1.一種阿爾茲海默癥的基因工程細(xì)胞株,其特征在于:是指致病基因app完全或者部分缺失的哺乳動(dòng)物細(xì)胞。
2.一種用于app基因編碼序列敲除的Cas9質(zhì)粒載體,其特征在于:是指分別插入有如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.4所示堿基序列的質(zhì)粒。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于app基因編碼序列敲除的Cas9質(zhì)粒載體,其特征在于:所述的質(zhì)粒是指PX335。
4.一種基于權(quán)利要求2或3所述的Cas9質(zhì)粒載體的app基因編碼序列敲除方法,其特征在于,包括如下步驟:將上述質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物細(xì)胞中,對(duì)app基因編碼序列進(jìn)行PCR擴(kuò)增,再對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物測序檢測app基因編碼序列發(fā)生敲除的細(xì)胞。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的質(zhì)粒載體的app基因編碼序列敲除方法,其特征在于:所述的哺乳動(dòng)物細(xì)胞為HeLa、K562、HEK293、A549、MCF-7、LNCap、N2a、SH-SY5Y或者其它哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的任一種。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的質(zhì)粒載體的app基因編碼序列敲除方法,其特征在于:是采用脂質(zhì)體Lipofectamine2000試劑進(jìn)行轉(zhuǎn)染。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的質(zhì)粒載體的app基因編碼序列敲除方法,其特征在于:PCR擴(kuò)增檢測突變類型中使用的引物序列如SEQ ID NO.6和SEQ ID NO.7所示。
8.一種根據(jù)權(quán)利要求4~8任一項(xiàng)所述的app基因編碼序列敲除方法所獲得的完全或部分缺失的病理細(xì)胞株。