本發(fā)明涉及(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉甲酰-Ile-AA，涉及它們的制備方法、涉及它們對(duì)SD大鼠抗血栓活性，因而本發(fā)明涉及它作為抗栓藥物的應(yīng)用。本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
冠心病、腦卒中以及脈管炎等是非常常見(jiàn)的心腦血管疾病。隨著人們生活水平的不斷提高，心腦血管疾病的發(fā)病人數(shù)逐年遞增。心腦血管疾病危險(xiǎn)因素流行，我國(guó)心腦血管疾病的患病率持續(xù)上升。據(jù)資料統(tǒng)計(jì)，每5個(gè)成年人中就有1個(gè)心血管病患者。血栓形成是心腦血管疾病的重要病因。預(yù)防血栓形成仍然依賴藥物治療。臨床常用的血栓類藥物有阿司匹林、氯吡格雷和華法林等。它們都存在一些副作用，如出血和胃腸道刺激等。因此，尋找療效好、副作用小的抗血栓藥物是很有意義的。
近年來(lái)，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)含有(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-羧酸的化合物是抗血栓活性的優(yōu)秀結(jié)構(gòu)。發(fā)明人曾經(jīng)公開(kāi)下式的(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ala-Gly-Asp-AA(式中AA為氨基酸殘基)在1nmol/kg的劑量下的抗血栓活性與167μmol/kg阿司匹林相當(dāng)。不過(guò)，發(fā)明人對(duì)希望進(jìn)一步降低有效劑量和簡(jiǎn)化肽基。
經(jīng)過(guò)5年實(shí)驗(yàn)探索，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)用Ile-AA二肽基代替上式的四肽基不僅簡(jiǎn)化了結(jié)構(gòu)，還可以降低口服劑量。按照這些發(fā)現(xiàn)，發(fā)明人提出了本發(fā)明。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的第一個(gè)內(nèi)容是提供(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉甲酰-Ile-AA。
本發(fā)明的第二個(gè)內(nèi)容是提供(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉甲酰-異亮氨酰-氨基酸的合成方法，該方法包括：
(1)L-色氨酸在稀鹽酸催化下與丙酮進(jìn)行Pictet-Spengler縮合生成(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-羧酸；
(2)Boc-Ile與氨基酸芐酯偶聯(lián)得到Boc-Ile-AA-OBzl；
(3)Boc-Ile-AA-OBzl在4N氯化氫的乙酸乙酯溶液中得到1e-AA-OBzl；
(4)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-羧酸與Ile-AA-OBzl殘基偶聯(lián)得到1，1-二甲基-四氫-β-咔啉甲酰-Ile-AA-OBzl。
(4)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉甲酰-Ile-AA-OBzl在充滿氫氣的鈀碳環(huán)境中得到(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉甲酰-Ile-AA。
本發(fā)明的第三個(gè)內(nèi)容是評(píng)價(jià)1，1-二甲基-四氫-β-咔啉甲酰-Ile-AA對(duì)SD大鼠的抗血栓作用。
附圖說(shuō)明
圖1.1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-AA的合成路線.i)CH3COCH3，H2O，HCl；ii)二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)，1-羥基苯并三唑(HOBt)，N-甲基嗎啉(NMM)，四氫呋喃(THF)；iii)4N氯化氫的乙酸乙酯溶液；iv)二環(huán)己基碳二業(yè)胺(DCC)，1-羥基苯并三唑(HOBt)，N-甲基嗎啉(NMM)，四氫呋喃(THF)；v)鈀碳(Pd/C)，氫氣(H2)，甲醇(CH3OH)；2a中AA＝Ala殘基，2b中AA＝Asp(OBzl)殘基，2c中AA＝Phe殘基，2d中AA＝Ile殘基，2e中AA＝Leu殘基，2f中AA＝Met殘基，2g中AA＝Ser殘基，2h中AA＝Thr殘基，2i中AA＝Val殘基，2j中AA＝Trp殘基，2k中AA＝The殘基；3a中AA＝Ala殘基，3b中AA＝Asp殘基，3c中AA＝Phe殘基，3d中AA＝Ile殘基，3e中AA＝Leu殘基，3f中AA＝Met殘基，3g中AA＝Ser殘基，3h中AA＝Thr殘基，3i中AA＝Val殘基，3j中AA＝Trp殘基，3k中AA＝The殘基。
