技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一種提取太平洋牡蠣基因組DNA的方法，步驟如下：（1）取牡蠣肌肉組織粉碎后加入到含500μL?STE及50μL?10%?SDS裂解緩沖液的離心管中，并加入5μL?濃度為20mg/mL的蛋白酶K，55-57℃水浴10-60?min；（2）加入250μL飽和酚、250μL氯仿/異戊醇（24:1），輕柔晃動(dòng)5-15min，室溫10000-12000?rpm離心8-15min；（3）吸取上清液至新離心管中，重復(fù)步驟（2）；（4）吸取上清液至新離心管中，加入500μL氯仿/異戊醇，輕柔晃動(dòng)5-15min，室溫10000-12000rpm離心8-15min；（5）吸取上清液，加入50μL?3M?NaAc，添加1mL在-20℃預(yù)冷的無水乙醇，-20℃放置20-50min，10000-15000rpm離心8-15min，得到DNA沉淀；（6）70%乙醇洗滌沉淀1-3次；（7）沉淀干燥溶解去RNA；本發(fā)明的方法特別適于太平洋牡蠣DNA的提取，提取的DNA濃度、純度非常高，適于文庫構(gòu)建、PCR等后續(xù)研究。

技術(shù)研發(fā)人員：焦秀花
受保護(hù)的技術(shù)使用者：焦秀花
文檔號(hào)碼：201510956364
技術(shù)研發(fā)日：2015.12.21
技術(shù)公布日：2017.06.27