在一個(gè)或多個(gè)(幾個(gè))位置包含改變，即取代、插入和/或缺失的多肽。取代意指將占據(jù)某位置的氨基酸用不同的氨基酸替代；缺失意指去除占據(jù)某位置的氨基酸；而插入意指在鄰接占據(jù)某位置的氨基酸添加1-5個(gè)氨基酸。野生型酶：術(shù)語“野生型”酶意指由天然出現(xiàn)的微生物，如見于自然界的細(xì)菌、酵母或絲狀真菌所表達(dá)的酶。用于從含淀粉材料產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物、糊精和糖的方法/工藝本發(fā)明涉及產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物的方法/工藝，其包括：(a)在氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶的存在下用α-淀粉酶將含淀粉材料液化為糊精；(b)用糖化酶將糊精糖化為糖；和(c)使用發(fā)酵生物發(fā)酵糖以產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物。本發(fā)明亦涉及產(chǎn)生糖的方法/工藝，包括：(a)在氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶的存在下用α-淀粉酶將含淀粉材料液化為糊精；和(b)用糖化酶將糊精糖化為糖。本發(fā)明亦涉及產(chǎn)生糊精的方法/工藝，其包括：(a)在氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶的存在下用α-淀粉酶將含淀粉材料液化為糊精；和(b)回收所述糊精。本發(fā)明亦涉及產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物的方法/工藝，其包括：(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含淀粉材料；(b)用α-淀粉酶將經(jīng)處理的含淀粉材料液化為糊精；(c)用糖化酶將糊精糖化為糖；和(d)使用發(fā)酵生物發(fā)酵糖以產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物。本發(fā)明亦涉及產(chǎn)生糖的方法/工藝，其包括：(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含淀粉材料；(b)用α-淀粉酶將經(jīng)處理的含淀粉材料液化為糊精；和(c)用糖化酶將糊精糖化為糖。本發(fā)明亦涉及產(chǎn)生糊精的方法/工藝，其包括：(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含淀粉材料；和(b)用α-淀粉酶將經(jīng)處理的含淀粉材料液化為糊精。淀粉在植物細(xì)胞中作為不溶于水的微小顆粒形成。當(dāng)置于冷水中時(shí)，淀粉顆?？晌丈倭恳后w并膨脹(swell)。在高至50℃-75℃的溫度，膨脹可為可逆的。然而，在更高溫度開始稱為“糊化”的不可逆膨脹。待加工的粒狀淀粉可為高度精制的淀粉品質(zhì)，優(yōu)選至少90%，至少95%，至少97%或至少99.5%純，或其可為更加粗制的含淀粉材料，其含有包括非淀粉部分(如胚殘余物和纖維)的(例如，經(jīng)磨制的)全谷粒。原材料(如全谷粒)可通過例如磨制減小粒度以打開其結(jié)構(gòu)并允許進(jìn)一步的加工。根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選兩種方法/工藝，濕磨和干磨。在干磨中，將整粒磨碎并使用。濕磨導(dǎo)致胚和粗粉(淀粉顆粒和蛋白質(zhì))的良好分離，并常常用于使用淀粉水解物產(chǎn)生例如糖漿的場合(location)。干磨和濕磨在淀粉加工領(lǐng)域都是眾所周知的，并可用于本發(fā)明的方法/工藝中。在一個(gè)實(shí)施方案中，粒度減少至約0.05-3.0mm，優(yōu)選0.1-0.5mm，或使得至少30%，優(yōu)選至少50%，更優(yōu)選至少70%，甚至更優(yōu)選至少90%的含淀粉材料可穿過具有0.05-3.0mm篩網(wǎng)，優(yōu)選0.1-0.5mm篩網(wǎng)的篩?？墒褂盟龊矸鄄牧袭a(chǎn)生糖、糊精或發(fā)酵產(chǎn)物。一般而言，用α-淀粉酶將含淀粉材料液化為糊精，接著進(jìn)行糖化(將糊精轉(zhuǎn)化為糖的方法/工藝)和發(fā)酵(將糖轉(zhuǎn)化為發(fā)酵產(chǎn)物的方法/工藝)。在一個(gè)實(shí)施方案中，在液化之前，將所述含淀粉材料用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理。該處理可在任何適于酶活性的pH和溫度進(jìn)行一段時(shí)間以允許酶反應(yīng)發(fā)生。在一個(gè)實(shí)施方案中，溫度在20-75℃，例如20-65℃或40-60℃的范圍；pH在4.5-6.5的范圍；和時(shí)間為5分鐘-2小時(shí)，例如5分鐘-1小時(shí)的范圍。在一個(gè)實(shí)施方案中，在液化之前將谷氨酰胺酶添加至含淀粉材料。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在液化之前將精氨酸酶添加至含淀粉材料。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在液化之前將氨基酸氧化酶添加至含淀粉材料。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在液化之前將谷氨酰胺酶、精氨酸酶和氨基酸氧化酶添加至含淀粉材料。谷氨酰胺酶和/或氨基酸氧化酶亦可在液化過程中添加。在一個(gè)實(shí)施方案中，谷氨酰胺酶在液化過程中添加。在另一個(gè)實(shí)施方案中，精氨酸酶在液化過程中添加。在另一個(gè)實(shí)施方案中，氨基酸氧化酶在液化過程中添加。在另一個(gè)實(shí)施方案中，谷氨酰胺酶、精氨酸酶和氨基酸氧化酶在液化過程中存在。液化在α-淀粉酶，優(yōu)選細(xì)菌α-淀粉酶和/或酸性真菌α-淀粉酶的存在下進(jìn)行。在一個(gè)實(shí)施方案中，肌醇六磷酸酶亦在液化過程中存在。在典型的液化過程中，通過α-淀粉酶將長鏈淀粉降解成更短的支化和直鏈單元(麥芽糊精)。液化通常以三步熱漿過程進(jìn)行。將漿料加熱至60-95℃(例如，77-86℃，80-85℃，或83-85℃)，并且加入α-淀粉酶以起始液化(稀化)。液化方法/工藝在85℃進(jìn)行1-2小時(shí)。pH通常為5.5-6.2。為了確保在這些條件下最佳的酶穩(wěn)定性，任選地加入1mM鈣(提供約40ppm游離鈣離子)。在這種處理后，液化淀粉具有10-15的“右旋糖當(dāng)量”(DE)。然后可將漿料噴射蒸煮(jet-cook)至95-140℃，例如，105-125℃進(jìn)行約1-15分鐘，例如約3至10分鐘，特別是5分鐘左右。然后將漿料冷卻至60-95℃，并加入更多的α-淀粉酶以獲得最終水解(次級液化)。噴射蒸煮方法/工藝在pH4.5-6.5，通常在pH5-6進(jìn)行。α-淀粉酶可作為單劑例如在噴射蒸煮之前添加。糖化可使用本領(lǐng)域公知的條件用葡糖淀粉酶或β-淀粉酶和任選地脫支酶如異淀粉酶或普魯蘭酶進(jìn)行。例如，完整糖化步驟可持續(xù)約24至約72小時(shí)，然而，通常在30-65℃，通常約60℃的溫度進(jìn)行通常40至90分鐘的預(yù)糖化，然后在同時(shí)糖化和發(fā)酵(SSF)方法/工藝中的發(fā)酵過程中完全糖化。糖化通常在20-75℃，例如25-65℃和40-75℃的范圍，通常約60℃的溫度，和在約4-5的pH，通常在約pH4.5進(jìn)行。糖化和發(fā)酵步驟可順序或同時(shí)進(jìn)行。在一個(gè)實(shí)施方案中，糖化和發(fā)酵同時(shí)進(jìn)行(SSF)，其中對于糖化無保持階段，意指發(fā)酵生物如酵母和酶一同添加。當(dāng)發(fā)酵生物是酵母，如釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)的菌株，且發(fā)酵產(chǎn)物是乙醇時(shí)，SSF通常在20-40℃，例如26-34℃，優(yōu)選32℃左右的溫度進(jìn)行。其它發(fā)酵產(chǎn)物可在本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的、適于所討論的發(fā)酵生物的條件和溫度進(jìn)行發(fā)酵。在發(fā)酵過程中，溫度可向上或向下調(diào)整。糊精可通過本領(lǐng)域中公知的方法來回收。糖可通過本領(lǐng)域中公知的方法來回收。發(fā)酵產(chǎn)物可通過本領(lǐng)域中公知的方法，例如通過蒸餾來回收。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法/工藝在將含淀粉材料轉(zhuǎn)化為糊精和/或用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含淀粉材料之前，進(jìn)一步包括下述步驟：(x)減少所述含淀粉材料的粒度；和(y)形成包含所述含淀粉材料和水的漿料。用于減少含淀粉材料的粒度的方法對于本領(lǐng)域技術(shù)人員是已知的。在一個(gè)實(shí)施方案中，磨制所述含淀粉材料以減少粒度。水性漿料可含有含淀粉材料的10-55wt.%干固體(DS)，優(yōu)選25-45wt.%干固體(DS)，更優(yōu)選30-40wt.%干固體(DS)。自未糊化的含淀粉材料產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物的方法本發(fā)明亦涉及從未經(jīng)糊化(常稱作“未經(jīng)烹制”)的含淀粉材料產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，該方法包括在起始糊化溫度以下，優(yōu)選在α-淀粉酶和/或糖原生成酶(糖化酶)的存在下對(例如經(jīng)磨制的)含淀粉材料糖化以產(chǎn)生糖類，所述糖類可由合適的發(fā)酵生物發(fā)酵成發(fā)酵產(chǎn)物。因此，本發(fā)明的該方面涉及產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物的方法，其包括：用α-淀粉酶將含淀粉材料轉(zhuǎn)化為糊精；用葡糖淀粉酶將所述糊精糖化為糖；和使用發(fā)酵生物在氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶的存在下在低于所述含淀粉材料的起始糊化溫度的溫度在單步中發(fā)酵所述糖。術(shù)語“起始糊化溫度”意指淀粉發(fā)生糊化的最低溫度。一般而言，在水中加熱的淀粉在約50℃-75℃開始糊化；糊化的準(zhǔn)確溫度取決于特定的淀粉，并可方便的由本領(lǐng)域技術(shù)人員確定。從而，起始糊化溫度可根據(jù)植物物種，植物物種的特定品種以及生長條件而改變。給定含淀粉材料的起始糊化溫度可確定為使用由Gorinstein和Lii,1992,Starch/,44(12):461-466描述的方法5%的淀粉顆粒喪失雙折射的溫度。本發(fā)明的方法可進(jìn)一步包括例如通過蒸餾回收所述發(fā)酵產(chǎn)物。所述發(fā)酵產(chǎn)物可為漿料，如可制備粒狀淀粉，其具有含淀粉材料的10-55wt.%干固體(DS)，優(yōu)選25-45wt.%干固體，更優(yōu)選30-40wt.%干固體。漿料可包含水分和/或工藝水(processwater)，例如釜餾物(逆流(backset))、洗滌水(scrubberwater)、蒸發(fā)器冷凝液或餾出物、來自蒸餾的側(cè)線汽提器水(side-stripperwater)或來自其它發(fā)酵產(chǎn)物設(shè)備(plant)的工藝水。由于該方法/工藝在糊化溫度以下進(jìn)行，因此不發(fā)生顯著的粘度增加，如果需要，可使用高水平的釜餾物。在一個(gè)實(shí)施方案中，含水漿料包含約1至約70vol%，優(yōu)選15-60vol%，特別為約30至50vol%水分和/或工藝水，例如釜餾物(逆流)、洗滌水(scrubberwater)、蒸發(fā)器冷凝液或餾出物、來自蒸餾的側(cè)線汽提器水或來自其它發(fā)酵產(chǎn)物設(shè)備的工藝水，或其組合等。可通過優(yōu)選以干磨或濕磨將其粒度減小到0.05-3.0mm，優(yōu)選0.1-0.5mm來制備含淀粉材料。在進(jìn)行本發(fā)明的方法或方法/工藝后，含淀粉材料中至少85%，至少86%，至少87%，至少88%，至少89%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或者至少99%的干固體轉(zhuǎn)化為可溶的淀粉水解物。本發(fā)明該方面的方法在低于起始糊化溫度的溫度，例如，在24-40℃，如25-40℃，29-35℃，30-34℃范圍，如32℃左右的溫度進(jìn)行。本領(lǐng)域技術(shù)人員可容易地確定合適的工藝條件。本發(fā)明的方法可在約3-7的pH，例如3.5至6或4至5的pH進(jìn)行。在一個(gè)實(shí)施方案中，進(jìn)行該方法/工藝從而使得糖水平，如葡萄糖水平保持在低水平，如6wt%以下，約3wt%以下，約2wt%以下，約1wt%以下，約0.5wt%以下或0.25wt%以下，或約0.1wt%以下。所述低水平的糖可通過簡單地采用經(jīng)調(diào)整量的酶和發(fā)酵生物來實(shí)現(xiàn)。本領(lǐng)域技術(shù)人員可方便地確定使用的發(fā)酵生物和酶的劑量/量。發(fā)酵生物和酶的使用量也可經(jīng)選擇以保持麥芽糖在發(fā)酵液中的低濃度。舉例而言，麥芽糖水平可保持為約0.5wt%以下，如約0.2wt%以下。含淀粉材料在本發(fā)明的方法中，可使用任何合適的含淀粉的起始材料。所述起始材料通常基于期望的發(fā)酵產(chǎn)物而選擇。適用于本發(fā)明方法/工藝的含淀粉的起始材料的實(shí)例包括大麥、豆(bean)、木薯、谷類、玉米、買羅高粱、豌豆(pea)、馬鈴薯、稻、黑麥、西米、高粱、甘薯、樹薯、小麥、和全谷粒，或它們的組合。所述含淀粉材料亦可為蠟質(zhì)或非蠟質(zhì)類型的玉米和大麥。從植物提取物產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物和糖該發(fā)明亦涉及從含氨基酸和可溶性糖(例如果糖、半乳糖、葡萄糖、麥芽糖、蔗糖和/或其寡聚物)的植物提取物例如甘蔗產(chǎn)生糖和/或發(fā)酵產(chǎn)物如乙醇的方法/工藝，其包括將天冬酰胺酶和/或氨基酸氧化酶施于所述植物提取物。具體而言，本發(fā)明涉及產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物的方法，其包括：(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含氨基酸和可溶性糖的植物提取物；(b)從所述植物提取物產(chǎn)生糖蜜；(c)稀釋所述糖蜜；和(d)用發(fā)酵生物發(fā)酵所述稀釋的糖蜜以產(chǎn)生乙醇。本發(fā)明亦涉及產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物的方法/工藝，其包括：(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含氨基酸和可溶性糖的植物提取物；和(b)用發(fā)酵生物發(fā)酵經(jīng)處理的植物提取物以產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物。本發(fā)明亦涉及產(chǎn)生糖的方法/工藝，其包括：(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含氨基酸和可溶性糖的植物提取物；和(b)從經(jīng)處理的植物提取物回收糖。本發(fā)明亦涉及產(chǎn)生蔗糖的方法/工藝，其包括：(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含氨基酸和可溶性糖的植物提取物；(b)澄清所述植物提取物；(c)濃縮見于澄清的植物提取物中的糖(例如通過蒸發(fā))以形成含蔗糖的糖漿；(d)從所述糖漿結(jié)晶蔗糖；和(e)回收蔗糖。所述糖可為任何糖，包括但不限于果糖、半乳糖、葡萄糖、麥芽糖或蔗糖。甘蔗為任何6至37個(gè)甘蔗屬(Saccharum)(禾本科(familyPoaceae)，須芒草組(tribeAndropogoneae))的高的(tall)多年生草本植物的種。傳統(tǒng)上，甘蔗加工需要兩個(gè)階段。磨坊(mill)從新鮮收獲的甘蔗稈(cane)提取粗糖，并有時(shí)漂白該糖以制備“磨坊白糖(millwhitesugar)”以供當(dāng)?shù)叵M(fèi)。提煉廠然后生產(chǎn)精制的白糖，其為99%蔗糖。磨坊洗滌、砍劈甘蔗稈，并使用旋轉(zhuǎn)刀(revolvingknife)將甘蔗稈切碎(shred)。將切碎的甘蔗稈反復(fù)與水混合，并在稱為破碎機(jī)(crusher)或浸提器(diffuser)的滾子(roller)之間壓碎以產(chǎn)生粗甘蔗汁。粗甘蔗汁含有10-15%蔗糖，且將剩余的纖維性固體，稱為甘蔗渣，作為燃料燃燒。接著將甘蔗汁與石灰混合以將其pH調(diào)整至7。該混合阻止蔗糖分解為葡萄糖和果糖，并沉淀了一些雜質(zhì)。然后靜置混合物，允許石灰和其它懸浮固體沉降，得到澄清的汁液。其它用于澄清甘蔗汁的方法如亞硫酸處理和碳酸化在本領(lǐng)域中是已知的。