1.一種從銀杏葉提取物中制備槲皮素-3-O-葡萄糖苷的方法,包括,
(1)將銀杏葉提取物溶于體積濃度為40-80%的乙醇-水溶液中,制備得到銀杏葉提取物的濃度為10-1000mg/mL的提取物溶液;
(2)對所述步驟(1)得到的提取物溶液進(jìn)行一維液相色譜分離,得到一維粗產(chǎn)品;
(3)將步驟(2)得到的一維粗產(chǎn)品溶解在體積濃度為40-80%的甲醇-水溶液或乙醇-水溶液中,得到所述一維粗產(chǎn)品的濃度為20-200mg/mL的粗產(chǎn)品溶液;
(4)對所述步驟(3)得到的粗產(chǎn)品溶液進(jìn)行二維液相色譜制備,得到槲皮素-3-O-葡萄糖苷。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從銀杏葉提取物中制備槲皮素-3-O-葡萄糖苷的方法,其特征在于,
所述步驟(2)中一維液相色譜分離的條件為,色譜柱采用以硅膠為基質(zhì)的親水型色譜填料;流動相中的有機相為乙醇或甲醇,水相為水;洗脫條件以0-15min有機相95%降至90%梯度進(jìn)行或等度進(jìn)行;收集保留時間為15~20min的組分,干燥得到所述一維粗產(chǎn)品。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的從銀杏葉提取物中制備槲皮素-3-O-葡萄糖苷的方法,其特征在于,
所述步驟(2)中一維液相色譜分離,有機相還含有甲酸,甲酸體積濃度為0.1%;水相中還含有甲酸,甲酸體積濃度為0.1%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的從銀杏葉提取物中制備槲皮素-3-O-葡萄糖苷的方法,其特征在于,
所述步驟(4)中二維液相色譜條件為,色譜柱采用以硅膠為基質(zhì)鍵合 C18反相填料;流動相中的有機相為乙醇或甲醇,水相為水;洗脫條件以0-60min有機相15%增至80%梯度進(jìn)行或等度進(jìn)行;收集保留時間為30-40min的組分,干燥得到槲皮素-3-O-葡萄糖苷。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的從銀杏葉提取物中制備槲皮素-3-O-葡萄糖苷的方法,其特征在于,
所述步驟(4)二維液相色譜制備,流動相中還含有甲酸,甲酸體積濃度為0.1%;水相中還含有甲酸,甲酸體積濃度為0.1%。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的從銀杏葉提取物中制備槲皮素-3-O-葡萄糖苷的方法,其特征在于,
所述步驟(4)中二維液相色譜制備,流動相中的有機相為甲醇,水相為水。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一所述的從銀杏葉提取物中制備槲皮素-3-O-葡萄糖苷的方法,其特征在于,
所述步驟(1)中,將銀杏葉提取物溶于體積濃度為50-60%的乙醇-水溶液中,制備得到銀杏葉提取物的濃度為250-550mg/mL的提取物溶液。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一所述的從銀杏葉提取物中制備槲皮素-3-O-葡萄糖苷的方法,其特征在于,
所述步驟(3)中,將步驟(2)得到的一維粗產(chǎn)品溶解在體積濃度為50-60%的甲醇-水溶液或乙醇-水溶液,所述粗產(chǎn)品溶液濃度為60-100mg/mL。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8任一所述的從銀杏葉提取物中制備槲皮素-3-O-葡萄糖苷的方法,其特征在于,
一維液相色譜,流動相流速為60-120mL/min,柱溫為室溫或25-40℃,進(jìn)樣量為200-3000μL/針,檢測器為DAD紫外檢測器;
二維液相色譜,流動相流速為60-120mL/min,柱溫為室溫或25-40℃,進(jìn)樣量為1000-3000μL/針,紫外檢測器檢測波長為360nm。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的從銀杏葉提取物中制備槲皮素-3-O-葡萄糖苷的方法,其特征在于,
二維液相色譜,流動相流速為80-100mL/min,柱溫為室溫或25-40℃,進(jìn)樣量為2000-2500μL/針,紫外檢測器檢測波長為360nm。