具體實(shí)施方式
為了進(jìn)一步闡述本發(fā)明，下面給出一系列實(shí)施例。這些實(shí)施例完全是例證性的，它們僅用來(lái)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行具體描述，不應(yīng)當(dāng)理解為對(duì)本發(fā)明的限制。
實(shí)施例1制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-羧酸(1)
稱取4.08g(20mmol)L-Trp于250mL茄瓶中，將80mL丙酮緩慢加入。冰浴攪拌條件下，向懸濁反應(yīng)液中加入4mL濃鹽酸，之后加入2mL蒸餾水，攪拌0.5h后，撤去冰浴室溫反應(yīng)24h。24h后薄層層析色譜監(jiān)測(cè)原料點(diǎn)消失。水泵抽去反應(yīng)液中的氯化氫氣體并且濃縮反應(yīng)液，加入100mL乙醚后，靜置，得到5.22g(93％)標(biāo)題 化合物，為無(wú)色晶體。ESI-MS(m/e)245.1212[M+H]+。
實(shí)施例2制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Ala-OBzl(2a)
冰浴及攪拌下往281mg(1mmol)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-羧酸與20mL無(wú)水四氫呋喃的溶液中加入135mg(1mmol)N-羥基苯駢三氮唑，207mg(1mmol)二環(huán)己基羰二亞胺和281mg(1mmol)Ile-Ala-OBzl，用N-甲基嗎啉調(diào)節(jié)反應(yīng)液pH 9。冰浴反應(yīng)0.5h，然后室溫反應(yīng)至TLC(石油醚∶丙酮，2∶1)監(jiān)測(cè)反應(yīng)完成。過(guò)濾除去生成的二環(huán)己基脲，濾液減壓濃縮，所得的殘留物用30mL乙酸乙酯溶解，乙酸乙酯溶液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液洗3次，飽和氯化鈉水溶液洗3次，5％硫酸氫鉀水溶液洗3次，飽和氯化鈉水溶液洗3次，碳酸氫鈉水溶液洗3次，飽和氯化鈉水溶液洗3次，并用無(wú)水硫酸鈉干燥12h。過(guò)濾，濾液減濃縮，殘留物經(jīng)過(guò)柱層析分離純化(石油醚∶丙酮，梯度洗脫)，得到139mg(27％)標(biāo)題化合物，為淡黃色固體。Mp201-202℃；ESI-MS(m/e)519[M+H]+；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：δ/ppm＝7.90(s，1H)，7.66(d，J＝9.0Hz，1H)，7.51(d，J＝9.0Hz，1H)，7.35(m，6H)，7.15(m，2H)，6.63(d，J＝6.0Hz，1H)，5.20(dd，J＝12.0，21.0Hz，2H)，4.66(t，J＝9.0Hz，1H)，4.39(t，J＝9.0Hz，1H)，3.77(dd，J＝6.0，12.0Hz，1H)，3.31(dd，J＝6.0，18.0Hz，1H)，2.68(dd，J＝12.0，15.0Hz，1H)，1.97(m，1H)，1.60(m，2H)，1.54(s，3H)，1.47(s，3H)，1.46(s，3H)，1.24(m，1H)，0.96(m，6H)。
實(shí)施例3制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Asp(OBzl)-OBzl(2b)
按照實(shí)施例2的方法從1.12g(4mmol)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-羧酸與1.70g(4mmol)Ile-Asp(OBzl)-OBzl得到681mg(26％)標(biāo)題化合物，為淡黃色固體。Mp：91-92℃；ESI-MS(m/e)653[M+H]+；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：δ/ppm＝7.80(s，1H)，7.62(d，J＝9.0Hz，1H)，7.51(d，J＝6.0Hz，1H)，7.35(m，10H)，7.15(m，2H)，6.90(d，J＝9.0Hz，1H)，5.13(dd，J＝3.0，18.0Hz，4H)，4.99(m，1H)，4.39(dd，J＝6.0，9.0Hz，1H)，3.76(dd，J＝6.0，12.0Hz，2H)，3.31(dd，J＝6.0，15.0Hz，1H)，3.02(m，2H)，2.68(dd，J＝12.0，15.0Hz，1H)，1.95(m，1H)，1.61(m，2H)，1.54(s，3H)，1.47(s，3H)，1.20(m，2H)，0.95(m，6H)。