將澄清的汁液在多效蒸發(fā)器(multiple-effectevaporator)中濃縮以制備含有約60wt.%蔗糖的糖漿。將該糖漿在真空下進(jìn)一步濃縮，直至其變得過飽和，然后用結(jié)晶糖接種。在冷卻之后，更多糖從糖漿結(jié)晶。離心使得蔗糖與糖蜜分離。進(jìn)一步的結(jié)晶提取更多的蔗糖；最終殘余物稱為赤糖糊(blackstrap)。在澄清之后，將水通過多步蒸發(fā)方法/工藝從甘蔗汁去除。該方法/工藝的剩余物，其不適于蔗糖提取，稱為糖蜜，并通常用作供燃料乙醇產(chǎn)生的底物。在本發(fā)明的方法/工藝中，將植物提取物用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理，并從經(jīng)處理的植物提取物產(chǎn)生糖蜜。糖蜜通過澄清植物提取物；濃縮見于經(jīng)澄清的植物提取物的糖(例如通過蒸發(fā))以形成糖漿；和從糖漿結(jié)晶蔗糖以形成糖蜜來產(chǎn)生。然后將糖蜜用水或植物提取物汁(例如甘蔗汁)來稀釋，并發(fā)酵經(jīng)稀釋的糖蜜以產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物。所述植物提取物可用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶在任何蒸發(fā)之前的步驟中處理。例如，所述植物提取物可用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶在汁液提取、粉碎、汁液回收和/或汁液澄清過程中進(jìn)行處理。因此，所述氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶可在磨制方法/工藝過程中和/或在澄清步驟中添加。本發(fā)明的方法/工藝可進(jìn)一步包括回收所述發(fā)酵產(chǎn)物。本發(fā)明的方法/工藝可進(jìn)一步包括回收所述糖。所述糖可通過任何本領(lǐng)域中已知的方法/工藝回收。例如，蔗糖可通過包括下述步驟的方法/工藝回收：(x)澄清植物提取物；(y)濃縮見于經(jīng)澄清的植物提取物的糖(例如通過蒸發(fā))以形成糖漿；和(z)從糖漿結(jié)晶蔗糖。如上所述，通常，磨坊在7左右的pH進(jìn)行針對糖和/或乙醇的粗汁液澄清以最小化Maillard產(chǎn)物形成。本發(fā)明的方法的另一個(gè)好處是可在更加堿性的pH如7.5-9，例如8-9的pH澄清粗汁液以供糖和/或乙醇產(chǎn)生。通過使用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶以避免Maillard產(chǎn)物形成，可使用更高的pH，這在品質(zhì)(糖白度和/或較淡的汁液(juicelighter)、產(chǎn)量(減少了在精制方法/工藝中損失的糖的量)和生產(chǎn)力(減少了澄清的保持時(shí)間)方面改善了澄清性能。所述植物提取物可為甜高粱、糖甜菜、甘蔗，或其任意混合物。具體而言，所述植物提取物可為粗甘蔗汁或澄清的甘蔗汁。發(fā)酵產(chǎn)物術(shù)語“發(fā)酵產(chǎn)物”意指包括使用發(fā)酵生物發(fā)酵的方法或方法/工藝生成的產(chǎn)物。根據(jù)本發(fā)明所包括的發(fā)酵產(chǎn)物包括醇類(例如，乙醇、甲醇、丁醇)；有機(jī)酸(例如，檸檬酸、乙酸、衣康酸、乳酸、琥珀酸、葡糖酸)；酮類(例如，丙酮)；氨基酸(例如，谷氨酸)；氣體(例如，H2和CO2)；抗生素(例如，青霉素和四環(huán)素)；酶；維生素(例如，核黃素、B12、β-胡蘿卜素)；以及激素。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述發(fā)酵產(chǎn)物是乙醇，例如，燃料乙醇；飲用乙醇(即，可飲用的中性酒)；或工業(yè)乙醇或用于可飲用醇類工業(yè)(例如，啤酒和葡萄酒)、乳制品工業(yè)(例如，發(fā)酵的乳制品)、皮革工業(yè)和煙草工業(yè)的產(chǎn)物。優(yōu)選的啤酒類型包括愛兒啤酒(ale)、烈性啤酒(stout)、缽爾透黑啤酒(porters)、陳貯啤酒(lagers)、苦味酒(bitters)、麥芽酒(maltliquors)、發(fā)泡酒(happoushu)、高醇啤酒(high-alcoholbeer)、低醇啤酒(low-alcoholbeer)、低熱量啤酒(low-caloriebeer)或清淡啤酒(lightbeer)。發(fā)酵生物術(shù)語“發(fā)酵生物”指適于產(chǎn)生所需發(fā)酵產(chǎn)物的任何生物，包括細(xì)菌和真菌生物如絲狀真菌。根據(jù)本發(fā)明合適的發(fā)酵生物能夠?qū)⒖砂l(fā)酵的糖，如阿拉伯糖、果糖、葡萄糖、麥芽糖、甘露糖和/或木糖直接或間接發(fā)酵即轉(zhuǎn)化為所需的發(fā)酵產(chǎn)物。發(fā)酵生物的實(shí)例包括真菌生物如酵母。優(yōu)選的酵母包括酵母屬，特別是釀酒酵母或葡萄汁酵母(Saccharomycesuvarum)的菌株；畢赤酵母屬(Pichia)，特別是樹干畢赤酵母(Pichiastipitis)的菌株，如樹干畢赤酵母CBS5773，或巴斯德畢赤酵母(Pichiapastoris)的菌株；假絲酵母屬(Candida)，特別是阿糖發(fā)酵假絲酵母(Candidaarabinofermentans)、博伊丁氏假絲酵母(Candidaboidinii)、迪丹斯假絲酵母(Candidadiddensii)、休哈塔假絲酵母(Candidashehatae)、Candidasonorensis，熱帶假絲酵母(Candidatropicalis)或產(chǎn)朊假絲酵母(Candidautilis)的菌株。其它發(fā)酵生物包括漢遜酵母屬(Hansenula)，特別是異常漢遜酵母(Hansenulaanomala)或多形漢遜酵母(Hansenulapolymorpha)的菌株；克魯維酵母(Kluyveromyces)，特別是脆壁克魯維酵母(Kluyveromycesfragilis)或馬克斯克魯維酵母(Kluyveromycesmarxianus)的菌株；裂殖酵母屬(Schizosaccharomyces)，特別是粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomycespombe)的菌株。優(yōu)選的細(xì)菌發(fā)酵生物包括埃希氏菌屬(Escherichia)，特別是大腸桿菌(Escherichiacoli)的菌株，發(fā)酵單胞菌屬(Zymomonas)，特別是運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌(Zymomonasmobilis)的菌株，發(fā)酵細(xì)菌屬(Zymobacter)，特別是棕櫚發(fā)酵細(xì)菌(Zymobactorpalmae)的菌株，克雷伯氏菌屬(Klebsiella)，特別是產(chǎn)酸克雷伯氏菌(Klebsiellaoxytoca)的菌株，明串珠菌屬(Leuconostoc)，特別是腸膜明串珠菌(Leuconostocmesenteroides)的菌株，梭菌屬(Clostridium)，特別是酪酸梭菌(Clostridiumbutyricum)的菌株，腸桿菌屬(Enterobacter)，特別是產(chǎn)氣腸桿菌(Enterobacteraerogenes)的菌株，以及熱厭氧桿菌屬(Thermoanaerobacter)的菌株，特別是熱厭氧桿菌BG1L1(Appl.Microbiol.Biotech.77:61-86)和乙醇熱厭氧桿菌(Thermoanarobacterethanolicus)、Thermoanaerobactermathrani或熱解糖熱厭氧桿菌(Thermoanaerobacterthermosaccharolyticum)的菌株。還想到的是乳桿菌屬(Lactobacillus)以及谷氨酸棒狀桿菌R(CorynebacteriumglutamicumR)，熱葡糖苷酶芽孢桿菌(Bacillusthermoglucosidaisus)和熱葡糖苷酶地芽孢桿菌(Geobacillusthermoglucosidasius)的菌株。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述發(fā)酵生物是C6糖發(fā)酵生物，例如，釀酒酵母的菌株。在一個(gè)實(shí)施方案中，將所述發(fā)酵生物添加至發(fā)酵培養(yǎng)基中從而使得每ml發(fā)酵培養(yǎng)基中活的發(fā)酵生物如酵母計(jì)數(shù)為105至1012，優(yōu)選107至1010的范圍內(nèi)，特別是約5x107。對于乙醇發(fā)酵，酵母是優(yōu)選的發(fā)酵生物。優(yōu)選酵母屬(Saccharomyces)的菌株，特別是釀酒酵母菌種的菌株，優(yōu)選對高水平的乙醇，即高至例如約10，12，15或20vol%或更高的乙醇具有抗性的菌株。商業(yè)上可獲得的酵母包括，例如LNFSA-1，LNFBG-1，LNFPE-2和LNFCAT-1(可從LNFBrazil獲得)，REDSTARTM和ETHANOLREDTM酵母(可從Fermentis/Lesaffre,USA獲得)，F(xiàn)ALI(可從Fleischmann’sYeast,USA獲得)，SUPERSTART和THERMOSACCTM新鮮酵母(可從EthanolTechnology,WI,USA獲得)，BIOFERMAFT和XR(可從NABC-NorthAmericanBioproductsCorporation,GA,USA獲得)，GERTSTRAND(可從GertStrandAB,Sweden獲得)和FERMIOL(可從DSMSpecialties獲得)。根據(jù)本發(fā)明，能夠從可發(fā)酵的糖產(chǎn)生所需的發(fā)酵產(chǎn)物的發(fā)酵生物優(yōu)選在準(zhǔn)確的條件下以特定的生長速率生長。當(dāng)將所述發(fā)酵生物導(dǎo)入/添加入所述發(fā)酵培養(yǎng)基時(shí)，接種的發(fā)酵生物經(jīng)過許多階段。起初，生長并未發(fā)生。該期間稱為“遲滯期”，且可視為適應(yīng)期。在下一個(gè)稱為“指數(shù)期”的階段，生長速率逐漸增加。經(jīng)過一段最大生長的時(shí)間，生長速率停止，且所述發(fā)酵生物進(jìn)入“穩(wěn)定期”。又一段時(shí)間后所述發(fā)酵生物進(jìn)入“死亡期”，此時(shí)活細(xì)胞數(shù)減少。發(fā)酵發(fā)酵條件基于例如，植物材料的種類、可用的可發(fā)酵糖類、發(fā)酵生物和/或期望的發(fā)酵產(chǎn)物來確定。本領(lǐng)域技術(shù)人員可容易地確定合適的發(fā)酵條件。根據(jù)本發(fā)明的發(fā)酵可在通常使用的條件下進(jìn)行。優(yōu)選的發(fā)酵方法為厭氧方法。舉例而言，發(fā)酵可在高至75℃的溫度，例如40-70℃，如50-60℃進(jìn)行。然而，具有顯著較低至室溫左右(20℃左右)的最適溫度的細(xì)菌也是已知的。合適的發(fā)酵生物的實(shí)例可見于上文“發(fā)酵生物”部分。對于使用酵母的乙醇產(chǎn)生，發(fā)酵可進(jìn)行24至96小時(shí)，特別是35至60小時(shí)。在一個(gè)實(shí)施方案中，發(fā)酵在20至40℃，優(yōu)選26至34℃，特別是32℃左右的溫度進(jìn)行。在一個(gè)實(shí)施方案中，pH為3至6，優(yōu)選為pH4至5左右。其它發(fā)酵產(chǎn)物可在本領(lǐng)域技術(shù)人員已知適于所述發(fā)酵生物的溫度進(jìn)行發(fā)酵。發(fā)酵通常在3至7范圍的pH，優(yōu)選在pH3.5至6，如pH5左右進(jìn)行。發(fā)酵通常持續(xù)6-96小時(shí)。本發(fā)明的方法可作為分批或連續(xù)過程進(jìn)行。發(fā)酵可在超濾系統(tǒng)中進(jìn)行，其中在固體、水和發(fā)酵生物存在下保持滲余物的循環(huán)，而其中滲透物為含有所期望的發(fā)酵產(chǎn)物的液體。同樣涵蓋的是在具有超濾膜的連續(xù)膜反應(yīng)器中進(jìn)行的方法/工藝，其中在固體、水和發(fā)酵生物存在下保持滲余物的循環(huán)，而其中滲透物為含有所期望的發(fā)酵產(chǎn)物的液體。在發(fā)酵后，發(fā)酵生物可自發(fā)酵漿料分離并再循環(huán)。發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)基(″Fermentationmedia″或″fermentationmedium″)指其中進(jìn)行發(fā)酵的環(huán)境，并包括發(fā)酵底物，即由發(fā)酵生物代謝的糖源。發(fā)酵培養(yǎng)基可包含對于發(fā)酵生物的其它營養(yǎng)物和生長刺激物。營養(yǎng)物和生長刺激物廣泛用于發(fā)酵領(lǐng)域，并包括氮源如氨；維生素和礦物質(zhì)，或其組合。回收在發(fā)酵之后，可將發(fā)酵產(chǎn)物從發(fā)酵培養(yǎng)基分離?？烧麴s發(fā)酵培養(yǎng)基以提取所需發(fā)酵產(chǎn)物，或可通過微濾或膜過濾技術(shù)從發(fā)酵培養(yǎng)基提取所需發(fā)酵產(chǎn)物?；蛘?，發(fā)酵產(chǎn)物可通過汽提來回收?；厥盏姆椒ㄔ诒绢I(lǐng)域是公知的。酶下述酶在本發(fā)明的方法中應(yīng)以“有效量”使用。天冬酰胺酶所述天冬酰胺酶可為EC3.5.1.1(天冬酰胺酶或L-天冬酰胺酰胺基水解酶)或EC3.5.1.38(谷氨酰胺-天冬酰胺-酶或谷氨酰胺酶-天冬酰胺酶)的酶。所述天冬酰胺酶可為微生物天冬酰胺酶，例如來源于細(xì)菌、古菌(archaeon)或真菌的天冬酰胺酶。例如，所述天冬酰胺酶可來源于古菌域(Archaea)、曲霉屬、假絲酵母屬、歐文氏菌屬、鐮孢屬或酵母屬。具體而言，所述天冬酰胺酶可來源于煙曲霉、構(gòu)巢曲霉、黑曲霉、米曲霉、產(chǎn)朊假絲酵母、菊歐文氏菌(Erwiniachrysanthemii)、大腸桿菌、禾本科鐮孢(Fusariumgraminearum)、桔青霉(Penicilliumcitrinum)或釀酒酵母。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述天冬酰胺酶與SEQIDNO:1(米曲霉天冬酰胺酶)具有至少70%，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%的序列同一性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述天冬酰胺酶包含或組成為SEQIDNO:1的序列；或是SEQIDNO:1具有天冬酰胺酶活性的片段。SEQIDNO:1的片段包括氨基酸27-378，30-378，75-378和80-378的序列。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述天冬酰胺酶與SEQIDNO:2(黑曲霉天冬酰胺酶)具有至少70%，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%的序列同一性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述天冬酰胺酶包含或組成為SEQIDNO:2的序列；或是SEQIDNO:2具有天冬酰胺酶活性的片段。SEQIDNO:2的片段包括氨基酸80-378的序列。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述天冬酰胺酶與SEQIDNO:3(煙曲霉天冬酰胺酶)具有至少70%，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%的序列同一性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述天冬酰胺酶包含或組成為SEQIDNO:3的序列；或是SEQIDNO:3具有天冬酰胺酶活性的片段。SEQIDNO:3的片段包括氨基酸80-374的序列。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述天冬酰胺酶與SEQIDNO:4(構(gòu)巢曲霉天冬酰胺酶)具有至少70%，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%的序列同一性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述天冬酰胺酶包含或組成為SEQIDNO:4的序列；或是SEQIDNO:4具有天冬酰胺酶活性的片段。SEQIDNO:4的片段包括氨基酸80-378的序列。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述天冬酰胺酶與SEQIDNO:5(桔青霉天冬酰胺酶)具有至少70%，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%的序列同一性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述天冬酰胺酶包含或組成為SEQIDNO:5的序列；或是SEQIDNO:5具有天冬酰胺酶活性的片段。SEQIDNO:5的片段包括氨基酸80-379的序列。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述天冬酰胺酶與SEQIDNO:6(土曲霉天冬酰胺酶)具有至少70%，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%的序列同一性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述天冬酰胺酶包含或組成為SEQIDNO:6的序列；或是SEQIDNO:6具有天冬酰胺酶活性的片段。