1.一種SNB基因在增加水稻的穗粒數(shù)和降低水稻的株高中的應(yīng)用,其特征在于,該SNB基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.一種人工突變的rSNB基因,其特征在于,所述的rSNB基因是指對(duì)水稻SNB基因中的microRNA172的識(shí)別位點(diǎn)進(jìn)行人工同義突變,該突變不改變氨基酸的編碼性質(zhì),其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
3.權(quán)利要求2所述的一種人工突變的rSNB基因,其特征在于,該基因編碼的蛋白質(zhì)序列如SEQ ID NO:3所示。
4.一種rSNB基因在增加水稻的穗粒數(shù)和降低水稻的株高中的應(yīng)用,其特征在于,該rSNB基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
5.權(quán)利要求3所述的rSNB基因編碼的蛋白質(zhì)在增加水稻的穗粒數(shù)和降低水稻的株高中的應(yīng)用。
6.一種利用突變水稻microRNA172識(shí)別位點(diǎn)獲得人工rSNB基因的方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)以引物SNBOEF和MSNBR組合,利用SNB編碼區(qū)的PCR產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增,并回收該P(yáng)CR產(chǎn)物;
(2)以引物MSNBF和SNBOER組合,利用SNB編碼區(qū)的PCR產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增,并回收該P(yáng)CR產(chǎn)物;
(3)將步驟(1)和步驟(2)所得的PCR產(chǎn)物回收后等量混合,并以此為模板,利用引物SNBOEF和SNBOER進(jìn)行擴(kuò)增,所得的
PCR產(chǎn)物即為microRNA172識(shí)別位點(diǎn)突變的水稻rSNB基因的蛋白質(zhì)編碼區(qū);所述的SNB編碼區(qū)的PCR產(chǎn)物是通過引物SNBOEF和SNBOER擴(kuò)增水稻葉片反轉(zhuǎn)錄后的cDNA得到的;
其中:
引物SNBOEF和MSNBR組合的序列如下所示:
正向引物:CCTACCGCCGCCAGCAGCGGCTTTTCTACGGGCACCGTCGCC,
反向引物:CCGTAGAAAAGCCGCTGCTGGCGGCGGTAGGGAGTAATGGCA;
引物MSNBF和SNBOER組合的序列如下所示:
正向引物:GGATCCATGGTGCTGGATCTCAATGTGG,
反向引物:TCTAGATTAGGCGGTCGGGGGGAAGTAGA。
7.一種轉(zhuǎn)化水稻的重組表達(dá)載體,其特征在于,包含有SEQ ID NO:2所示的基因。