實(shí)施例4制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Phe-OBzl(2c)
按照實(shí)施例2的方法從1.70g(6mmol)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-羧酸與2.21g(6mmol)Ile-Phe-OBzl得到854mg(24％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp：144-145℃；ESI-MS(m/e)594[M+H]+；1H-NMR(300 MHz，CDCl3)：δ/ppm＝7.81(s，1H)，7.53(d，J＝9.0Hz，1H)，7.23(m，13H)，6.40(d，J＝6.0Hz，1H)，5.17(dd，J＝12.0，21.0Hz，2H)，4.95(dd，J＝6.0，12.0Hz，1H)，4.30(t，J＝9.0Hz，1H)，3.71(dd，J＝3.0，9.0Hz，1H)，3.32(dd，J＝6.0，15.0Hz，1H)，3.15(m，2H)，2.66(dd，J＝9.0，15.0Hz，1H)，1.96(m，1H)，1.54(s，3H)，1.48(s，3H)，1.48(m，2H)，1.14(m，1H)，0.90(m，6H)。
實(shí)施例5制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Ile-OBzl(2d)
按照實(shí)施例2的方法從1.69g(6mmol)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-羧酸與2.00g(6mmol)Ile-Ile-OBzl得到838mg(25％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp：178-179℃；ESI-MS(m/e)561[M+H]+；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：δ/ppm＝7.88(s，1H)，7.62(d，J＝9.0Hz，1H)，7.51(d，J＝6.0Hz，1H)，7.34(m，6H)，7.15(m，2H)，6.49(d，J＝9.0Hz，1H)，5.20(dd，J＝12.0，27.0Hz，2H)，4.65(dd，J＝6.0，9.0Hz，1H)，4.36(t，J＝9.0Hz，1H)，3.76(dd，J＝3.0，12.0Hz，1H)，3.33(dd，J＝3.0，15.0Hz，1H)，2.68(dd，J＝12.0，15.0Hz，1H)，1.99(m，2H)，1.63(m，1H)，1.54(s，3H)，1.47(s，3H)，1.39(m，1H)，1.20(m，2H)，0.94(m，12H)。
實(shí)施例6制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Leu-OBzl(2e)
按照實(shí)施例2的方法從1.71g(6mmol)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-羧酸與2.01g(6mmol)Ile-Leu-OBzl得到775mg(23％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp：186-187℃；ESI-MS(m/e)561[M+H]+；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：δ/ppm＝7.85(s，1H)，7.61(d，J＝9.0Hz，1H)，7.51(d，J＝6.0Hz，1H)，7.37(m，6H)，7.16(m，2H)，6.49(d，J＝6.0Hz，1H)，5.19(dd，J＝12.0，27.0Hz，2H)，4.67(m，1H)，4.34(t，J＝9.0Hz，1H)，3.75(d，J＝9.0Hz，1H)，3.33(dd，J＝9.0，15.0Hz，1H)，2.67(t，J＝15.0Hz，1H)，1.99(m，1H)，1.67(m，5H)，1.55(s，3H)，1.47(s，3H)，1.21(m，1H)，0.94(m，12H)。
實(shí)施例7制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Met-OBzl(2f)
按照實(shí)施例2的方法從1.15g(4mmol)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-羧酸與1.41g(4mmol)Ile-Met-OBzl得到582mg(25％)標(biāo)題化合物，為淡黃色固體。Mp：95-96℃；ESI-MS(m/e)579[M+H]+；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：δ/ppm＝7.86(s，1H)，7.63(s，1H)，7.51(d，J＝6.0Hz，1H)，7.34(m，6H)，7.16(m，2H)，6.88(s，1H)，5.22(dd，J＝3.0，15.0Hz，2H)，4.77(m，1H)，4.36(t，J＝9.0Hz，1H)，3.32(dd，J＝6.0，15.0Hz，1H)，2.72(s，1H)，2.50(m，2H)，2.19(m，1H)，2.09(s，3H)，2.00(m，2H)，1.81(m，1H)，1.56(s，3H)，1.49(s，3H)， 1.23(m，1H)，0.93(m，6H)。
