技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種檢測(cè)DNA序列的方法,步驟包括:從單鏈DNA(ssDNA)待測(cè)樣品出發(fā),在DNA序列一個(gè)末端連接DNA接頭(adaptor)序列;其中,所述DNA接頭序列的5’端含有磷酸化基團(tuán)(Pi基團(tuán));使所述DNA接頭序列形成雙鏈結(jié)構(gòu);將ssDNA合成雙鏈DNA;利用NGS平臺(tái)進(jìn)行測(cè)序。發(fā)明人通過廣泛而深入的研究,建立了一套用于ssDNA測(cè)序的技術(shù)方案。首先用給ssDNA連上接頭序列,需要加入特異的引物,與接頭形成互補(bǔ)的雙鏈(或者用給ssDNA連上的接頭序列直接含有雙鏈結(jié)構(gòu));然后在DNA聚合酶的作用下,生成dsDNA,以利用現(xiàn)有的NGS測(cè)序平臺(tái)進(jìn)行測(cè)序分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,采用上述技術(shù)方案成功地進(jìn)行了多組ssDNA序列的測(cè)定。
技術(shù)研發(fā)人員:王金;趙國屏
受保護(hù)的技術(shù)使用者:王金;趙國屏
文檔號(hào)碼:201510198849
技術(shù)研發(fā)日:2015.04.22
技術(shù)公布日:2016.11.23