SEQIDNO:6的片段包括氨基酸80-375的序列。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述天冬酰胺酶與SEQIDNO:7(激烈火球菌天冬酰胺酶)具有至少70%，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%的序列同一性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述天冬酰胺酶包含或組成為SEQIDNO:7的序列；或是SEQIDNO:7具有天冬酰胺酶活性的片段。SEQIDNO:7的片段包括氨基酸80-375的序列?？筛鶕?jù)本發(fā)明使用的天冬酰胺酶可具有WO2004/026043，WO2004/030468，WO2004/032648，WO2008/110513，WO2008/128974，WO2008/128975，和WO2008/151807中公開的氨基酸序列，或與本文中公開的天冬酰胺酶具有至少50%，至少60%，至少70%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%或至少99%同一性的氨基酸序列。此種天冬酰胺酶優(yōu)選來源于黑曲霉或米曲霉。天冬酰胺酶的實(shí)例包括上述列出的天冬酰胺酶的變體，例如具有一個(gè)或多個(gè)保守氨基酸取代的變體。所述天冬酰胺酶可經(jīng)部分或完全的經(jīng)翻譯后加工。例如，它們可以在不同位置N端截短，從而會發(fā)現(xiàn)不同的N端序列。野生型米曲霉天冬酰胺酶(SEQIDNO:1)當(dāng)在米曲霉中產(chǎn)生時(shí)，發(fā)現(xiàn)其經(jīng)非均質(zhì)加工(heterogeneouslyprocessed)從而使得在純化樣品中發(fā)現(xiàn)至少四種N端序列，對應(yīng)于多肽截短為氨基酸27-378，30-378，75-378或80-378。其它天冬酰胺酶可在相應(yīng)的位置或在其它位置截短。例如，天冬酰胺酶可在緊接著對應(yīng)于SEQIDNO:1的任何位置27、30、75或80的位置之前截短。術(shù)語“緊接著…之前”意指該截短發(fā)生在提及的位置的N端側(cè)。所述天冬酰胺酶可顯示高的熱耐受性，例如高的熱穩(wěn)定性，或在高溫下高的相對天冬酰胺酶活性。在一個(gè)方面，所述天冬酰胺可為熱穩(wěn)定的，或具有高熱穩(wěn)定性。熱穩(wěn)定性可確定為熱處理之后的剩余天冬酰胺酶活性除以無熱處理下的天冬酰胺酶活性。熱處理可在pH6或pH6左右在高溫溫育10、20、30或40分鐘。在無熱處理下的天冬酰胺酶活性可確定為在與經(jīng)熱處理的樣品相同的緩沖液中在4℃溫育相同時(shí)間的樣品的天冬酰胺酶活性，或其可為熱處理之前的天冬酰胺酶活性。所述天冬酰胺酶可為熱穩(wěn)定的，并在pH6在高溫溫育一段時(shí)間例如20分鐘之后，與未經(jīng)熱處理的天冬酰胺酶活性相比，顯示至少90%，如至少80%，至少70%，至少60%，至少50%或至少40%的剩余天冬酰胺酶活性。在本發(fā)明的語境中，高溫可意指，例如55℃，58℃，60℃，61℃，62℃，63℃，64℃，65℃，66℃，67℃，68℃，69℃，70℃，72℃或75℃。天冬酰胺酶活性可通過本領(lǐng)域中的任何已知方法確定。例如，天冬酰胺酶可通過將酶與L-天冬酰胺和羥胺在磷酸鉀緩沖液在pH6溫育20分鐘，接著進(jìn)行與FeCl2的偶聯(lián)反應(yīng)并測量A490(如WO2008/135547的實(shí)施例4中所述)來確定。溫育可為在任何合適的溫度，例如55℃。在另一個(gè)方面，所述天冬酰胺酶在高溫下與參照溫度例如37℃，40℃，45℃或50℃相比，可具有高相對活性。在高溫和在例如37℃的天冬酰胺酶活性可如上所述確定，其中與天冬酰胺的溫育在高溫和37℃分別進(jìn)行。在高溫的天冬酰胺酶活性除以在37℃的活性可為至少110%，優(yōu)選至少120%，如至少125%，130%，140%，150%，170%或200%，更優(yōu)選至少250%，如至少300%，且甚至更優(yōu)選至少500%或至少700%。所述天冬酰胺酶可為變體，其在至少一個(gè)下述區(qū)域包含氨基酸差異：位置68至74，位置279至288，位置309至319，位置329至342，和/或位置356至363；其中每個(gè)位置對應(yīng)于SEQIDNO:1的氨基酸1至378的位置。因此，所述天冬酰胺酶可在選自下組的一個(gè)或多個(gè)位置包含氨基酸序列中的差異：68，69，70，71，72，73，74，279，280，281，282，283，284，285，286，287，288，309，310，311，312，313，314，315，316，317，318，319，329，330，331，332，333，334，335，336，337，338，339，340，341，342，356，357，358，359，360，361，362，和/或363，其中每個(gè)位置對應(yīng)于SEQIDNO:1中的位置。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述氨基酸差異是取代。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述天冬酰胺酶在選自下組的一個(gè)或多個(gè)位置包含氨基酸差異：D88，D111，K194，R196，D206，E235，E255，R266，D275，K290，E311，和E331；其中每個(gè)位置對應(yīng)于SEQIDNO:1的氨基酸1至378的位置。優(yōu)選地，所述氨基酸差異是取代。因此，在一個(gè)優(yōu)選的方面，所述天冬酰胺酶包含選自下組的一個(gè)或多個(gè)取代：D88N，D111N，K194E，R196E，D206N，E235Q，E255Q，R266L，D275N，K290E，E311K，和E331Q。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述天冬酰胺酶在選自下組的至少一個(gè)下述位置包含氨基酸差異：N70，G82，I83，Q84，T85，T113，D115，A137，V164，L201，N278，T280，F(xiàn)306，I365，和E366，其中每個(gè)位置對應(yīng)于SEQIDNO:1的氨基酸1至378的位置。優(yōu)選地，所述氨基酸差異是取代。因此，在一個(gè)優(yōu)選的方面，所述天冬酰胺酶包含選自下組的至少一個(gè)下述氨基酸取代：N70P，G82P，I83P，Q84P，T85P，T113P，D115P，A137P，V164P，L201P，N278P，T280P，F(xiàn)306P，I365P，和E366P。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述天冬酰胺酶在選自下組的一個(gè)或多個(gè)位置包含氨基酸差異：S176，D223，G231，P246，Y271，S283，G328(取代為C會潛在地導(dǎo)致一個(gè)或多個(gè)二硫橋聯(lián)的形成)；D223，K249，和D286(基于疏水或靜電接觸)，其中每個(gè)位置對應(yīng)于SEQIDNO:1的氨基酸1至378的位置。優(yōu)選地，所述氨基酸差異是取代。因此，在一個(gè)優(yōu)選的方面，所述天冬酰胺酶包含選自下組的一個(gè)或多個(gè)取代：S176C；D223C；D223N/L；G231C；P246C；K249V/I/L；Y271C；S283C；D286R/N/L；和G328C。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述天冬酰胺酶在一個(gè)或多個(gè)下述位置包含氨基酸差異：D69；N70；A72；N278；D279；T280；L281；S283；D286；K290；S307；E311；D312；H317；A336；E337；Q361；和K363，其中每個(gè)位置對應(yīng)于SEQIDNO:1的氨基酸1至378的位置。優(yōu)選地，所述氨基酸差異是取代。因此，在一個(gè)優(yōu)選的方面，所述天冬酰胺酶包含選自下組的一個(gè)或多個(gè)取代：D69R/K；N70P/R/K；A72R/K；N278H/Q/R/K；D279N/V/R；T280D/E；L281D/E；D286N/V/R；K290E/L；S307A/D/E；E311Q/I/R；D312Y/N/V/R；H317D/E；A336P；E337Q/R/K/I；Q361K/R；和K363P/Q/E/L。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述天冬酰胺酶在選自下組的一個(gè)或多個(gè)下述位置包含氨基酸差異：54，57，70，83，84，86，93-96，102，107，137，139，165，172，184-186，209，212，214，215，219，220，224，260，262，264，266，299，318，320，321，323，325，327，349，351，353和356，其中每個(gè)位置對應(yīng)于SEQIDNO:1的氨基酸1至378的位置。優(yōu)選地，所述氨基酸差異是取代。因此，在一個(gè)優(yōu)選的方面，所述天冬酰胺酶包含選自下組的一個(gè)或多個(gè)取代：V54I，F(xiàn)57L，N70K，I83V，Q84D，L86P，M93L，L94K，N95D，V96L，V102D，V107I，A137I，V139I，I165L，S172A，L184Y，Q185N，S186A，V209G，F(xiàn)212R，A214V，S215T，A219T，N220T，T224A，N260K，T262D，I264L，R266K，S299N，N318G，P320V，I321V，A323R，T325S，T327V，A349Q，S351A，V353I和G356M。在一個(gè)更優(yōu)選的方面，所述天冬酰胺酶包含選自下組的一個(gè)或多個(gè)取代：V54I，F(xiàn)57L，N70K，I83V，Q84D，L86P，V102D，N260K，T262D，A323R，T327V，A349Q，S351A和V353I，其中每個(gè)位置對應(yīng)于SEQIDNO:1中的位置。在一個(gè)甚至更優(yōu)選的方面，所述天冬酰胺酶包含選自下組的一個(gè)或多個(gè)取代：N70K，A323R，T327V，A349Q，S351A和V353I，其中每個(gè)位置對應(yīng)于SEQIDNO:1中的位置。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述天冬酰胺酶在至少一個(gè)下述位置包含氨基酸差異：54，57，68-74，82-86，88，93-96，102，107，111，113，115，137，139，164，165，172，176，184-186，194，196，201，206，209，212，214，215，219，220，223，224，226，228，231，235，246，249，255，260，262，264，266，271，275，278-288，290，299，306，307，309-321，323，325，327-342，349，351，353，356-363，365，366和375，其中每個(gè)位置對應(yīng)于SEQIDNO:1中的位置。優(yōu)選地，所述天冬酰胺酶在至少一個(gè)下述位置包含氨基酸差異：54，57，70，83，84，86，102，137，164，196，201，228，260，262，278，283，290，307，312，323，327，334，336，337，349，351，353，366和/或375，其中每個(gè)位置對應(yīng)于SEQIDNO:1中的位置。所述天冬酰胺酶可包含氨基酸取代。優(yōu)選地，所述天冬酰胺酶包含至少一個(gè)下述取代：54I，57L，69K/R，70H/K/P/R/S，72K/R，82P，83P/V，84P/D，85P，86P，88N，93L，94K，95D，96L，102D，107I，111N，113P，115P，137P/S/I，139I，164D/P，165L，172A，176C，184Y，185N，186A，194E，196E/I，201P/Q，206N，209G，212R，214V，215T，219T，220T，223C/L/N，224A，228V，231C，235Q，246C，249I/L/V，255Q，260K，262D，264L，266L/K，271C，275N，278H/K/P/Q/R，279N/R/V，280D/E/P，281D/E，283C，286L/N/R/V，290E/L/V，299N，306P，307A/D/E，311I/K/Q/R，312N/R/V/Y，317D/E，318G，320V，321V，323R，325S，327V，328C，331Q，334F，336C/G/L/P，337F/I/K/Q/R，349Q，351A，353I，356M，361K/R，363E/L/P/Q，365P，366P和/或375T。更優(yōu)選地，所述天冬酰胺酶包含至少一個(gè)下述取代：54I，57L，70H/K/S，83V，84D，86P，102D，137S，164D，196I，201Q，228V，260K，262D，278H/Q，283C，290V，307A，312Y，323R，327V，334F，336C/G/L，337F/I，349Q，351A，353I，366P和/或375T。甚至更優(yōu)選地，所述天冬酰胺酶包含至少一個(gè)，如至少兩個(gè)，至少三個(gè)，至少四個(gè)或至少五個(gè)下述取代：70K，323R，327V，349Q，351A和/或353I。甚至更優(yōu)選地，所述天冬酰胺酶包含下述取代：70K，323R，327V，349Q，351A和353I。更優(yōu)選地，所述天冬酰胺酶與SEQIDNO:1或同源序列具有相同序列，除了下述取代：70K，323R，327V，349Q，351A和353I。所述天冬酰胺酶可為具有SEQIDNO:1或同源序列的序列的親本酶的變體。在一個(gè)方面，所述天冬酰胺酶在對應(yīng)于任何下述位置的位置包含氨基酸差異：SEQIDNO:1中的70，137，164，196，201，228，278，290，366和/或375。優(yōu)選地，所述天冬酰胺酶包含至少一個(gè)下述取代：70H/K/S，137S，164D，196I，201Q，228V，278H/Q，290V，366P和/或375T。所述天冬酰胺酶可在高溫下具有較高的相對天冬酰胺酶活性。特別優(yōu)選的天冬酰胺酶包含下述取代或取代的集合：70H，70K，70K+278H，70K+278H+196I，70K+278H+201Q，70K+283C，70S，137S，137S+228V，164D，196I，201Q，278H，278Q，290V，366P，和/或366P+375T。在另一個(gè)優(yōu)選的方面，所述天冬酰胺酶在至少一個(gè)下述位置包含氨基酸差異：70，283，307，312，334，336和/或337。優(yōu)選地，所述天冬酰胺酶包含至少一個(gè)下述取代：70K，283C，307A，312Y，334F，336C/G/L和/或337F/I，其中每個(gè)位置對應(yīng)于SEQIDNO:1的氨基酸1至378的位置。特別優(yōu)選的天冬酰胺酶包含下述取代或取代組合：70K，70K+283C，70K+283C+307A+312Y，70K+283C+307A+312Y+336L+337F，70K+307A，70K+307A+312Y，70K+307A+312Y+334F，70K+307A+312Y+336G+337I，70K+307A+312Y+336L+337F，70K+312Y，和/或70K+336C+337F。在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選的方面，所述天冬酰胺酶在對應(yīng)于任何下述位置的位置包含氨基酸差異：SEQIDNO:1中的54，57，70，83，84，86，93-96，102，107，137，139，165，172，184-186，209，212，214，215，219，220，224，260，262，264，266，299，318，320，321，323，325，327，349，351，353和/或356。優(yōu)選地，所述天冬酰胺酶包含至少一個(gè)下述取代：V54I，F(xiàn)57L，N70K，I83V，Q84D，L86P，M93L，L94K，N95D，V96L，V102D，V107I，A137I，V139I，I165L，S172A，L184Y，Q185N，S186A，V209G，F(xiàn)212R，A214V，S215T，A219T，N220T，T224A，N260K，T262D，I264L，R266K，S299N，N318G，P320V，I321V，A323R，T325S，T327V，A349Q，S351A，V353I和/或G356M。更優(yōu)選地，所述天冬酰胺酶包含至少一個(gè)下述取代：V54I，F(xiàn)57L，N70K，I83V，Q84D，L86P，V102D，N260K，T262D，A323R，T327V，A349Q，S351A和/或V353I。最優(yōu)選地，所述天冬酰胺酶包含至少一個(gè)，如至少兩個(gè)，至少三個(gè)，至少四個(gè)或至少五個(gè)下述取代：N70K，A323R，T327V，A349Q，S351A和/或V353I。所述天冬酰胺酶可在高溫下具有較高的相對天冬酰胺酶活性。