實(shí)施例8制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Ser-OBzl(2g)
按照實(shí)施例2的方法從1.12g(4mmol)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-羧酸與1.32g(4mmol)Ile-Ser-OBzl得到470mg(22％)標(biāo)題化合物，為淡黃色固體。Mp：134-135℃；ESI-MS(m/e)535[M+H]+；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：δ/ppm＝7.79(s，1H)，7.68(d，J＝6.0Hz，1H)，7.49(d，J＝6.0Hz，1H)，7.33(m，6H)，7.12(m，2H)，5.23(s，2H)，4.75(dd，J＝3.0，6.0Hz，1H)，4.35(t，J＝9.0Hz，1H)，4.01(m，2H)，3.78(d，J＝6.0Hz，1H)，3.27(dd，J＝6.0，18.0Hz，1H)，2.69(t，J＝6.0Hz，1H)，1.98(m，1H)，1.89(m，1H)，1.61(m，1H)，1.54(s，3H)，1.46(s，3H)，1.26(m，1H)，1.22(s，3H)，0.88(m，6H)。
實(shí)施例9制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Thr-OBzl(2h)
按照實(shí)施例2的方法從1.12g(4mmol)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-羧酸與1.36g(4mmol)Ile-Thr-OBzl得到542mg(25％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp：95-97℃；ESI-MS(m/e)549[M+H]+；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：δ/ppm＝7.85(s，2H)，7.48(d，J＝9.0Hz，1H)，7.34(m，6H)，7.15(m，3H)，5.13(dd，J＝15.0，18.0Hz，2H)，5.08(s，1H)，4.68(dd，J＝3.0，9.0Hz，1H)，4.43(m，2H)，3.85(dd，J＝6.0，12.0Hz，1H)，3.27(dd，J＝6.0，15.0Hz，1H)，2.76(dd，J＝12.0，18.0Hz，1H)，1.98(m，1H)，1.64(m，1H)，1.57(s，3H)，1.50(s，3H)，1.25(m，4H)，0.99(m，6H)。
實(shí)施例10制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Val-OBzl(2i)
按照實(shí)施例2的方法從281mg(1mmol)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-羧酸與344mg(1mmol)Ile-Val-OBzl得到157mg(29％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp：191-192℃；ESI-MS(m/e)547[M+H]+；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：δ/ppm＝7.88(s，1H)，7.63(d，J＝12.0Hz，1H)，7.51(d，J＝6.0Hz，1H)，7.37(m，6H)，7.33(d，J＝6.0Hz，1H)，7.15(m，2H)，6.52(d，J＝9.0Hz，1H)，5.19(dd，J＝12.0，27.0Hz，2H)，4.61(dd，J＝3.0，9.0Hz，1H)，4.38(t，J＝9.0Hz，1H)，3.76(dd，J＝3.0，12.0Hz，1H)，3.33(dd，J＝6.0，18.0Hz，1H)，2.68(dd，J＝9.0，15.0Hz，1H)，2.24(m，1H)，2.02(m，1H)，1.61(m，1H)，1.54(s，3H)，1.46(s，3H)，1.26(m，1H)，0.97(m，12H)。
實(shí)施例11制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Trp-OBzl(2j)
