1.本發(fā)明專利其特征是通過(guò)下列步驟進(jìn)一步提高臍帶干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為心肌細(xì)胞的效率：
1)分離、培養(yǎng)臍帶干細(xì)胞并進(jìn)行鑒定。
2)采用誘導(dǎo)劑5-氮胞苷(5μmol/L)對(duì)臍帶干細(xì)胞進(jìn)行心肌細(xì)胞定向誘導(dǎo)并鑒定。
3)在心肌細(xì)胞定向誘導(dǎo)培養(yǎng)液中加入堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1，采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測(cè)心肌特異性基因肌鈣蛋白T，免疫細(xì)胞化學(xué)方法鑒定心肌特異性肌球蛋白Myosin抗體和連接蛋白Connexin43抗體及細(xì)胞透射電鏡檢查。
2.按權(quán)利要求1的方法，誘導(dǎo)4周后，RT-PCR檢測(cè)心肌特異性肌鈣蛋白T基因陽(yáng)性，免疫細(xì)胞化學(xué)方法鑒定心肌特異性肌球蛋白Myosin抗體和連接蛋白Connexin43抗體陽(yáng)性，心肌細(xì)胞分化效率為30％，細(xì)胞透射電鏡檢查示細(xì)胞質(zhì)膜下及胞質(zhì)中有散在小片或小束微肌絲樣結(jié)構(gòu)出現(xiàn)。
3.按權(quán)利要求1的方法，堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子的最佳濃度為20ng/ml，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1的最佳濃度為2.5ng/ml。
4.按權(quán)利要求1的方法，加入堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1后，分化為心肌細(xì)胞的臍帶干細(xì)胞明顯增加，為50-70％。