特別優(yōu)選的天冬酰胺酶包含下述的取代組合：N70K+V54I+F57L，N70K+I83V+Q84D+A323R+T327V，N70K+I83V+Q84D+A323R+T327V+A349Q+S351A+V353I，N70K+L86P+V102D+A323R+T327V，N70K+V102D+A323R+T327V+A349Q+S351A+V353I，N70K+N260K+T262D，N70K+A323R+T327V，N70K+A323R+T327V+A349Q+S351A+V353I，和/或N70K+A349Q+S351A+V353I。在一個(gè)實(shí)施方案中，天冬酰胺酶變體與SEQIDNO:1具有至少70%序列同一性例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%，但少于100%的序列同一性。在一個(gè)實(shí)施方案中，天冬酰胺酶變體與SEQIDNO:2具有至少70%序列同一性例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%，但少于100%的序列同一性。在一個(gè)實(shí)施方案中，天冬酰胺酶變體與SEQIDNO:3具有至少70%序列同一性例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%，但少于100%的序列同一性。在一個(gè)實(shí)施方案中，天冬酰胺酶變體與SEQIDNO:4具有至少70%序列同一性例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%，但少于100%的序列同一性。在一個(gè)實(shí)施方案中，天冬酰胺酶變體與SEQIDNO:5具有至少70%序列同一性例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%，但少于100%的序列同一性。在一個(gè)實(shí)施方案中，天冬酰胺酶變體與SEQIDNO:6具有至少70%序列同一性例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%，但少于100%的序列同一性。在一個(gè)實(shí)施方案中，天冬酰胺酶變體與SEQIDNO:7具有至少70%序列同一性例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%，但少于100%的序列同一性。天冬酰胺酶在其最具活性的形式可為四聚體。在一個(gè)實(shí)施方案中，天冬酰胺酶以約100-10,000ASNU每kg干物質(zhì)，更優(yōu)選約250-8,000ASNU每kg干物質(zhì)，更優(yōu)選約500-7,500ASNU每kg干物質(zhì)，和最優(yōu)選約1,000-5,000ASNU每kg干物質(zhì)的量提供。天冬酰胺酶單位(ASNU)定義為在37℃和pH7.0通過水解天冬酰胺生成1.0微摩爾的氨所需的酶的量。當(dāng)確定活性時(shí)，天冬酰胺的濃度可為9.6mg/ml。氨基酸氧化酶氨基酸氧化酶，其屬于酶分類EC1.4.3.2和EC1.4.3.3，是催化見于自然界的氨基酸脫氨成為相應(yīng)的酮酸的氧還酶?？墒褂脕碜哉婢?、細(xì)菌或植物來源的氨基酸氧化酶。所述氨基酸氧化酶可例如來源于Bothropsatrox，混濁紅球菌(Rhodococcusopacus)，哈茨木霉(Trichodermaharzianum)，Trigonopsisvariabilis，或其它生物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述氨基酸氧化酶與SEQIDNO:8，Bothropsatrox氨基酸氧化酶具有至少70%的序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，氨基酸氧化酶包含或組成為SEQIDNO:8的序列；或是SEQIDNO:8具有氨基酸氧化酶活性的片段。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述氨基酸氧化酶與SEQIDNO:9，哈茨木霉氨基酸氧化酶具有至少70%的序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，氨基酸氧化酶包含或組成為SEQIDNO:9的序列；或是SEQIDNO:9具有氨基酸氧化酶活性的片段。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述氨基酸氧化酶與SEQIDNO:10，Trigonopsisvariabilis氨基酸氧化酶具有至少70%的序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，氨基酸氧化酶包含或組成為SEQIDNO:10的序列；或是SEQIDNO:10具有氨基酸氧化酶活性的片段。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述氨基酸氧化酶與SEQIDNO:11，混濁紅球菌氨基酸氧化酶具有至少70%的序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，氨基酸氧化酶包含或組成為SEQIDNO:11的序列；或是SEQIDNO:11具有氨基酸氧化酶活性的片段。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述氨基酸氧化酶與SEQIDNO:12，構(gòu)巢曲霉氨基酸氧化酶具有至少70%的序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，氨基酸氧化酶包含或組成為SEQIDNO:12的序列；或是SEQIDNO:12具有氨基酸氧化酶活性的片段。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述氨基酸氧化酶與SEQIDNO:13，Streptococcusoligofermentans氨基酸氧化酶具有至少70%的序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，氨基酸氧化酶包含或組成為SEQIDNO:13的序列；或是SEQIDNO:13具有氨基酸氧化酶活性的片段。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述氨基酸氧化酶與SEQIDNO:14，粗糙脈孢菌(Neurosporacrassa)氨基酸氧化酶具有至少70%的序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，氨基酸氧化酶包含或組成為SEQIDNO:14的序列；或是SEQIDNO:14具有氨基酸氧化酶活性的片段。根據(jù)本發(fā)明可用的氨基酸氧化酶可具有WO94/25574；WO2005/098000；EP1205542；Alves等，2008，UniProtDatabase，登錄號P0CC17；Davis等，2005，Appl.Environ.Microbiol.71(7):3551–3555；Tong等，2008，J.Bacteriol.190(13):4716-4721；Niedermann等，1990，J.Biol.Chem.265(28):17246-17251中公開的氨基酸序列；或與本文中公開的氨基酸氧化酶具有至少50%，至少60%，至少70%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%或至少99%同一性的氨基酸序列。精氨酸酶精氨酸酶(L-精氨酸氨基水解酶，EC3.5.3.1)是一組酶，其催化精氨酸水解為鳥氨酸和尿素。可使用來自真菌、細(xì)菌、植物或動(dòng)物來源的精氨酸酶。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述精氨酸酶與SEQIDNO:15，蠟狀芽孢桿菌(Bacilluscereus)精氨酸酶具有至少70%的序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，精氨酸酶包含或組成為SEQIDNO:15的序列；或是SEQIDNO:15具有精氨酸酶活性的片段。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述精氨酸酶與SEQIDNO:16，來自番茄的精氨酸酶具有至少70%的序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，精氨酸酶包含或組成為SEQIDNO:16的序列；或是SEQIDNO:16具有精氨酸酶活性的片段。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述精氨酸酶與SEQIDNO:17，來自蘑菇的精氨酸酶具有至少70%的序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，精氨酸酶包含或組成為SEQIDNO:17的序列；或是SEQIDNO:17具有精氨酸酶活性的片段。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述精氨酸酶與SEQIDNO:18，來自豬的精氨酸酶具有至少70%的序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，精氨酸酶包含或組成為SEQIDNO:18的序列；或是SEQIDNO:18具有精氨酸酶活性的片段。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述精氨酸酶與SEQIDNO:19具有至少70%的序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，精氨酸酶包含或組成為SEQIDNO:19的序列；或是SEQIDNO:19具有精氨酸酶活性的片段。根據(jù)本發(fā)明，精氨酸酶和天冬酰胺酶由于其類似的作用模式為等價(jià)的酶。兩種酶(即精氨酸酶和天冬酰胺酶)作用于類似氨基酸的含氮側(cè)鏈，并釋放含氮化合物，即分別釋放尿素(CO(NH2)2)和氨(NH3)。α-淀粉酶根據(jù)本發(fā)明，可使用任何α-淀粉酶，如真菌、細(xì)菌或植物來源的α-淀粉酶。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述α-淀粉酶是酸性α-淀粉酶，例如酸性真菌或酸性細(xì)菌α-淀粉酶。術(shù)語“酸性α-淀粉酶”意指以有效量添加時(shí)在3至7，優(yōu)選3.5至6，或更優(yōu)選4-5的范圍內(nèi)的pH具有最佳活性的α-淀粉酶(EC3.2.1.1)。細(xì)菌α-淀粉酶用于本發(fā)明的α-淀粉酶可為細(xì)菌α-淀粉酶，例如來源于芽孢桿菌屬(Bacillus)的α-淀粉酶。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述芽孢桿菌屬α-淀粉酶來源于解淀粉芽孢桿菌(B.amyloliquefaciens)，地衣芽孢桿菌(B.licheniformis)，嗜熱脂肪芽孢桿菌(B.stearothermophilus)或枯草芽孢桿菌(B.subtilis)的菌株，但也可來源于其它芽孢桿菌屬菌種。α-淀粉酶的特定實(shí)例包括WO99/19467的SEQIDNO:5的解淀粉芽孢桿菌α-淀粉酶，WO99/19467的SEQIDNO:4的地衣芽孢桿菌α-淀粉酶，和WO99/19467的SEQIDNO:3的嗜熱脂肪芽孢桿菌α-淀粉酶(所有序列通過提述并入本文)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述α-淀粉酶可為分別與示于WO99/19467的SEQIDNOS:3、4或5中的任何序列具有至少60%，例如至少70%，至少80%，至少90%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%或至少99%的同一性程度的酶。所述芽孢桿菌屬α-淀粉酶也可為變體和/或雜合體，特別是WO96/23873、WO96/23874、WO97/41213、WO99/19467、WO00/60059和WO02/10355(所有文件通過提述并入本文)中描述的變體和/或雜合體。具體α-淀粉酶變體公開于美國專利號6,093,562、6,187,576或美國專利號6,297,038(通過提述并入本文)，并包括在位置R179到G182具有一個(gè)或兩個(gè)氨基酸缺失的嗜熱脂肪芽孢桿菌α-淀粉酶(BSGα-淀粉酶)變體，優(yōu)選WO96/23873公開的雙缺失-參見，例如，第20頁第1-10行(通過提述并入本文)，優(yōu)選與WO99/19467公開的SEQIDNO:3所列的嗜熱脂肪芽孢桿菌α-淀粉酶的氨基酸序列相比對應(yīng)于Δ(181-182)，或使用WO99/19467中的SEQIDNO:3的編號方式缺失氨基酸R179和G180(所述文獻(xiàn)通過提述并入本文)。甚至更優(yōu)選的是芽孢桿菌屬α-淀粉酶，特別是嗜熱脂肪芽孢桿菌α-淀粉酶，其與WO99/19467公開的SEQIDNO:3所列的野生型BSGα-淀粉酶氨基酸序列相比具有對應(yīng)于Δ(181-182)的雙缺失，且進(jìn)一步包括N193F取代(也表示為I181*+G182*+N193F)。細(xì)菌雜合體α-淀粉酶所述α-淀粉酶可為雜合體α-淀粉酶，例如，包括地衣芽孢桿菌α-淀粉酶(示于WO1999/19467的SEQIDNO:4)的445個(gè)C-末端氨基酸殘基，以及源自解淀粉芽孢桿菌的α淀粉酶(示于WO99/19467的SEQIDNO:5)的37個(gè)N-末端氨基酸殘基，并具有下列取代中的一個(gè)或多個(gè)，特別是全部的α-淀粉酶：G48A+T49I+G107A+H156Y+A181T+N190F+I201F+A209V+Q264S(使用WO99/19467的SEQIDNO:4中地衣芽孢桿菌編號方式)。也優(yōu)選具有一個(gè)或多個(gè)下述突變的變體(或在其它芽孢桿菌屬α-淀粉酶中的對應(yīng)突變)：H154Y，A181T，N190F，A209V和Q264S和/或位置176和179之間兩個(gè)殘基的缺失，優(yōu)選E178和G179的缺失(關(guān)于編號方式，使用WO99/19467的SEQIDNO:5)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述細(xì)菌α-淀粉酶以0.0005-5KNU每gDS(干固體)，優(yōu)選0.001-1KNU每gDS，如大約0.050KNU每gDS的量劑量添加。真菌α-淀粉酶真菌α-淀粉酶包括源自曲霉屬菌株的α-淀粉酶，如川地曲霉(Aspergilluskawachii)，黑曲霉(Aspergillusniger)和米曲霉(Aspergillusoryzae)α-淀粉酶。優(yōu)選的酸性真菌α-淀粉酶為下述的α-淀粉酶，其與WO96/23874的SEQIDNO:10中所示氨基酸序列的成熟部分顯示高同一性，即，至少70%，至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，至少99%或甚至100%的同一性。另一個(gè)優(yōu)選的酸性α-淀粉酶源自黑曲霉的菌株。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述酸性真菌α-淀粉酶是黑曲霉α-淀粉酶，其作為“AMYA_ASPNG”以原始登錄號P56271公開于Swiss-prot/TeEMBL數(shù)據(jù)庫中，并描述于WO89/01969(實(shí)施例3，其通過提述并入本文)。源自黑曲霉的商業(yè)上可得到的酸性真菌α-淀粉酶是SP288(可由NovozymesA/S,Denmark得到)。其它野生型α-淀粉酶包括源自多孔菌屬(Meripilus)和根毛霉屬(Rhizomucor)的菌株，優(yōu)選巨多孔菌(Meripilusgiganteus)或微小根毛霉(Rhizomucorpusillus)(WO2004/055178，其通過提述并入本文)的菌株的那些α-淀粉酶。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述α-淀粉酶源自川地曲霉(Kaneko等1996,J.Ferment.Bioeng.81:292-298“Molecular-cloninganddeterminationofthenucleotide-sequenceofageneencodinganacid-stableα-amylasefromAspergilluskawachii”，并進(jìn)一步為EMBL:#AB008370)。所述真菌α-淀粉酶也可為包括淀粉結(jié)合域(SBD)和α-淀粉酶催化域的野生型酶或其變體。真菌雜合體α-淀粉酶在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述真菌酸性α-淀粉酶為雜合體α-淀粉酶。真菌雜合體α-淀粉酶的實(shí)例包括WO2005/003311或美國專利申請公開號2005/0054071(Novozymes)和WO2006/069290(Novozymes)中公開的那些，所述文件通過提述并入本文。雜合體α-淀粉酶可包含α-淀粉酶催化域(CD)和糖結(jié)合域/模塊(CBM)，如淀粉結(jié)合域(SBD)，以及任選的接頭。雜合體α-淀粉酶的實(shí)例包括WO2006/069290實(shí)施例中的表1到5中公開的那些，包括具有催化域JA118和羅耳阿太菌(Atheliarolfsii)SBD的變體(WO2006/069290中的SEQIDNO:100)，具有羅耳阿太菌AMG接頭和SBD的微小根毛霉α-淀粉酶(WO2006/069290中的SEQIDNO:101)，具有黑曲霉葡糖淀粉酶接頭和SBD的微小根毛霉α-淀粉酶(其作為美國申請?zhí)?1/316,535中氨基酸序列SEQIDNO:20、SEQIDNO:72和SEQIDNO:96的組合公開于表5)，或WO2006/069290中表5中作為V039的α-淀粉酶，和具有羅耳阿太菌葡糖淀粉酶接頭和SBD的巨多孔菌α-淀粉酶(WO2006/069290中的SEQIDNO:102)。