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文蛤基因組DNA的提取方法與流程

文檔序號(hào):12712433閱讀:來源:國(guó)知局
技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一種文蛤基因組DNA的提取方法,步驟如下:(1)取文蛤肌肉組織粉碎后加入到含500μL?STE及50μL?10%?SDS裂解緩沖液的離心管中,并加入5μL?濃度為20mg/mL的蛋白酶K,55-57℃水浴10-60?min;(2)加入250μL飽和酚、250μL氯仿/異戊醇(24:1),輕柔晃動(dòng)5-15min,室溫10000-12000?rpm離心8-15min;(3)吸取上清液至新離心管中,重復(fù)步驟(2);(4)吸取上清液至新離心管中,加入500μL氯仿/異戊醇,輕柔晃動(dòng)5-15min,室溫10000-12000?rpm離心8-15min;(5)吸取上清液,加入50μL?3M?NaAc,添加1mL在-20℃預(yù)冷的無水乙醇,-20℃放置20-50min,10000-15000rpm離心8-15min,得到DNA沉淀;(6)70%乙醇洗滌沉淀1-3次;(7)沉淀干燥溶解去RNA;本發(fā)明的方法特別適于文蛤DNA的提取,提取的DNA濃度、純度非常高,適于文庫(kù)構(gòu)建、PCR等后續(xù)研究。

技術(shù)研發(fā)人員:焦秀花
受保護(hù)的技術(shù)使用者:焦秀花
文檔號(hào)碼:201510956386
技術(shù)研發(fā)日:2015.12.21
技術(shù)公布日:2017.06.27

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