按照實(shí)施例2的方法從140mg(0.5mmol)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-羧酸與215mg(0.5mmol)Ile-Trp-OBzl得到62mg(20％)標(biāo)題化合物，為淡粉色固體。Mp： 101-103℃；ESI-MS(m/e)547[M+H]+；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：δ/ppm＝8.23(s，1H)，7.88(s，1H)，7.53(d，J＝9.0Hz，1H)，7.49(d，J＝6.0Hz，1H)，7.34(m，5H)，7.20(m，6H)，6.94(s，1H)，6.38(d，J＝6.0Hz，1H)，5.08(d，J＝6.0Hz，2H)，4.96(dd，J＝6.0，9.0Hz，1H)，4.34(m，1H)，3.31(m，2H)，3.24(dd，J＝6.0，18.0Hz，1H)，2.63(t，J＝15.0Hz，1H)，1.91(m，1H)，1.76(m，1H)，1.53(s，3H)，1.44(s，3H)，1.09(m，1H)，0.89(m，6H)。
實(shí)施例12制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-The-OBzl(2k)
按照實(shí)施例2的方法從71mg(0.25mmol)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-羧酸與100mg(0.25mmol)Ile-The-OBzl得到32mg(21％)標(biāo)題化合物，為淡黃色固體。Mp：111-113℃；ESI-MS(m/e)547[M+H]+；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ/ppm＝10.79(s，1H)，8.57(d，J＝6.0Hz，1H)，7.86(d，J＝9.0Hz，1H)，7.81(d，J＝6.0Hz，1H)，7.37(m，6H)，7.27(d，J＝6.0Hz，1H)，7.01(t，J＝9.0Hz，1H)，6.93(t，J＝9.0Hz，1H)，5.12(t，J＝12.0Hz，1H)，4.31(m，2H)，3.65(dd，J＝3.0，12.0Hz，1H)，3.05(m，1H)，2.90(dd，J＝3.0，15.0Hz，1H)，2.16(m，2H)，2.02(m，1H)，1.72(m，1H)，1.47(s，3H)，1.36(s，3H)，1.14(m，1H)，0.98(t，J＝6.0Hz，3H)，0.85(m，6H)。
實(shí)施例21制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Ala(3a)
稱取52mg(0.1mmol)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Ala-OBzl置于25mL茄瓶?jī)?nèi)，加入4mL甲醇溶解后，加入6mg(10％)鈀碳粉末，抽除茄瓶中的空氣并且向反應(yīng)體系中通入氫氣，通過(guò)反復(fù)置換茄瓶中的空氣，保持向反應(yīng)體系中持續(xù)提供氫氣并使反應(yīng)體系密閉，室溫反應(yīng)并用TLC(二氯甲烷∶甲醇＝10∶1)監(jiān)測(cè)原料基本反應(yīng)完全后。過(guò)濾除去鈀碳粉末，減壓濃縮濾液，殘留物用乙醚反復(fù)磨洗得到41mg(96％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp：185-186℃；ESI-MS(m/e)429[M+H]+；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ/ppm＝10.806(s，1H)，8.35(d，J＝6.0Hz，1H)，7.87(d，J＝9.0Hz，1H)，7.38(d，J＝9.0Hz，1H)，7.28(d，J＝9.0Hz，1H)，7.03(t，J＝6.0Hz，1H)，6.94(t，J＝6.0Hz，1H)，4.34(dd，J＝3.0，9.0Hz，1H)，4.27(m，1H)，3.68(dd，J＝6.0，15.0Hz，1H)，2.95(dd，J＝6.0，15.0Hz，1H)，1.74(m，1H)，1.55(m，1H)，1.49(s，3H)，1.38(s，3H)，1.29(s，3H)，1.17(m，1H)，0.98(d，J＝6.0Hz，3H)0.98(t，J＝6.0Hz，3H)。
實(shí)施例22制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Asp(3b)