其它雜合體α-淀粉酶列于美國申請?zhí)?1/316,535和WO2006/069290(其通過提述并入本文)實(shí)施例4中表3、4、5和6中。雜合體α-淀粉酶的其它實(shí)例包括美國專利申請公開號2005/0054071中公開的那些，包括第15頁表3公開的那些，如具有川地曲霉接頭和淀粉結(jié)合域的黑曲霉α-淀粉酶。其它α-淀粉酶與任何上面提及的α-淀粉酶顯示高序列同一性程度，即，與上述公開的成熟酶序列顯示至少70%，至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，至少99%或甚至100%同一性。酸性α-淀粉酶可根據(jù)本發(fā)明以0.001至10AFAU/gDS，優(yōu)選0.01至5AFAU/gDS，特別是0.3至2AFAU/gDS，或0.001至1FAU-F/gDS，優(yōu)選0.01至1FAU-F/gDS的量添加。商業(yè)性α-淀粉酶產(chǎn)品優(yōu)選的包含α-淀粉酶的商業(yè)組合物包括MYCOLASETM(DSM)，BANTM，TERMAMYLTMSC，F(xiàn)UNGAMYLTM，LIQUOZYMETMX，LIQUOZYMETMSC和SANTMSUPER，SANTMEXTRAL(NovozymesA/S)和CLARASETML-40,000，DEX-LOTM，SPEZYMETMFRED，SPEZYMETMAA，SPEZYMETMALPHA，SPEZYMETMDELTAAA，GC358，GC980，SPEZYMETMCL，以及SPEZYMETMRSL(DaniscoA/S)，以及稱作SP288的來自黑曲霉的酸性真菌α-淀粉酶(可從NovozymesA/S,Denmark獲得)。糖源生成酶(糖化酶)術(shù)語“糖源生成酶”包括葡糖淀粉酶(葡萄糖生成者)，β-淀粉酶和產(chǎn)麥芽糖淀粉酶(均為麥芽糖生成者)以及α-葡糖苷酶、異淀粉酶和普魯蘭酶。糖源生成酶能夠產(chǎn)生碳水化合物，其可由所述發(fā)酵生物用作能量源，例如，當(dāng)用于本發(fā)明的產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物如乙醇的方法時(shí)。所產(chǎn)生的碳水化合物可直接或間接轉(zhuǎn)化為期望的發(fā)酵產(chǎn)物，優(yōu)選乙醇。根據(jù)本發(fā)明，可使用糖源生成酶的混合物?；旌衔锇ò辽倨咸堑矸勖负挺?淀粉酶(特別是酸性淀粉酶，甚至更優(yōu)選酸性真菌α-淀粉酶)的混合物。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，葡糖淀粉酶活性(AGU)和酸性真菌α-淀粉酶活性(FAU-F)之間的比例(即AGU每FAU-F)可為0.1至100AGU/FAU-F，特別是2-50AGU/FAU-F，如10-40AGU/FAU-F的范圍，特別是當(dāng)進(jìn)行一步發(fā)酵(生淀粉水解-RSH)時(shí)，即當(dāng)糖化和發(fā)酵同時(shí)進(jìn)行(即無液化步驟)時(shí)。在常規(guī)的淀粉至乙醇方法/工藝(即包括液化步驟)中，所述比例可優(yōu)選如EP140410中所定義，特別是當(dāng)糖化和發(fā)酵同時(shí)進(jìn)行時(shí)。葡糖淀粉酶所述葡糖淀粉酶可源自任何合適的來源，例如源自微生物或植物。優(yōu)選的葡糖淀粉酶是真菌或細(xì)菌來源的，選自下組：曲霉屬葡糖淀粉酶，特別是黑曲霉G1或G2葡糖淀粉酶(Boel等,1984,EMBOJ.3(5):1097-1102)，或其變體，如WO92/00381,WO00/04136和WO01/04273(來自Novozymes,Denmark)中公開的那些；WO84/02921中公開的泡盛曲霉(A.awamori)葡糖淀粉酶，米曲霉葡糖淀粉酶(Hata等,1991,Agric.Biol.Chem.,55(4):941-949)，或它們的變體或片段。其它曲霉屬葡糖淀粉酶變體包括具有增強(qiáng)的熱穩(wěn)定性的變體：G137A和G139A(Chen等,1996,Prot.Eng.9:499-505)；D257E和D293E/Q(Chen等,1995,Prot.Eng.8,575-582)；N182(Chen等,1994,Biochem.J.301:275-281)；二硫鍵、A246C(Fierobe等,1996,Biochemistry,35:8698-8704)；以及在A435和S436位置導(dǎo)入Pro殘基(Li等,1997,ProteinEng.10:1199-1204)。其它的葡糖淀粉酶包括羅耳阿太菌(之前表示為羅耳伏革菌(Corticiumrolfsii))葡糖淀粉酶(參見美國專利號4,727,026和Nagasaka等，1998,ApplMicrobiolBiotechnol.50:323-330)，踝節(jié)菌屬(Talaromyces)葡糖淀粉酶，特別是源自杜邦踝節(jié)菌(Talaromycesduponti)、埃莫森踝節(jié)菌(Talaromycesemersonii)(WO99/28448)、Talaromycesleycettanus(美國專利號Re.32,153)、嗜熱踝節(jié)菌(Talaromycesthermophilus)(美國專利號4,587,215)。細(xì)菌葡糖淀粉酶包括來自梭菌屬(Clostridium)，特別是熱解淀粉梭菌(C.thermoamylolyticum)(EP135,138)和熱硫化氫梭菌(C.thermohydrosulfuricum)(WO86/01831)，均在WO2006/069289中公開的瓣環(huán)栓菌(Trametescingulata)、紙質(zhì)大紋飾孢菌(Pachykytosporapapyracea)和大白樁菇(Leucopaxillusgiganteus)，PCT/US2007/066618中公開的紅邊隔孢伏革菌(Peniophorarufomarginata)的葡糖淀粉酶；或其混合物。雜合體葡糖淀粉酶可用于本發(fā)明。所述雜合體葡糖淀粉酶的實(shí)例在WO2005/045018中公開。具體實(shí)例包括實(shí)施例1的表1和4中公開的雜合體葡糖淀粉酶(該雜合體通過提述并入本文)。所述葡糖淀粉酶，可與任何上面提及的葡糖淀粉酶顯示高序列同一性程度，即，與上面提及的成熟酶序列顯示至少70%，至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，至少99%或甚至100%的同一性。商業(yè)上可得到的包含葡糖淀粉酶的組合物包括AMG200L；AMG300L；SANTMSUPER，SANTMEXTRAL，SPIRIZYMETMPLUS，SPIRIZYMETMFUEL，SPIRIZYMETMB4U，SPIRIZYMEULTRATM和AMGTME(來自NovozymesA/S，Denmark)；OPTIDEXTM300，GC480TM和GC147TM(來自GenencorInt.，USA)；AMIGASETM和AMIGASETMPLUS(來自DSM)；G-ZYMETMG900，G-ZYMETM和G990ZR(來自GenencorInt.)。所述葡糖淀粉酶可以以0.02-20AGU/gDS，優(yōu)選0.1-10AGU/gDS，特別是在1-5AGU/gDS，如0.1-2AGU/gDS，如0.5AGU/gDS的量，或以0.0001-20AGU/gDS，優(yōu)選0.001-10AGU/gDS，特別是0.01-5AGU/gDS，如0.1-2AGU/gDS的量添加。β-淀粉酶β-淀粉酶(E.C3.2.1.2)為傳統(tǒng)上給予外作用的(exo-acting)產(chǎn)麥芽糖淀粉酶的名稱，其催化直鏈淀粉、支鏈淀粉以及相關(guān)的葡萄糖聚合物中1,4-α-葡糖苷鍵的水解。自非還原的鏈末端以逐步的方式連續(xù)移除麥芽糖單元直至分子降解，或者，在支鏈淀粉的情況下，直至到達(dá)分枝點(diǎn)。釋放的麥芽糖具有β異頭物構(gòu)象，由此得到β-淀粉酶的名稱。已經(jīng)從多種植物和微生物中分離了β-淀粉酶(Fogarty和Kelly,1979,ProgressinIndustrialMicrobiology,15,112-115)。這些β-淀粉酶的特征在于具有40℃到65℃的最適溫度以及4.5到7的最適pH。來自大麥的商業(yè)上可得到的β-淀粉酶為來自NovozymesA/S,Denmark的NOVOZYMTMWBA和來自GenencorInt.,USA的SPEZYMETMBBA1500。產(chǎn)麥芽糖淀粉酶淀粉酶也可為產(chǎn)麥芽糖α-淀粉酶(葡聚糖1,4-α-麥芽糖水解酶，E.C.3.2.1.133)，其催化將直鏈淀粉和支鏈淀粉水解成α構(gòu)象的麥芽糖。來自嗜熱脂肪芽孢桿菌菌株NCIB11837的產(chǎn)麥芽糖淀粉酶商業(yè)上可由NovozymesA/S得到。產(chǎn)麥芽糖的α-淀粉酶描述于美國專利號4,598,048，4,604,355和6,162,628，其通過提述并入本文。所述產(chǎn)麥芽糖淀粉酶可以0.05-5mg總蛋白/克DS或0.05-5MANU/gDS的量添加。肌醇六磷酸酶任何肌醇六磷酸酶可用于本發(fā)明的方法。肌醇六磷酸酶是通過特異性水解肌醇和磷之間的酯鍵而降解肌醇六磷酸鹽和/或肌醇六磷酸的酶。肌醇六磷酸酶活性取決于許多成分中磷和離子的可獲得性。在一些實(shí)施方案中，肌醇六磷酸酶能夠從肌醇六磷酸(例如植酸)釋放至少一個(gè)無機(jī)磷酸。肌醇六磷酸酶可根據(jù)其對于植酸分子上起始水解處的磷酸酯基團(tuán)的具體位置的偏好進(jìn)行分組(例如3-肌醇六磷酸酶(EC3.1.3.8)或6-肌醇六磷酸酶(EC3.1.3.26))。肌醇六磷酸酶的實(shí)例是肌醇-六磷酸-3-磷酸水解酶(myo-inositol-hexakiphosphate-3-phosphohydrolase)。肌醇六磷酸酶可從微生物如真菌或細(xì)菌生物獲得。舉例而言，所述肌醇六磷酸酶可從絲狀真菌如曲霉屬(例如無花果曲霉(A.ficuum)，煙曲霉，黑曲霉和土曲霉(A.terreus))，支胞屬(Cladospirum)，毛霉屬(Mucor)(例如梨形毛霉(Mucorpiriformis))，毀絲霉屬(Myceliophthora)(例如嗜熱毀絲霉(M.thermophila))，青霉屬(例如P.hordei(ATCCNo.22053)，檜狀青霉(P.piceum)(ATCCNo.10519)，或短密青霉(P.brevi-compactum)(ATCCNo.48944))，踝節(jié)菌屬(Talaromyces)(例如嗜熱踝節(jié)菌(T.thermophilus))，嗜熱霉屬(Thermomyces)(WO99/49740)和木霉屬菌種(Trichodermaspp.)(例如里氏木霉(T.reesei))獲得。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述肌醇六磷酸降解酶從酵母(例如Arxulaadeninivorans、異常畢赤酵母(Pichiaanomala)、西方許望酵母(Schwanniomycesoccidentalis))，革蘭氏陰性細(xì)菌(例如大腸桿菌、克雷伯氏菌屬菌種(Klebsiellaspp.)、假單胞菌屬菌種(Pseudomonasspp.))，和革蘭氏陽性細(xì)菌(例如芽孢桿菌屬菌種如枯草芽孢桿菌)獲得。所述肌醇六磷酸酶亦可從檸檬酸桿菌屬(Citrobacter)、腸桿菌屬(Enterbacter)或隔孢伏革菌屬(Peniophora)獲得。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述肌醇六磷酸酶來源于布丘氏菌屬菌種(Buttiauxiellaspp.)如鄉(xiāng)間布丘氏菌(B.agrestis)、B.brennerae、B.ferragutiase、B.gaviniae、B.izardii、B.noackiae和B.warmboldiae。在一些實(shí)施方案中，所述肌醇六磷酸酶是WO2006/043178或美國申請?zhí)?1/714,487中公開的肌醇六磷酸酶。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述肌醇六磷酸酶與美國申請?zhí)朜o.12/263,886的SEQIDNO:31中所示的氨基酸序列具有至少75%，至少80%，至少85%，至少88%，至少90%，至少93%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%和至少99%的序列同一性。商業(yè)上可獲得的肌醇六磷酸酶為NATUPHOS(BASF)，RONOZYMEP(NovozymesA/S)，PHZYME(DaniscoA/S,Diversa)和FINASE(ABEnzymes)。用于確定微生物肌醇六磷酸酶活性的方法和肌醇六磷酸酶單位的定義公開于Engelen等,1994,JournalofAOACInternational77:760-764。所述肌醇六磷酸酶可為野生型肌醇六磷酸酶，其活性變體或活性片段。普魯蘭酶任何普魯蘭酶可用于本發(fā)明的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述普魯蘭酶為GH57普魯蘭酶，例如從熱球菌屬(Thermococcus)，包括熱球菌屬菌種AM4，熱球菌屬菌種HJ21，Thermococcusbarophilus，Thermococcusgammatolerans，Thermococcushydrothermalis；Thermococcuskodakarensis，Thermococcuslitoralis；和Thermococcusonnurineus的菌株；或從火球菌屬(Pyrococcus)，如深海火球菌(Pyrococcusabyssi)和激烈火球菌(Pyrococcusfuriosus)的菌株獲得的普魯蘭酶。蛋白酶蛋白酶可在糖化、發(fā)酵或同時(shí)糖化和發(fā)酵過程中添加。所述蛋白酶可為任何蛋白酶。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述蛋白酶為微生物來源的酸性蛋白酶，優(yōu)選真菌或細(xì)菌來源的。酸性真菌蛋白酶是優(yōu)選的，但也可使用其它蛋白酶。合適的蛋白酶包括微生物蛋白酶，如真菌和細(xì)菌蛋白酶。優(yōu)選的蛋白酶為酸性蛋白酶，即，特征為能夠在pH7以下的酸性條件下水解蛋白質(zhì)的蛋白酶。酸性真菌蛋白酶可來源于曲霉屬、假絲酵母屬、革蓋菌屬(Coriolus)、內(nèi)座殼屬(Endothia)、蟲霉屬(Enthomophtra)、耙齒菌屬(Irpex)、毛霉屬(Mucor)、青霉屬(Penicillium)、根霉屬(Rhizopus)、絲核菌屬(Sclerotium)和球擬酵母屬(Torulopsis)。具體而言，所述蛋白酶可來源于棘孢曲霉(WO95/02044)，泡盛曲霉(Hayashida等,1977Agric.Biol.Chem.,42(5),927-933)，黑曲霉(參見，例如，Koaze等,1964,Agr.Biol.Chem.Japan,28,216)，齋藤曲霉(Aspergillussaitoi)(參見，例如，Yoshida,1954,J.Agr.Chem.Soc.Japan,28,66)或米曲霉，如pepA蛋白酶，以及來自米黑毛霉(Mucormiehei)和微小毛霉(Mucorpusillus)的酸性蛋白酶。所述蛋白酶可為中性或堿性蛋白酶，如來源于芽孢桿菌屬菌株的蛋白酶。具體蛋白酶來源于解淀粉芽孢桿菌，且具有在Swissprot可作為登錄號P06832得到的序列。所述蛋白酶可與在Swissprot作為登錄號P06832公開的氨基酸序列具有至少90%序列同一性，如至少92%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%或特別是至少99%同一性。所述蛋白酶可與WO2003/048353中作為SEQIDNO:1公開的氨基酸序列具有至少90%的同一性，如至少92%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%或特別為至少99%同一性。所述蛋白酶可為選自下組的木瓜蛋白酶樣蛋白酶，如E.C.3.4.22.*(半胱氨酸蛋白酶)內(nèi)的蛋白酶，如EC3.4.22.2(木瓜蛋白酶)、EC3.4.22.6(木瓜凝乳蛋白酶)、EC3.4.22.7(蘿藦蛋白酶(asclepain))、EC3.4.22.14(獼猴桃蛋白酶(actinidain))、EC3.4.22.15(組織蛋白酶L)、EC3.4.22.25(甘氨酰內(nèi)肽酶)和EC3.4.22.30(番木瓜蛋白酶(caricain))。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述蛋白酶來源于曲霉屬，如米曲霉的菌株的蛋白酶制備物。在另一個(gè)實(shí)施例中，所述蛋白酶來源于根毛霉屬，優(yōu)選曼赫根毛霉(Rhizomucormiehei)的菌株。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述蛋白酶為蛋白酶制備物，優(yōu)選來源于曲霉屬(如米曲霉)的菌株的蛋白水解制備物以及來源于根毛霉屬(優(yōu)選曼赫根毛霉)的菌株的蛋白酶的混合物。天冬氨酸蛋白酶描述于，例如，HandbookofProteolyticEnzymes,A.J.Barrett,N.D.Rawlings和J.F.Woessner編,AcademicPress,SanDiego,1998,270章。天冬氨酸蛋白酶的實(shí)例包括，例如，Berka等,1990,Gene96:313；Berka等,1993,Gene125:195-198；以及Gomi等,1993,Biosci.Biotech.Biochem.57:1095-1100中公開的那些，其通過提述并入本文。