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一種庫(kù)爾勒香梨果實(shí)果肉細(xì)胞計(jì)數(shù)方法與流程

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技術(shù)特征:

1.一種庫(kù)爾勒香梨果實(shí)果肉部分細(xì)胞計(jì)數(shù)方法,其特征是先用游標(biāo)卡尺測(cè)出庫(kù)爾勒香梨果實(shí)半徑R,庫(kù)爾勒香梨梨核半徑r,將庫(kù)爾勒香梨果肉部分樣品切成0.5cm*0.5cm*1cm小塊后浸泡在FAA固定液中,用提前配制好的番紅、固綠染液,對(duì)常規(guī)石蠟切片法處理好的庫(kù)爾勒香梨果肉部分切片進(jìn)行染色,經(jīng)梯度酒精、二甲苯處理后,用中性樹(shù)膠制作成永久切片,再在顯微鏡下觀(guān)測(cè)單位面積內(nèi)的細(xì)胞數(shù)目,根據(jù)公式計(jì)算出庫(kù)爾勒香梨果實(shí)果肉部分細(xì)胞數(shù)目。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用游標(biāo)卡尺測(cè)出庫(kù)爾勒香梨果實(shí)半徑R,庫(kù)爾勒香梨梨核部分半徑r,其特征在于將庫(kù)爾勒香梨果實(shí)沿中心部分橫向切開(kāi),從中心向外依次測(cè)出庫(kù)爾勒香梨梨核半徑r,庫(kù)爾勒香梨果實(shí)半徑R。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的樣品固定其特征是將庫(kù)爾勒香梨果肉部分切成0.5cm*0.5cm*1cm小塊,固定在FAA固定液中,第2天更換一次固定液,第4天更換一次固定液,第7天更換一次固定液,第15天更換一次固定液,然后將樣品保存在4±0.5℃冰箱內(nèi)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提前處理好的庫(kù)爾勒香梨果肉組織切片,其特征在于:用50%乙醇溶液浸洗固定好的庫(kù)爾勒香梨果肉組織30min→依次用65%乙醇、80%乙醇、90%乙醇、95%乙醇、100%乙醇浸泡1.5h→分別在乙醇和二甲苯體積比例依次為2∶1,1∶1,1∶2的混合溶液中各浸泡1h→純二甲苯中浸泡2h→在40℃烘箱中,用二甲苯和石蠟質(zhì)量比為1∶1的混合溶液中浸泡12 h→在60℃烘箱中浸蠟,每天更換兩次干凈的蠟液,一共更換6次→用常規(guī)石蠟切片法將庫(kù)爾勒香梨果肉切成10μm厚→貼片→脫蠟→染色(番紅固綠復(fù)染)→中性樹(shù)膠封片。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的單位面積內(nèi)的細(xì)胞數(shù)目,其特征在于:在顯微鏡下選取庫(kù)爾勒香梨果肉部分,計(jì)數(shù)一定面積S(0.03cm2<S<0.05cm2)內(nèi)的果肉細(xì)胞數(shù)目N(單位面積邊界處的細(xì)胞運(yùn)用四舍五入計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù),大部分在單位面積內(nèi)的記作1,小部分在單位面積內(nèi)的記作0)。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的根據(jù)公式計(jì)算出庫(kù)爾勒香梨果實(shí)果肉部分細(xì)胞數(shù)目,其特征在于:

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