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大米草液泡膜焦磷酸酶SaVP1基因及其應(yīng)用的制作方法

文檔序號(hào):12097448閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.大米草液泡膜焦磷酸酶SaVP1基因,該基因核苷酸全長(zhǎng)序列中含有SEQ ID NO.2所示的開(kāi)放閱讀框。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大米草液泡膜焦磷酸酶SaVP1基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

3.權(quán)利要求1或2所述的大米草液泡膜焦磷酸酶SaVP1基因編碼的蛋白,其氨基酸序列為SEQ ID NO.3。

4.用于擴(kuò)增權(quán)利要求1或2中所述SaVP1基因全長(zhǎng)的引物,其特征在于它包括:(1)用于5’RACE擴(kuò)增的第一輪巢式RCR引物對(duì)UPM和GSP1以及第二輪巢式PCR引物對(duì)NUP和GSP2;(2)用于3’RACE擴(kuò)增的第一輪巢式RCR引物對(duì)UPM和GSP3以及第二輪巢式PCR引物對(duì)NUP和GSP4;

其中,各引物對(duì)的序列如下所示:

所述的UPM為由UPML和UPMS按照1:5的體積比混合后稀釋而成,

UPML:CTAATACGACTCACTATAGGGCAAGCAGTGGTATCAACGCAGAGT

UPMS:CTAATACGACTCACTATAGGGC

NUP:AAGCAGTGGTATCAACGCAGAGT

GSP1:CCCATAACAGCACCAGAGCGGAAAGC

GSP2:AAATGCCTTCCCAACACC

GSP3:ATCAGTGACAATGCTGGTGG

GSP4:TGTCAGCAGAGCTGGAGTG。

5.用于克隆權(quán)利要求1中所述SaVP1基因的開(kāi)放閱讀框的引物對(duì),其特征在于所述引物對(duì)的序列為:

P3:CCATGGACCATGGCGATCTTTGCTGTTGTTATC

P4:GGTCACCTTAGAATAGCTTGAAGAGCAG。

6.含有權(quán)利要求1或2所述SaVP1基因的表達(dá)盒、重組表達(dá)載體、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或轉(zhuǎn)基因重組菌。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的重組表達(dá)載體,其特征在于所述的重組表達(dá)載體為將權(quán)利要求1所述的SaVP1基因插入到pCAMBIA1301的NcoI和BstEII位點(diǎn)之間得到的重組表達(dá)載體pCAMBIA1301-SaVP1。

8.權(quán)利要求1或2所述的SaVP1基因在提高植物耐受性上的應(yīng)用。

9.權(quán)利要求6所述的表達(dá)盒、重組表達(dá)載體、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或轉(zhuǎn)基因重組菌在提高植物耐受性上的應(yīng)用。

10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的應(yīng)用,其特征在于所述的耐受性為耐鹽性、耐旱性、耐 寒性、高產(chǎn)性和重金屬離子富集中的至少一種。

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