所述蛋白酶亦可為金屬蛋白酶，其定義為選自下組的蛋白酶：(a)屬于EC3.4.24(金屬內(nèi)肽酶)；優(yōu)選EC3.4.24.39(酸性金屬蛋白酶)的蛋白酶；(b)上述手冊中屬于M組的金屬蛋白酶；(c)尚未分配至宗族(clan)(命名：宗族MX)，或?qū)儆谧谧錗A，MB，MC，MD，ME，MF，MG，MH之一(如上述手冊第989-991頁定義)的金屬蛋白酶；(d)其它家族的金屬蛋白酶(如上述手冊第1448-1452頁定義)；(e)具有HEXXH基序的金屬蛋白酶；(f)具有HEFTH基序的金屬蛋白酶；(g)屬于家族M3，M26，M27，M32，M34，M35，M36，M41，M43，或M47之一(如上述手冊第1448-1452頁定義)的金屬蛋白酶；(h)屬于M28E家族的金屬蛋白酶；和(i)屬于家族M35的金屬蛋白酶(如上述手冊第1492-1495頁定義)。在其它具體實(shí)施方案中，金屬蛋白酶是其中對肽鍵的親核攻擊通過由二價(jià)金屬陽離子活化的水分子介導(dǎo)的水解酶。二價(jià)陽離子的實(shí)例是鋅、鈷或錳離子。所述金屬離子的位置可由氨基酸配體固定。配體的數(shù)量可為五個(gè)、四個(gè)、三個(gè)、兩個(gè)、一個(gè)或零個(gè)。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，該數(shù)量為兩個(gè)或三個(gè)，優(yōu)選三個(gè)。對于本發(fā)明的方法中使用的金屬蛋白酶的來源并無限制。在一個(gè)實(shí)施方案中，該金屬蛋白酶歸類為EC3.4.24，優(yōu)選EC3.4.24.39。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述金屬蛋白酶是酸穩(wěn)定性金屬蛋白酶，例如真菌酸穩(wěn)定性金屬蛋白酶，如來源于嗜熱子囊菌屬的菌株，優(yōu)選桔橙嗜熱子囊菌的菌株，特別是桔橙嗜熱子囊菌CGMCCNo.0670的金屬蛋白酶(歸類為EC3.4.24.39)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述金屬蛋白酶來源于曲霉屬的菌株，優(yōu)選米曲霉的菌株。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述金屬蛋白酶與WO2010/008841的SEQIDNO:1(桔橙嗜熱子囊菌金屬蛋白酶)的氨基酸-178至177，-159至177，或優(yōu)選氨基酸1至177具有至少約80%，至少82%，至少85%，至少90%，至少95%，或至少97%的序列同一性程度，并具有金屬蛋白酶活性。在具體實(shí)施方案中，所述金屬蛋白酶由與上面提及的SEQIDNO:1具有同一性程度的氨基酸序列組成。所述桔橙嗜熱子囊菌金屬蛋白酶是適用于本發(fā)明的方法的金屬蛋白酶的優(yōu)選實(shí)例。另一種金屬蛋白酶來源于米曲霉，并包含WO2003/048353中公開的SEQIDNO:11的序列，或其氨基酸-23-353；-23-374；-23-397；1-353；1-374；1-397；177-353；177-374；或177-397，和WO2003/048353中公開的SEQIDNO:10。另一種適用于本發(fā)明的方法的金屬蛋白酶是包含WO2010/008841的SEQIDNO:5的米曲霉金屬蛋白酶，或下述金屬蛋白酶：其為分離的多肽，與SEQIDNO:5具有至少80%，至少82%，至少85%，至少90%，至少95%，或至少97%的同一性程度，并具有金屬蛋白酶活性。在具體實(shí)施方案中，所述金屬蛋白酶組成為SEQIDNO:5的氨基酸序列。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，金屬蛋白酶具有與桔橙嗜熱子囊菌或米曲霉金屬蛋白酶的氨基酸序列的氨基酸-178至177，-159至177，或+1至177相差四十個(gè)、三十五個(gè)、三十個(gè)、二十五個(gè)、二十個(gè)、或十五個(gè)氨基酸的氨基酸序列。在另一個(gè)實(shí)施方案中，金屬蛋白酶具有與這些金屬蛋白酶的氨基酸序列的氨基酸-178至177，-159至177，或+1至177相差十個(gè)、九個(gè)、八個(gè)、七個(gè)、六個(gè)或五個(gè)氨基酸，例如四個(gè)、三個(gè)、兩個(gè)或一個(gè)氨基酸的氨基酸序列。在具體實(shí)施方案中，所述金屬蛋白酶a)包含如下或b)由如下組成：i)WO2010/008841的SEQIDNO:1的氨基酸-178至177，-159至177，或+1至177的氨基酸序列；ii)WO2010/008841的SEQIDNO:3的氨基酸-23-353，-23-374，-23-397，1-353，1-374，1-397，177-353，177-374，或177-397的氨基酸序列；iii)WO2010/008841的SEQIDNO:5的氨基酸序列；或i)，ii)，和iii)的序列具有蛋白酶活性的等位變體或片段。WO2010/008841的SEQIDNO:1的氨基酸-178至177，-159至177，或+1至177，或WO2010/008841的SEQIDNO:3的氨基酸-23-353，-23-374，-23-397，1-353，1-374，1-397，177-353，177-374，或177-397的片段是從這些氨基酸序列的氨基和/或羧基端缺失一個(gè)或多個(gè)氨基酸的多肽。在一個(gè)實(shí)施方案中，片段含有至少75個(gè)氨基酸殘基，或至少100個(gè)氨基酸殘基，或至少125個(gè)氨基酸殘基，或至少150個(gè)氨基酸殘基，或至少160個(gè)氨基酸殘基，或至少165個(gè)氨基酸殘基，或至少170個(gè)氨基酸殘基，或至少175個(gè)氨基酸殘基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述金屬蛋白酶與另一種蛋白酶如真菌蛋白酶，優(yōu)選酸性真菌蛋白酶組合。商業(yè)上可得到的產(chǎn)品包括ALCALASEESPERASETM，F(xiàn)LAVOURZYMETM，NEUTRASERENNILASENOVOZYMTMFM2.0L，以及iZymeBA(可從NovozymesA/S,Denmark獲得)和GC106TM和來自GenencorInternational,Inc.,USA的SPEZYMETMFAN。所述蛋白酶可以以0.0001-1mg酶蛋白每克DS，優(yōu)選0.001到0.1mg酶蛋白每克DS的量存在?；蛘?，所述蛋白酶可以0.0001到1LAPU/gDS，優(yōu)選0.001到0.1LAPU/gDS和/或0.0001到1mAU-RH/gDS，優(yōu)選0.001到0.1mAU-RH/gDS的量存在。組合物在該方面，本發(fā)明涉及組合物，其包含(a)天冬酰胺酶和/或氨基酸氧化酶，(b)葡糖淀粉酶和(c)α-淀粉酶。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物進(jìn)一步包含一種或多種其它糖酶，如α-淀粉酶。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述α-淀粉酶是酸性α-淀粉酶或真菌α-淀粉酶，優(yōu)選酸性真菌α-淀粉酶。所述組合物可包含一種或多種糖源生成酶，如特別是葡糖淀粉酶，β-淀粉酶，產(chǎn)麥芽糖淀粉酶，普魯蘭酶，α-葡糖苷酶或其組合。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物包含一種或多種天冬酰胺酶和/或氨基酸氧化酶和一種或多種發(fā)酵生物如酵母和/或細(xì)菌。發(fā)酵生物的實(shí)例可見于上文“發(fā)酵生物”部分。用途本發(fā)明亦涉及天冬酰胺酶和/或氨基酸氧化酶在發(fā)酵方法中的用途。在一個(gè)實(shí)施方案中，天冬酰胺酶和/或氨基酸氧化酶用于改善發(fā)酵產(chǎn)物收率。在另一個(gè)實(shí)施方案中，天冬酰胺酶和/或氨基酸氧化酶用于增加發(fā)酵生物的生長。修飾的發(fā)酵生物本發(fā)明亦涉及用編碼天冬酰胺酶和/或氨基酸氧化酶的多核苷酸轉(zhuǎn)化的修飾的發(fā)酵生物，其中所述發(fā)酵生物能夠在發(fā)酵條件下表達(dá)所述天冬酰胺酶和/或氨基酸氧化酶。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述發(fā)酵生物是微生物，如酵母或絲狀真菌，或細(xì)菌。其它發(fā)酵生物的實(shí)例可見于“發(fā)酵生物”部分。發(fā)酵生物可用編天冬酰胺酶和/或氨基酸氧化酶的基因使用本領(lǐng)域公知的技術(shù)進(jìn)行轉(zhuǎn)化。本文中描述并要求保護(hù)的發(fā)明不限于本文中公開的具體實(shí)施方案的范圍，因?yàn)檫@些實(shí)施方案旨在說明本發(fā)明的幾個(gè)方面。意圖將任何等同的實(shí)施方案包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。事實(shí)上，根據(jù)前文的描述，除了本文中說明和記載的修飾之外對本發(fā)明的各種修飾對于本領(lǐng)域技術(shù)人員會是顯而易見的。意欲使這些修飾也落入所附權(quán)利要求的范圍內(nèi)。在沖突的情況下，以包含定義的本公開為準(zhǔn)。此處引用了多篇參考文獻(xiàn)，將它們整體通過提述并入。材料和方法葡糖淀粉酶活性(AGU)葡糖淀粉酶活性可以以葡糖淀粉酶單位(AGU)測量。Novo葡糖淀粉酶單位(AGU)定義為在37℃，pH4.3，底物：23.2mM麥芽糖，緩沖液：乙酸鹽0.1M，反應(yīng)時(shí)間5分鐘的標(biāo)準(zhǔn)條件下每分鐘水解1微摩爾麥芽糖的酶量?？墒褂米詣?dòng)分析儀系統(tǒng)。將變旋酶(mutarotase)添加到葡萄糖脫氫酶試劑中，使得存在的任何α-D-葡萄糖轉(zhuǎn)化為β-D-葡萄糖。葡萄糖脫氫酶特異性地與β-D-葡萄糖在上述反應(yīng)中反應(yīng)，形成NADH，其使用光度計(jì)在340nm處測定作為起始葡萄糖濃度的量度。AMG溫育：底物：23.2mM麥芽糖緩沖液：0.1M乙酸鹽pH：4.30±0.05溫育溫度：37℃±1反應(yīng)時(shí)間：5分鐘酶工作范圍：0.5-4.0AGU/mL顏色反應(yīng)：GlucDH：430U/L變旋酶：9U/LNAD：0.21mM緩沖液：磷酸鹽0.12M；0.15MNaClpH：7.60±0.05溫育溫度37℃±1反應(yīng)時(shí)間：5分鐘波長：340nmα-淀粉酶活性(KNU)α-淀粉酶活性可使用馬鈴薯淀粉作為底物來確定。該方法基于酶對于改性馬鈴薯淀粉的降解，并通過將淀粉/酶溶液的樣本與碘溶液混合來跟蹤反應(yīng)。起初，形成了藍(lán)黑色(blackishblue)，但在淀粉降解過程中，藍(lán)色越來越淡，并逐漸變?yōu)榧t棕色(reddish-brown)，將其和有色玻璃標(biāo)準(zhǔn)(coloredglassstandard)進(jìn)行比較。一個(gè)千Novoα-淀粉酶單位(KNU)定義為在標(biāo)準(zhǔn)條件下(即，在37℃+/-0.05；0.0003MCa2+；以及pH5.6)糊精化5260mg的淀粉干物質(zhì)MerckAmylumSolubile所需的酶量。酸性α-淀粉酶活性(AFAU)酸性α-淀粉酶的活性可以以AFAU(酸性真菌α-淀粉酶單位)或FAU-F測量。酸性α-淀粉酶的活性可以以AFAU(酸性真菌α-淀粉酶單位)測量，其相對于酶標(biāo)準(zhǔn)物來確定。一AFAU定義為在下面提及的標(biāo)準(zhǔn)條件下每小時(shí)降解5.260mg淀粉干物質(zhì)的酶量。酸性α-淀粉酶，其為內(nèi)切α-淀粉酶(1,4-α-D-葡聚糖-葡聚糖水解酶，EC3.2.1.1)水解淀粉分子內(nèi)部區(qū)域中的α-1,4-葡糖苷鍵以形成具有不同鏈長的寡糖和糊精。與碘形成的顏色的強(qiáng)度與淀粉濃度成正比。使用反向比色法(reversecolorimetry)在規(guī)定的分析條件下測定淀粉濃度的降低作為淀粉酶活性。α-淀粉酶淀粉+碘→糊精+寡糖40℃，pH2.5藍(lán)色/紫色T=23秒脫色標(biāo)準(zhǔn)條件/反應(yīng)條件：FAU-F的確定FAU-F真菌α-淀粉酶單位(Fungamyl)是相對于已聲明強(qiáng)度的酶標(biāo)樣測量的。蛋白酶測定方法AU(RH)蛋白分解活性可用變性的血紅蛋白作為底物來確定。在用于確定蛋白分解活性的Anson-Hemoglobin方法中，消化變性的血紅蛋白，然后將未消化的血紅蛋白用三氯乙酸(TCA)沉淀。用酚試劑確定TCA可溶性產(chǎn)物的量，所述酚試劑遇到酪氨酸和色氨酸呈藍(lán)色。一Anson單位(AU-RH)定義為在標(biāo)準(zhǔn)條件下(即，25℃，pH5.5和10分鐘反應(yīng)時(shí)間)以使得每分鐘釋放的TCA可溶產(chǎn)物量與一毫當(dāng)量的酪氨酸遇到酚試劑給出相同的顏色的起始速率消化血紅蛋白。AU(RH)方法描述于EAL-SM-0350，并可應(yīng)要求從NovozymesA/SDenmark獲得。蛋白酶測定方法(LAPU)一亮氨酸氨基肽酶單位(LAPU)是在下述條件下每分鐘分解1微摩爾底物的酶量：26mM的L-亮氨酸對硝基苯胺作為底物，0.1MTris緩沖液(pH8.0)，37℃，10分鐘反應(yīng)時(shí)間。LAPU描述于EB-SM-0298.02/01，其可應(yīng)要求從NovozymesA/SDenmark獲得。產(chǎn)麥芽糖淀粉酶活性(MANU)一MANU(產(chǎn)麥芽糖淀粉酶Novo單位，MaltogenicAmylaseNovoUnit)為在37℃，在每ml的0.1M檸檬酸鹽緩沖液，pH5.0中10mg麥芽三糖(SigmaM8378)底物的濃度反應(yīng)30分鐘，每分鐘釋放一微摩爾麥芽糖所需的酶量。天冬酰胺酶活性儲液50mMTris緩沖液，pH8.6189mML-天冬酰胺溶液1.5M三氯乙酸(TCA)Nessler試劑，AldrichStockNo.34,514-8(Sigma-Aldrich,St.Louis,Mo.USA)天冬酰胺酶，SigmaStockNo.A4887(Sigma-Aldrich,St.Louis,Mo.USA)測定法酶反應(yīng)：將500微升緩沖液100微升L-天冬酰胺酶溶液350微升水混合并平衡至37℃。添加100微升的酶溶液，并將反應(yīng)在37℃溫育30分鐘。將反應(yīng)通過置于冰上并添加50微升的1.5MTCA來終止。將樣品混合并在20,000xg離心2分鐘游離氨的測量將50微升的酶反應(yīng)物與100微升的水和50微升的Nessler試劑相混合。將反應(yīng)物混合并在1分鐘之后測量在436nm的吸光度。實(shí)施例實(shí)施例1：在同時(shí)糖化和發(fā)酵方法/工藝中使用天冬酰胺酶或氨基酸氧化酶將玉米粉(cornflour)與自來水在水浴中混合以獲得30-32%的總固體濃度。將玉米漿料混合良好以避免當(dāng)溫度提升至50℃時(shí)生面團(tuán)球(doughball)的形成。一旦將玉米漿料加熱至50℃，將天冬酰胺酶(500ppmACRYLAWAY/克干固體)或Bothropsatrox氨基酸氧化酶(SigmaA-3016，12微摩爾/分鐘/mg蛋白/g)和α-淀粉酶(0.02%LIQUOZYMESCDS(Novozymes))在液化之前添加至玉米醪。運(yùn)行僅用α-淀粉酶的對照。將玉米醪在50℃在持續(xù)混合下溫育一小時(shí)。將溫度升高至85℃并維持兩小時(shí)以允許最佳的淀粉液化。然后將液化的醪冷卻至室溫。Maillard產(chǎn)物的檢測為了檢測天冬酰胺酶和氨基酸氧化酶減少M(fèi)aillard產(chǎn)物的有效性，在液化終止時(shí)收集樣品。將這些樣品以1942xg離心20分鐘。將上清轉(zhuǎn)移至微離心管并在14560xg進(jìn)一步離心10分鐘。將上清通過0.45微米過濾器過濾，并將200微升的經(jīng)過濾的上清移液入微滴定板的孔。熒光強(qiáng)度通過用360mm波長激發(fā)樣品，并將發(fā)射檢測設(shè)在460nm來測量。熒光強(qiáng)度(FI)測量使用Safire型微滴定板讀板器以軟件XFLUOR4VersionV4.50(TecanCo.)進(jìn)行。將樣品用蒸餾水稀釋以在測量發(fā)射之前獲得在460nm的0.05至0.1的吸收。對于每個(gè)樣品測得的熒光強(qiáng)度提供于表1：結(jié)果顯示天冬酰胺酶或氨基酸氧化酶的使用顯著減少了產(chǎn)生的Maillard產(chǎn)物的量。在玉米發(fā)酵中的樣品制備和乙醇的HLPC定量將經(jīng)冷卻、液化的玉米漿料轉(zhuǎn)移至發(fā)酵容器，并添加合適量的葡糖淀粉酶(SPIRIZYMEFUEL)，尿素(500至1000ppm)和酵母以糖化右旋糖酐并發(fā)酵還原糖。在32℃進(jìn)行同時(shí)糖化和發(fā)酵66小時(shí)至完全。將樣品用寬口移液管從發(fā)酵物移除，并將每個(gè)樣品用10微升的40%硫酸溶液/5克樣品酸化來停止發(fā)酵。將樣品以1942xg離心10分鐘以分離上清和固體。將樣品通過0.45微米過濾器過濾，并使用加熱至65℃、具有0.6ml/分鐘的流速的5mM硫酸的流動(dòng)相的HPX-787H柱(Bio-Rad)通過HPLC來分析十微升的經(jīng)過濾的上清，而折射率檢測在50℃進(jìn)行。在每個(gè)發(fā)酵方法/工藝中獲得的乙醇的量提供于表2：表2結(jié)果顯示與僅用LIQUOZYMESCDS相比，在對用LiquozymeSCDS和ACRYLAWAY或者LIQUOZYMESCDS和氨基酸氧化酶預(yù)液化的玉米的同時(shí)糖化和發(fā)酵方法/工藝中產(chǎn)生了更大量的乙醇。在50ppmACRYLAWAAY(v/v)存在或不存在下，將甘蔗汁在50℃溫育1小時(shí)。