1.蒿屬植物奇蒿中單體去氫母菊內酯酮的提取方法,按照下述步驟進行:
A、制備總粗提物
將中藥奇蒿粉碎,取奇蒿粉末10-50kg,加入70%的乙醇水溶液100--500L,加熱70℃回流2h提取2次,將提取液減壓濃縮,得總粗提取物;
B、分離純化
將步驟A制得的總粗提取物加水溶解,使其混懸,得提取物混懸液,加入石油醚萃取三次,棄去三次石油醚萃取液,得到經石油醚萃取后的提取物混懸液;再向經石油醚萃取后的提取物混懸液中加入氯仿萃取三次,合并三次萃取液,減壓回收溶劑得氯仿部位浸膏;將氯仿部位浸膏上硅膠色譜柱,用石油醚-二氯甲烷-甲醇-甲酸系統(tǒng)6:2:1:0.160L和4:2:1:0.120L進行梯度洗脫,流速為3滴/秒,接樣體積1L,通過薄層層析法對各流分進行點樣,在石油醚-二氯甲烷-甲醇-甲酸為4:2:1:0.1的展開劑系統(tǒng)中,Rf值為0.5的流分合并,減壓回收溶劑得到流分Fr1;
流分Fr1用反相高效液相制備,制備條件為色譜柱Kromasil C18(250mm×21.2mm i.d.;5μm);流動相比例為乙腈:0.2%甲酸水=28:72,流速20ml/min,柱溫25℃,檢測波長250nm,根據檢測器譜圖上顯示的出峰位置,時間段在28.5min到29.5min內接收流分“Ⅰ”,得到單體去氫母菊內酯酮。
2.根據權利要求1所述的蒿屬植物奇蒿中單體化合物去氫母菊內酯酮的提取方法,其特征在于:
步驟B中得到流分Fr1后,流分Fr1用Sephadex G-20凝膠柱色譜分離,用氯仿-甲醇1:1溶液2L等度洗脫,流速為6秒/滴,接樣體積50mL,得組分Fr1a-Fr1q,各流分經HPLC檢測,合并含有目標峰的樣品流分Fr1h-Fr1n得流分A。
流分A用反相高效液相制備,制備條件為色譜柱Kromasil C18(250mm×21.2mm i.d.;5μm);流動相比例為乙腈:0.2%甲酸水=28:72,流速20ml/min,柱溫25℃,檢測波長250nm,根據檢測器譜圖上顯示的出峰位置,時間段在28.5min到29.5min內接收流分“Ⅰ”,得到單體去氫母菊內酯酮。
3.根據權利要求1所述的蒿屬植物奇蒿中單體化合物去氫母菊內酯酮的提取方法,其特征在于:
步驟A中,將中藥奇蒿粉碎,取奇蒿粉末30kg,加入70%的乙醇水溶液300L,加熱70℃回流提取2h,提取2次,將提取液減壓濃縮,得總粗提取物。
4.根據權利要求3所述的蒿屬植物奇蒿中單體去氫母菊內酯酮的提取方法,其特征在于:步驟B中,將步驟A制得的總粗提取物加10L水溶解。
5.根據權利要求1所述的蒿屬植物奇蒿中單體去氫母菊內酯酮的提取方法,其特征在于:步驟B所述的石油醚萃取中提取物混懸液與每次加入萃取的石油醚體積比為1:2;氯仿萃取中經石油醚萃取后的提取物混懸液與每次加入萃取的氯仿體積為1:2。
6.根據權利要求1所述的蒿屬植物奇蒿中單體去氫母菊內酯酮的提取方法,其特征在于:步驟B中取氯仿部位浸膏1.5kg,加入1.5kg硅膠干法拌樣上柱,裝柱硅膠7kg,以石油醚-二氯甲烷-甲醇-甲酸系統(tǒng)6:2:1:0.1的溶液溶解硅膠裝柱。
7.權利要求1-6中任一所述的蒿屬植物奇蒿中單體去氫母菊內酯酮的提取方法所得的單體去氫母菊內酯酮在制備抑制無乳鏈球菌和金黃色葡萄球菌藥物中的應用。