按照實(shí)施例21的方法從65mg(0.1mmol)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Asp(OBzl)-OBzl得到52mg(95％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp：195-196℃；ESI-MS(m/e)473[M+H]+；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ/ppm＝11.02(s，1H)，8.13(d，J＝9.0Hz，1H)，8.03(d，J＝9.0Hz，1H)，7.46(d，J＝6.0Hz，1H)，7.32(d，J＝6.0Hz，1H)，7.04(t，J＝9.0Hz，1H)，6.99(t，J＝9.0Hz，1H)，4.33(m，2H)，4.17(m，1H)，3.38(dd，J＝6.0，15.0Hz，1H)，3.22(d，J＝12.0Hz，1H)，2.68(m，2H)，1.86(m，1H)，1.65(s，3H)，1.52(s，3H)，1.10(m，1H)，0.87(m，6H)。
實(shí)施例23制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Phe(3c)
按照實(shí)施例21的方法從60mg(0.1mmol)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Phe-OBzl得到50mg(98％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp：207-209℃；ESI-MS(m/e)505[M+H]+；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ/ppm＝10.84(s，1H)，8.31(d，J＝9.0Hz，1H)，7.82(d，J＝9.0Hz，1H)，7.38(d，J＝9.0Hz，1H)，7.28(d，J＝9.0Hz，1H)，7.24(m，5H)，7.03(t，J＝6.0Hz，1H)，6.95(t，J＝6.0Hz，1H)，4.44(dd，J＝9.0，15.0Hz，1H)，4.34(t，J＝9.0Hz，1H)，3.72(dd，J＝3.0，12.0Hz，1H)，3.11(dd，J＝6.0，15.0Hz，1H)，2.91(dd，J＝3.0，12.0Hz，2H)，1.74(m，1H)，1.50(s，3H)，1.39(s，3H)，1.04(m，1H)，0.84(m，6H)。
實(shí)施例24制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Ile(3d)
按照實(shí)施例21的方法從56mg(0.1mmol)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Ile-OBzl得到45mg(96％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp：183-184℃；ESI-MS(m/e)471[M+H]+；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ/ppm＝11.54(s，1H)，8.13(d，J＝9.0Hz，1H)，7.42(d，J＝9.0Hz，1H)，7.35(d，J＝9.0Hz，1H)，7.12(t，J＝9.0Hz，1H)，7.02(t，J＝9.0Hz，1H)，4.54(s，1H)，4.40(t，J＝9.0Hz，1H)，4.21(dd，J＝6.0，9.0Hz，1H)，2.85(dd，J＝15.0，18.0Hz，1H)，2.68(dd，J＝12.0，15.0Hz，1H)，1.85(m，2H)，1.82(s，3H)，1.67(s，3H)，1.51(m，2H)，1.22(m，2H)，0.89(m，12H)。
實(shí)施例25制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Leu(3e)
按照實(shí)施例2的方法從56mg(0.1mmol)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Leu-OBzl得到44mg(95％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp：174-175℃；ESI-MS(m/e)471[M+H]+；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ/ppm＝10.79(s，1H)，8.24(d，J＝9.0Hz，1H)，7.86(d，J＝9.0Hz，1H)，7.35(d，J＝9.0Hz，1H)，7.02(t，J＝9.0Hz，1H)，6.97(t，J＝9.0Hz，1H)，4.35(t，J＝6.0Hz，1H)，4.21(dd，J＝6.0，9.0Hz，1H)，3.68(dd，J＝15.0，18.0Hz，1H)，2.89(dd，J＝12.0，15.0Hz，1H)，1.78(m，2H)，1.48(s，3H)，1.37(s，3H)，1.12(m，2H)，0.88(m， 12H)。
實(shí)施例26制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Met(3f)