Maillard產(chǎn)物的檢測將糖蜜樣品用蒸餾水稀釋至20Brix。將過濾的糖蜜樣品通過0.45微米過濾器過濾，并將200微升的過濾的糖蜜移液入微滴定板的孔。熒光強(qiáng)度通過用360nm波長激發(fā)樣品，并將發(fā)射檢測設(shè)在460nm來測量。熒光強(qiáng)度(FI)測量使用TECANSafire型微滴定板讀板器以軟件XFLUOR4VersionV4.50進(jìn)行。將樣品用蒸餾水稀釋以在測量發(fā)射之前獲得在460nm的0.05至0.1的吸光度。在所有篩選的糖蜜樣品中檢測出高水平的Maillard產(chǎn)物。甘蔗汁發(fā)酵將來自工業(yè)方法/工藝中的不同步驟的甘蔗汁(粗汁液、用于糖產(chǎn)生的澄清的汁液，和用于乙醇產(chǎn)生的澄清的汁液)用50ppmACRYLAWAY在50℃處理1小時(shí)，并隨后在發(fā)酵之前對其進(jìn)行在沸騰水浴中的蒸發(fā)步驟。將五ml的蒸發(fā)的樣品以重復(fù)的形式轉(zhuǎn)移至15ml翻蓋(flip-cap)Nunc離心管以供發(fā)酵，所述試管上鉆有孔以釋放CO2。從糖蜜制備6°Brix溶液以繁殖RedStar酵母：12克酵母每80克6°Brix稀釋的糖蜜。將青霉素以3mg/L添加至溶液，并將溶液在室溫?cái)嚢璐蠹s16個(gè)小時(shí)。在翌日上午(followingmorning)將各含有5ml樣品的發(fā)酵管用2ml的酵母繁殖物給料，并渦旋。發(fā)酵在32℃進(jìn)行8小時(shí)。將樣品用75微升的40%H2SO4酸化以停止發(fā)酵，并對其進(jìn)行HPLC分析。在每個(gè)發(fā)酵方法/工藝中獲得的乙醇的量提供于表3：表3：HPLC分析顯示在每個(gè)用天冬酰胺酶處理的樣品中實(shí)現(xiàn)了增加的乙醇產(chǎn)量。本發(fā)明在下述編號段落中進(jìn)一步描述：[1]一種產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物的方法/工藝，其包括：(a)在氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶的存在下用α-淀粉酶將含淀粉材料液化為糊精；(b)用糖化酶將糊精糖化為糖；和(c)使用發(fā)酵生物發(fā)酵糖以產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物。[2]段[1]的方法/工藝，其中在天冬酰胺酶存在下將所述含淀粉材料液化為糊精。[3]段[2]的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶是EC3.5.1.1的酶。[4]段[2]的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶是EC3.5.1.38的酶。[5]段[1]-[4]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中在精氨酸酶的存在下將所述含淀粉材料液化為糊精。[6]段[1]-[5]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中在氨基酸氧化酶的存在下將所述含淀粉材料液化為糊精。[7]段[6]的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶是EC1.4.3.2的酶。[8]段[6]的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶是EC1.4.3.3的酶。[9]一種產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物的方法/工藝，其包括：(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含淀粉材料；(b)用α-淀粉酶將經(jīng)處理的含淀粉材料液化為糊精；(c)用糖化酶將糊精糖化為糖；和(d)使用發(fā)酵生物發(fā)酵糖以產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物。[10]段[9]的方法/工藝，其中用天冬酰胺酶在20-75℃，例如25-65℃或40-60℃的溫度處理所述含淀粉材料。[11]段[10]的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶是EC3.5.1.1的酶。[12]段[10]的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶是EC3.5.1.38的酶。[13]段[9]-[12]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用精氨酸酶在20-75℃，例如25-65℃或40-60℃的溫度處理所述含淀粉材料。[14]段[9]-[13]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用氨基酸氧化酶在20-75℃，例如25-65℃或40-60℃的溫度處理所述含淀粉材料。[15]段[14]的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶是EC1.4.3.2的酶。[16]段[14]的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶是EC1.4.3.3的酶。[17]段[1]-[16]任一項(xiàng)的方法/工藝，進(jìn)一步包括回收所述發(fā)酵產(chǎn)物。[18]一種產(chǎn)生糖的方法/工藝，其包括：(a)在氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶的存在下用α-淀粉酶將含淀粉材料液化為糊精；和(b)用糖化酶將糊精糖化為糖。[19]段[18]的方法/工藝，其中所述糖為麥芽糖。[20]段[18]的方法/工藝，其中所述糖為葡萄糖。[21]段[20]的方法/工藝，進(jìn)一步包括將葡萄糖轉(zhuǎn)化為果糖。[22]段[18]-[21]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中在天冬酰胺酶的存在下將所述含淀粉材料液化為糊精。[23]段[22]的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶是EC3.5.1.1的酶。[24]段[22]的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶是EC3.5.1.38的酶。[25]段[18]-[24]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中在精氨酸酶的存在下將所述含淀粉材料液化為糊精。[26]段[18]-[25]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中在氨基酸氧化酶的存在下將所述含淀粉材料液化為糊精。[27]段[26]的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶是EC1.4.3.2的酶。[28]段[26]的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶是EC1.4.3.3的酶。[29]一種產(chǎn)生糖的方法/工藝，其包括：(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含淀粉材料；(b)用α-淀粉酶將經(jīng)處理的含淀粉材料液化為糊精；和(c)用糖化酶將糊精糖化為糖。[30]段[29]的方法/工藝，其中所述糖為麥芽糖。[31]段[29]的方法/工藝，其中所述糖為葡萄糖。[32]段[31]的方法/工藝，進(jìn)一步包括將葡萄糖轉(zhuǎn)化為果糖。[33]段[29]-[32]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用天冬酰胺酶在20-75℃，例如25-65℃或40-60℃的溫度處理所述含淀粉材料。[34]段[33]的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶是EC3.5.1.1的酶。[35]段[33]的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶是EC3.5.1.38的酶。[36]段[29]-[35]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用精氨酸酶在20-75℃，例如25-65℃或40-60℃的溫度處理所述含淀粉材料。[37]段[29]-[36]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用氨基酸氧化酶在20-75℃，例如25-65℃或40-60℃的溫度處理所述含淀粉材料。[38]段[37]的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶是EC1.4.3.2的酶。[39]段[37]的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶是EC1.4.3.3的酶。[40]段[18]-[39]任一項(xiàng)的方法/工藝，進(jìn)一步包括回收所述糖。[41]段[21]-[28]和[32]-[40]任一項(xiàng)的方法/工藝，進(jìn)一步包括回收所述果糖。[42]一種產(chǎn)生糊精的方法/工藝，其包括：(a)在氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶的存在下用α-淀粉酶將含淀粉材料液化為糊精。[43]段[42]的方法/工藝，其中在天冬酰胺酶的存在下將所述含淀粉材料液化為糊精。[44]段[43]的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶是EC3.5.1.1的酶。[45]段[43]的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶是EC3.5.1.38的酶。[46]段[42]-[45]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中在精氨酸酶的存在下將所述含淀粉材料液化為糊精。[47]段[42]-[46]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中在氨基酸氧化酶的存在下將所述含淀粉材料液化為糊精。[48]段[47]的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶是EC1.4.3.2的酶。[49]段[47]的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶是EC1.4.3.3的酶。[50]一種產(chǎn)生糊精的方法/工藝，其包括：:(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含淀粉材料；和(b)用α-淀粉酶將經(jīng)處理的含淀粉材料液化為糊精。[51]段[50]的方法/工藝，其中用天冬酰胺酶在20-75℃，例如25-65℃或40-60℃的溫度處理所述含淀粉材料。[52]段[51]的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶是EC3.5.1.1的酶。[53]段[51]的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶是EC3.5.1.38的酶。[54]段[50]-[53]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用精氨酸酶在20-75℃，例如25-65℃或40-60℃的溫度處理所述含淀粉材料。[55]段[50]-[54]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用氨基酸氧化酶在20-75℃，例如25-65℃或40-60℃的溫度處理所述含淀粉材料。[56]段[55]的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶是EC1.4.3.2的酶。[57]段[55]的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶是EC1.4.3.3的酶。[58]段[42]-[57]任一項(xiàng)的方法/工藝，進(jìn)一步包括回收所述糊精。[59]段[1]-[58]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中在65-110℃，例如80-100℃或80-90℃的溫度將含淀粉材料液化為糊精。[60]段[1]-[59]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述液化包括在95-140℃的溫度進(jìn)行噴射蒸煮。[61]段[1]-[41]和[59-60]任一項(xiàng)的方法/工藝，進(jìn)一步包括在20至75℃，優(yōu)選25至65℃的溫度進(jìn)行通常40至90分鐘的預(yù)糖化。[62]段[1]-[41]和[59]-[61]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述糖化在20至75℃，優(yōu)選25至65℃的范圍的溫度進(jìn)行。[63]段[1]-[41]和[59]-[62]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述糖化酶是β-淀粉酶、葡糖淀粉酶或產(chǎn)麥芽糖α-淀粉酶。[64]段[1]-[41]和[59]-[63]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用糖化酶和普魯蘭酶和/或異淀粉酶將所述糊精糖化為糖。[65]段[1]-[41]和[59]-[64]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述糖化和/或發(fā)酵在蛋白酶的存在下進(jìn)行。[66]段[1]-[41]和[59]-[65]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述糖化和發(fā)酵同時(shí)進(jìn)行。[67]段[66]的方法/工藝，其中所述糖化和發(fā)酵在20-40℃的溫度進(jìn)行。[68]段[1]-[67]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述含淀粉材料選自下組：大麥、豆、木薯、谷類、玉米、買羅高粱、豌豆、馬鈴薯、稻、黑麥、西米、高粱、甘薯、樹薯、小麥、和全谷粒，或其任意混合物。[69]一種產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物的方法/工藝，其包括用α-淀粉酶將含淀粉材料轉(zhuǎn)化為糊精；用葡糖淀粉酶將糊精糖化為糖；和在氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶存在下在低于含淀粉材料的起始糊化溫度的溫度在單一步驟中使用發(fā)酵生物發(fā)酵糖。[70]段[1]-[17]和[59]-[69]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述發(fā)酵產(chǎn)物選自下組：醇(例如丁醇、乙醇、甲醇、1,3-丙二醇)；有機(jī)酸(例如乙酸、檸檬酸、衣康酸、葡糖酸、葡糖酸鹽/酯、乳酸、琥珀酸、2,5-二酮-D-葡糖酸)，酮(例如丙酮)，氨基酸(例如谷氨酸)；氣體(例如H2和CO2)，以及更復(fù)雜的化合物，包括，例如抗生素(例如青霉素和四環(huán)素)；酶；維生素(例如核黃素，B12，β-胡蘿卜素)和激素。[71]段[70]的方法/工藝，其中所述發(fā)酵產(chǎn)物是乙醇。[72]段[1]-[17]和[59]-[71]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述發(fā)酵生物是酵母。[73]一種產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物的方法/工藝，其包括：(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含氨基酸和可溶性糖的植物提取物；(b)從所述經(jīng)處理的植物提取物產(chǎn)生糖蜜；(c)稀釋所述糖蜜；和(d)用發(fā)酵生物發(fā)酵所述稀釋的糖蜜以產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物。[74]段[73]的方法/工藝，其中用天冬酰胺酶處理所述植物提取物。[75]段[74]的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶是EC3.5.1.1的酶。[76]段[74]的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶是EC3.5.1.38的酶。[77]段[73]-[76]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用精氨酸酶處理所述植物提取物。[78]段[73]-[77]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用氨基酸氧化酶處理所述植物提取物。[79]段[78]的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶是EC1.4.3.2的酶。[80]段[78]的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶是EC1.4.3.3的酶。[81]段[73]-[80]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述植物提取物是粗甘蔗汁或澄清的甘蔗汁。[82]段[73]-[81]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中糖蜜的產(chǎn)生包括：(x)澄清植物提取物；(y)濃縮見于經(jīng)澄清的植物提取物的糖(例如通過蒸發(fā))以形成糖漿；和(z)從糖漿結(jié)晶蔗糖以形成糖蜜。[83]段[73]-[82]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中步驟(a)發(fā)生在蒸發(fā)之前的任何時(shí)間。[84]段[83]的方法/工藝，其中步驟(a)發(fā)生在汁液提取、粉碎、汁液回收和/或汁液澄清過程中。[85]一種產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物的方法/工藝，其包括：(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含氨基酸和可溶性糖的植物提取物；和(b)用發(fā)酵生物發(fā)酵經(jīng)處理的植物提取物以產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物。[86]段[85]的方法/工藝，其中用天冬酰胺酶處理所述植物提取物。[87]段[86]的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶是EC3.5.1.1的酶。[88]段[86]的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶是EC3.5.1.38的酶。[89]段[85]-[88]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用精氨酸酶處理所述植物提取物。[90]段[85]-[89]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用氨基酸氧化酶處理所述植物提取物。[91]段[90]的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶是EC1.4.3.2的酶。[92]段[90]的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶是EC1.4.3.3的酶。[93]段[85]-[92]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述植物提取物是粗甘蔗汁或澄清的甘蔗汁。[94]段[73]-[93]任一項(xiàng)的方法/工藝，進(jìn)一步包括回收所述發(fā)酵產(chǎn)物。[95]段[73]-[94]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述發(fā)酵產(chǎn)物選自下組：醇(例如丁醇、乙醇、甲醇、1,3-丙二醇)；有機(jī)酸(例如乙酸、檸檬酸、衣康酸、葡糖酸、葡糖酸鹽/酯、乳酸、琥珀酸、2,5-二酮-D-葡糖酸)，酮(例如丙酮)，氨基酸(例如谷氨酸)；氣體(例如H2和CO2)，以及更復(fù)雜的化合物，包括，例如抗生素(例如青霉素和四環(huán)素)；酶；維生素(例如核黃素，B12，β-胡蘿卜素)和激素。[96]段[95]的方法/工藝，其中所述發(fā)酵產(chǎn)物是乙醇。[97]段[73]-[96]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述發(fā)酵生物是酵母。[98]一種產(chǎn)生糖的方法/工藝，其包括：(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含氨基酸和可溶性糖的植物提取物；和(b)從植物提取物回收糖。[99]段[98]的方法/工藝，其中所述糖是果糖、半乳糖、葡萄糖、麥芽糖或蔗糖。[100]一種產(chǎn)生蔗糖的方法/工藝，其包括：(a)用氨基酸氧化酶、精氨酸酶和/或天冬酰胺酶處理含氨基酸和可溶性糖的植物提取物；(b)澄清所述植物提取物；(c)濃縮見于澄清的植物提取物中的糖(例如通過蒸發(fā))以形成含蔗糖的糖漿；(d)從所述糖漿結(jié)晶蔗糖；和(e)回收蔗糖。[101]段[98]-[100]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用天冬酰胺酶處理所述植物提取物。[102]段[101]的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶是EC3.5.1.1的酶。[103]段[101]的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶是EC3.5.1.38的酶。[104]段[98]-[103]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用精氨酸酶處理所述植物提取物。[105]段[98]-[104]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用氨基酸氧化酶處理所述植物提取物。[106]段[105]的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶是EC1.4.3.2的酶。[107]段[105]的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶是EC1.4.3.3的酶。[108]段[98]-[107]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述植物提取物是粗甘蔗汁或澄清的甘蔗汁。[109]段[98]-[108]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中步驟(a)發(fā)生在蒸發(fā)之前的任何時(shí)間。[110]段[109]的方法/工藝，其中步驟(a)發(fā)生在汁液提取、粉碎、汁液回收和/或汁液澄清過程中。[111]段[98]-[110]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用天冬酰胺酶處理粗甘蔗汁。[112]段[98]-[111]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用精氨酸酶處理粗甘蔗汁。[113]段[98]-[112]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用氨基酸氧化酶處理粗甘蔗汁。[114]段[98]-[113]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用天冬酰胺酶處理用于糖產(chǎn)生的澄清的甘蔗汁。[115]段[98]-[114]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用精氨酸酶處理用于糖產(chǎn)生的澄清的甘蔗汁。[116]段[98]-[115]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用氨基酸氧化酶處理用于糖產(chǎn)生的澄清的甘蔗汁。[117]段[98]-[116]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中用天冬酰胺酶處理用于乙醇產(chǎn)生的澄清的甘蔗汁。[118]段任一項(xiàng)的方法/工藝[98]-[117]，其中用精氨酸酶處理用于乙醇產(chǎn)生的澄清的甘蔗汁。[119]段任一項(xiàng)的方法/工藝[98]-[118]，其中用氨基酸氧化酶處理用于乙醇產(chǎn)生的澄清的甘蔗汁。[120]段[73]-[119]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述植物提取物可選自下組：甜高粱、糖甜菜、甘蔗，或其任意混合物。[121]段[73]-[120]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中在7.5-9例如8-9的pH澄清所述粗汁液以供糖和/或乙醇產(chǎn)生。[122]段[1]-[121]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶(a)與SEQIDNO:1具有至少70%序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性；或(b)是SEQIDNO:1具有天冬酰胺酶活性的片段。[123]段[1]-[121]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶(a)與SEQIDNO:2具有至少70%序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性；或(b)是SEQIDNO:2具有天冬酰胺酶活性的片段。[124]段[1]-[121]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶(a)與SEQIDNO:3具有至少70%序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性；或(b)是SEQIDNO:3具有天冬酰胺酶活性的片段。[125]段[1]-[121]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶(a)與SEQIDNO:4具有至少70%序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性；或(b)是SEQIDNO:4具有天冬酰胺酶活性的片段。[126]段[1]-[121]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶(a)與SEQIDNO:5具有至少70%序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性；或(b)是SEQIDNO:5具有天冬酰胺酶活性的片段。[127]段[1]-[121]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶(a)與SEQIDNO:6具有至少70%序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性；或(b)是SEQIDNO:6具有天冬酰胺酶活性的片段。[128]段[1]-[121]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶(a)與SEQIDNO:7具有至少70%序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性；或(b)是SEQIDNO:7具有天冬酰胺酶活性的片段。[129]段[1]-[121]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述天冬酰胺酶是熱穩(wěn)定性天冬酰胺酶。[130]段[1]-[129]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶(a)與SEQIDNO:8具有至少70%序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性；或(b)是SEQIDNO:8具有氨基酸氧化酶的片段。[131]段[1]-[129]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶(a)與SEQIDNO:9具有至少70%序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性；或(b)是SEQIDNO:9具有氨基酸氧化酶的片段。[132]段[1]-[129]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶(a)與SEQIDNO:10具有至少70%序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性；或(b)是SEQIDNO:10具有氨基酸氧化酶的片段。[133]段[1]-[129]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶(a)與SEQIDNO:11具有至少70%序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性；或(b)是SEQIDNO:11具有氨基酸氧化酶的片段。[134]段[1]-[129]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶(a)與SEQIDNO:12具有至少70%序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性；或(b)是SEQIDNO:12具有氨基酸氧化酶的片段。[135]段[1]-[129]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶(a)與SEQIDNO:13具有至少70%序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性；或(b)是SEQIDNO:13具有氨基酸氧化酶的片段。[136]段[1]-[129]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶(a)與SEQIDNO:14具有至少70%序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性；或(b)是SEQIDNO:14具有氨基酸氧化酶的片段。[137]段[1]-[129]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶是熱穩(wěn)定性氨基酸氧化酶。[138]段[1]-[137]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述精氨酸酶(a)與SEQIDNO:15具有至少70%序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性；或(b)是SEQIDNO:15具有氨基酸氧化酶的片段。[139]段[1]-[137]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述精氨酸酶(a)與SEQIDNO:16具有至少70%序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性；或(b)是SEQIDNO:16具有氨基酸氧化酶的片段。[140]段[1]-[137]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述精氨酸酶(a)與SEQIDNO:17具有至少70%序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性；或(b)是SEQIDNO:17具有氨基酸氧化酶的片段。[141]段[1]-[137]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述精氨酸酶(a)與SEQIDNO:18具有至少70%序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性；或(b)是SEQIDNO:18具有氨基酸氧化酶的片段。[142]段[1]-[137]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述精氨酸酶(a)與SEQIDNO:19具有至少70%序列同一性，例如至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%序列同一性；或(b)是SEQIDNO:19具有氨基酸氧化酶的片段。[143]段[1]-[137]任一項(xiàng)的方法/工藝，其中所述氨基酸氧化酶是熱穩(wěn)定性精氨酸酶。[144]一種組合物，其包含(a)天冬酰胺酶，精氨酸酶，和/或氨基酸氧化酶，(b)葡糖淀粉酶和(c)α-淀粉酶。[145]段[144]的組合物，其包含天冬酰胺酶。[146]段[145]的組合物，其包含EC3.5.1.1的天冬酰胺酶。[147]段[145]的組合物，其包含EC3.5.1.38的天冬酰胺酶。[148]段[144]-[147]的組合物，其包含精氨酸酶。[149]段[144]-[148]的組合物，其包含氨基酸氧化酶。[150]段[149]的組合物，其包含EC1.4.3.2的氨基酸氧化酶。[151]段[149]的組合物，其包含EC1.4.3.3的氨基酸氧化酶。[152]段[144]的組合物，其包含天冬酰胺酶，精氨酸酶，和氨基酸氧化酶。[153]段[152]的組合物，其包含EC3.5.1.1的天冬酰胺酶。[154]段[152]的組合物，其包含EC3.5.1.38的天冬酰胺酶。[155]段[152]-[154]任一項(xiàng)的組合物，其包含EC1.4.3.2的氨基酸氧化酶。[156]段[152]-[154]任一項(xiàng)的組合物，其包含EC1.4.3.3的氨基酸氧化酶。[157]段[144]-[156]任一項(xiàng)的組合物，其進(jìn)一步包含普魯蘭酶。當(dāng)前第1頁1 2 3 當(dāng)前第1頁1 2 3