稱取58mg(0.1mmol)1，1-二甲基-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Met-OBzl置于25mL茄瓶?jī)?nèi)，加入8mL甲醇溶解后冰浴下用1摩爾當(dāng)量的氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)pH值至12，全程冰浴條件下反應(yīng)并用TLC監(jiān)測(cè)原料基本反應(yīng)完全后。用飽和硫酸氫鉀的水溶液調(diào)節(jié)pH值為7，減壓濃縮反應(yīng)液后，用飽和硫酸氫鉀的水溶液調(diào)節(jié)pH為2，乙酸乙酯萃洗水溶液3次，合并乙酸乙酯相，飽和氯化鈉水溶液萃洗乙酸乙酯相，收集并干燥有機(jī)相2h，過(guò)濾后減壓濃縮濾液，乙醚反復(fù)磨洗得到無(wú)色固體。產(chǎn)量47mg，產(chǎn)率97％。Mp：152-153℃；ESI-MS(m/e)489[M+H]+；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ/ppm＝10.87(s，1H)，8.32(d，J＝9.0Hz，1H)，8.01(d，J＝9.0Hz，1H)，7.34(m，6H)，7.16(m，2H)，6.88(s，1H)，5.22(dd，J＝3.0，15.0Hz，2H)，4.77(m，1H)，4.36(t，J＝9.0Hz，1H)，3.32(dd，J＝6.0，15.0Hz，1H)，2.72(s，1H)，2.50(m，2H)，2.19(m，1H)，2.05(s，3H)，2.00(m，2H)，1.84(m，1H)，1.56(s，3H)，1.42(s，3H)，1.12(m，1H)，0.87(m，6H)。
實(shí)施例27制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Ser(3g)
按照實(shí)施例2的方法從53mg(0.1mmol)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Ser-OBzl得到44mg(99％)標(biāo)題化合物，為淡黃色固體。Mp：173-174℃；ESI-MS(m/e)445[M+H]+；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ/ppm＝10.96(s，1H)，8.24(d，J＝9.0Hz，1H)，8.09(d，J＝9.0Hz，1H)，7.41(d，J＝9.0Hz，1H)，7.30(d，J＝9.0，Hz，1H)，7.09(t，J＝9.0Hz，1H)，6.96(t，J＝9.0Hz，1H)，4.46(t，J＝12.0Hz，1H)，4.34(m，2H)，3.95(d，J＝9.0Hz，1H)，3.70(m，2H)，3.08(dd，J＝3.0，15.0Hz，1H)，2.63(dd，J＝12.0，15.0Hz，1H)，1.80(m，1H)，1.57(s，3H)，1.52(m，1H)，1.46(s，3H)，1.19(m，1H)，1.06(m，3H)，0.87(m，6H)。
實(shí)施例28制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Thr(3h)
按照實(shí)施例2的方法從55mg(0.1mmol)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Thr-OBzl得到45mg(97％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp：174-175℃；ESI-MS(m/e)459[M+H]+；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ/ppm＝10.84(s，1H)，8.02(d，J＝9.0Hz，1H)，7.86(d，J＝9.0Hz，1H)，7.37(d，J＝9.0Hz，1H)，7.28(d，J＝9.0，Hz，1H)，7.03(t，J＝9，0Hz，1H)，6.95(t，J＝9.0Hz，1H)，4.43(t，J＝9.0Hz，1H)，4.23(m，2H)，3.78(dd，J＝3.0，12.0Hz，1H)，2.98(dd，J＝3.0，15.0Hz，1H)，2.55(m，1H)，1.82(m，1H)，1.40(s，3H)，1.37(s，3H)， 1.17(m，1H)，1.06(m，3H)，0.87(m，6H)。
實(shí)施例29制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Val(3i)
按照實(shí)施例2的方法從55mg(0.1mmol)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Val-OBzl得到45mg(98％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp：173-174℃；ESI-MS(m/e)457[M+H]+；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ/ppm＝10.80(s，1H)，8.05(d，J＝9.0Hz，1H)，7.90(d，J＝9.0Hz，1H)，7.36(d，J＝9.0Hz，1H)，7.28(d，J＝9.0Hz，1H)，7.03(t，J＝9.0Hz，1H)，6.93(t，J＝9.0Hz，1H)，4.44(t，1H)，4.11(dd，J＝3.0，6.0Hz，1H)，3.69(dd，J＝3.0，9.0Hz，1H)，2.94(dd，J＝6.0，15.0Hz，1H)，2.08(m，1H)，1.78(m，1H)，1.48(s，3H)，1.37(s，3H)，1.11(m，1H)，0.87(m，12H)。
實(shí)施例30制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Trp(3j)
按照實(shí)施例2的方法從32mg(0.1mmol)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-Trp-OBzl得到25mg(93％)標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。Mp：184-186℃；ESI-MS(m/e)542[M+H]+；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ/ppm＝10.83(s，1H)，10.74(s，1H)，8.08(d，J＝9.0Hz，1H)，7.96(d，J＝9.0Hz，1H)，7.37(m，2H)，7.24(m，4H)，6.89(s，1H)，4.52(dd，J＝6.0，9.0Hz，1H)，4.31(m，1H)，3.69(m，1H)，3.31(m，2H)，3.24(dd，J＝6.0，18.0Hz，1H)，2.63(t，J＝15.0Hz，1H)，1.87(m，1H)，1.75(m，1H)，1.53(s，3H)，1.42(s，3H)，1.11(m，1H)，0.88(m，6H)。
實(shí)施例31制備(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-The(3k)
按照實(shí)施例2的方法從30mg(0.1mmol)(3s)-1，1-二甲基-四氫-β-咔啉-3-甲酰-Ile-The-OBzl得到25mg(97％)標(biāo)題化合物，為淡黃色固體。Mp：184-186℃；ESI-MS(m/e)514[M+H]+；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ/ppm＝10.91(s，1H)，8.22(d，J＝6.0Hz，1H)，7.93(d，J＝9.0Hz，1H)，7.35(d，J＝6.0Hz，1H)，7.28(d，J＝6.0Hz，1H)，7.02(t，J＝9.0Hz，1H)，6.96(t，J＝9.0Hz，1H)，4.32(t，J＝6.0Hz，1H)，4.09(dd，J＝6.0，9.0Hz，1H)，3.67(dd，J＝3.0，12.0Hz，1H)，3.02(m，1H)，2.72(dd，J＝3.0，12.0Hz，1H)，2.14(m，2H)，2.00(m，1H)，1.72(m，1H)，1.43(s，3H)，1.38(s，3H)，1.15(m，1H)，0.94(t，J＝6.0Hz，3H)，0.85(m，6H)。
實(shí)驗(yàn)例1評(píng)價(jià)化合物3a-k的抗血栓活性
1)聚乙烯管的組裝：將聚乙烯管拉成一端為斜口的細(xì)管，定長(zhǎng)為10.0cm，分別為右經(jīng)靜脈(管徑較粗)及左頸動(dòng)脈(管徑較細(xì))插管；中段聚乙烯管定長(zhǎng)為8.0cm，血栓 線壓在頸動(dòng)脈插管方向，插管前需在管中充滿肝素。
2)SD大鼠以0.1nmol/kg劑量3a-k灌胃，30分鐘后腹腔注射20％的烏拉坦進(jìn)行麻醉。仰臥位將大鼠固定于鼠板上，剪開(kāi)頸部皮膚，分離右頸總動(dòng)脈及左頸靜脈，血管下壓線，結(jié)扎遠(yuǎn)心端，靜脈靠遠(yuǎn)心端處剪一小口，進(jìn)行靜脈端插管，注射肝素，系線固定，再用動(dòng)脈夾夾住動(dòng)脈近心端，靠近遠(yuǎn)心端方向剪一小口，進(jìn)行動(dòng)脈端結(jié)扎，系線固定后松開(kāi)動(dòng)脈夾，建立體外循環(huán)旁路。循環(huán)15分鐘后先剪斷靜脈端觀察血液循環(huán)是否正常，若正常從動(dòng)脈端取出血栓線，在紙上沾干浮血后稱量并記錄其濕重，大鼠斷頸處死。每組大鼠10只，最后進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)并評(píng)價(jià)化合物活性。以栓重表示化合物的活性。表1的數(shù)據(jù)表明，3a，b，e-i，k具有優(yōu)秀的抗血栓活性，有效劑量為0.4nmol/kg。比發(fā)明人先前公開(kāi)的化合物結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，有效劑量低2.5倍，獲得了顯著的技術(shù)效果。
表1 3a-k的抗血栓活性()
n＝15，a)和NS比較p＜0.01。